呂春蘭， 杭國(guó)琴， 許 云， 蘇大林， 陳 艷， 黃晶晶

襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院血流感染病原菌的分布與耐藥性分析

呂春蘭， 杭國(guó)琴， 許 云， 蘇大林， 陳 艷， 黃晶晶

目的 了解醫(yī)院血流感染病原菌的分布和耐藥狀況，為臨床治療血流感染提供依據(jù)。方法 收集襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院2014年1—12 月門(mén)診及住院血流感染患者血培養(yǎng)分離的病原菌及藥敏試驗(yàn)資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果 血培養(yǎng)共分離病原菌637株，其中以革蘭陽(yáng)性球菌為主，占55.4 %；革蘭陰性桿菌占44.1 %；真菌占0.5 %。病原菌檢出率排在首位的是凝固酶陰性葡萄球菌，占34.9 %；其次為大腸埃希菌，占14.4 %；肺炎克雷伯菌，占9.9 %；腸球菌屬，占9.9 %；金黃色葡萄球菌（金葡菌），占8.3 %；鮑曼不動(dòng)桿菌，占7.4 %等。血培養(yǎng)葡萄球菌屬細(xì)菌對(duì)青霉素高度耐藥，對(duì)紅霉素、克林霉素耐藥率相對(duì)較高，對(duì)利福平的耐藥率相對(duì)較低，尚未發(fā)現(xiàn)耐萬(wàn)古霉素、替考拉寧、利奈唑胺的菌株。腸球菌屬中屎腸球菌的耐藥率明顯高于糞腸球菌。甲氧西林耐藥金葡菌（MRSA）和凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率分別為47.2 % 和59.0 %。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)第一、二代頭孢菌素耐藥率較高，對(duì)阿米卡星耐藥率較低。產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為50.0 %和36.5 % 。血流感染中鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為51.1 %，對(duì)米諾環(huán)素耐藥率為29.7 %；銅綠假單胞菌檢出比例相對(duì)較小，對(duì)哌拉西林耐藥率較高，對(duì)其他抗菌藥物耐藥率相對(duì)較低。結(jié)論 血培養(yǎng)以革蘭陽(yáng)性球菌為主。應(yīng)加強(qiáng)對(duì)醫(yī)院血培養(yǎng)病原菌進(jìn)行耐藥監(jiān)測(cè)，掌握其耐藥特點(diǎn)，合理使用抗菌藥物，防止耐藥菌的傳播。

血培養(yǎng)； 病原菌； 耐藥性

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1菌株來(lái)源 收自本院2014年1—12月門(mén)診和住院患者的血培養(yǎng)標(biāo)本6 378份，共獲得分離病原菌637株，排除同一患者重復(fù)菌株。血培養(yǎng)陽(yáng)性率為10.0%。

1.1.2質(zhì)控菌株 質(zhì)控菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、ATCC 35218，金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923，糞腸球菌ATCC 29212和銅綠假單胞菌ATCC 27853，均購(gòu)自湖北省臨床檢驗(yàn)中心。

1.1.3實(shí)驗(yàn)材料 培養(yǎng)基、哥倫比亞瓊脂及MH瓊脂、抗菌藥物紙片，均購(gòu)自英國(guó)OXOID公司。

1.2方法

1.2.1細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌鑒定嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》常規(guī)方法進(jìn)行。藥敏試驗(yàn)采用K-B法，按CLSI 2014年版制定的標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果。

1.2.2菌株檢測(cè) 甲氧西林耐藥金葡菌（MRSA）檢測(cè)采用CLSI 2009年推薦的頭孢西丁法檢測(cè)。超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）試驗(yàn)采用CLSI推薦的表型確定試驗(yàn)，即用頭孢噻肟-克拉維酸和頭孢他啶-克拉維酸兩組紙片同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，并用大腸埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603作為質(zhì)控菌株。

1.2.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 使用數(shù)據(jù)采用WHONET 5.6版本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2　結(jié)果

2.1病原菌構(gòu)成

血培養(yǎng)共分離病原菌637株，以革蘭陽(yáng)性球菌為主，占55.4 %；革蘭陰性桿菌占44.1 %；真菌占0.5 %。病原菌檢出率排在首位的是凝固酶陰性葡萄球菌，占34.9 %，其次為大腸埃希菌占14.4 %，肺炎克雷伯菌占9.9 %，腸球菌屬占9.9 %，金葡菌占8.3%，鮑曼不動(dòng)桿菌占7.4 %，見(jiàn)表1。

表1　血培養(yǎng)常見(jiàn)病原菌構(gòu)成Table 1 Distribution of pathogens isolated from blood samples

2.2菌株檢測(cè)

MRSA、甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）檢出率分別為47.2 %（25/53）和59.0 % （131/222）。產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為50.0 %（46/92）和36.5 %（23/63）。

2.3葡萄球菌屬細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥率

葡萄球菌屬對(duì)青霉素高度耐藥，對(duì)紅霉素、克林霉素耐藥率相對(duì)較高，對(duì)利福平的耐藥率相對(duì)較低，尚未發(fā)現(xiàn)耐萬(wàn)古霉素、替考拉寧、利奈唑胺菌株，見(jiàn)表2。

表2　葡萄球菌屬對(duì)常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 2 Susceptibility of the Staphylococcus strains isolated from blood to antibiotics（%）

2.4腸球菌屬細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥率

藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示屎腸球菌的耐藥率明顯高于糞腸球菌，見(jiàn)表3。

表3　腸球菌屬對(duì)常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 3 Susceptibility of the Enterococcus strains isolated from blood samples to commonly used antimicrobial agents （%）

2.5腸桿菌科細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥率

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)第一、二代頭孢菌素耐藥率較高，對(duì)阿米卡星耐藥率較低，見(jiàn)表4。

2.6不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對(duì)常用抗菌藥物耐藥率

血流感染中鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為51.1 %，對(duì)米諾環(huán)素耐藥率為29.7 %；銅綠假單胞菌對(duì)哌拉西林耐藥率較高，對(duì)其他抗菌藥物耐藥率相對(duì)較低，見(jiàn)表5。

3　討論

本組統(tǒng)計(jì)資料顯示，我院血流感染以革蘭陽(yáng)性球菌為主，占55.4 %，革蘭陰性桿菌占44.1 %與劉彩林等［1］報(bào)道較為一致；與徐寧等［2］報(bào)道有一定差異，該文獻(xiàn)血流感染以革蘭陰性桿菌為主。血流感染的分布因不同地區(qū)而有所不同。國(guó)外報(bào)道血培養(yǎng)陽(yáng)性率為8 %～12 %，國(guó)內(nèi)報(bào)道血培養(yǎng)陽(yáng)性率6.5 %～17.4 %［3］， 我院2014年全年血培養(yǎng)6 378份檢出各種病原菌637株，陽(yáng)性率為10.0 %。血培養(yǎng)病原菌的檢出率居首位的是凝固酶陰性葡萄球菌（34.9 %），其余依次為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、腸球菌屬、金葡菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等。凝固酶陰性葡萄球菌為人體皮膚表面的正常菌群，在采血過(guò)程中易導(dǎo)致污染，本次研究采用了我國(guó)公認(rèn)的血流感染與污染的判斷標(biāo)準(zhǔn)剔除污染菌［4-5］，只統(tǒng)計(jì)感染菌。

表4　腸桿菌科細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 4 Susceptibility of Enterobacteriaceae strains isolated from blood samples to commonly used antimicrobial agents （%）

表5　不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對(duì)常用抗菌藥物敏感率和耐藥率Table 5 Susceptibility of the nonfermenting gram negative bacteria isolated from blood samples to commonly used antimicrobial agents （%）

表5（續(xù)）Table 5（continued）

本次研究顯示，葡萄球菌屬對(duì)青霉素高度耐藥，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［6］，MRSA和MRCNS的檢出率分別為47.2 %和59.0 %，多表現(xiàn)為多重耐藥。近年來(lái)，凝固酶陰性葡萄球菌引起的血流感染逐年增多，可能與近年來(lái)廣譜抗菌藥物的廣泛使用、侵襲性操作、免疫力下降使條件致病菌增殖等有關(guān)［7］。

腸球菌屬細(xì)菌的血流感染常繼發(fā)于尿路、腹腔、盆腔感染。在各種留置導(dǎo)管、動(dòng)脈通道、腹膜透析、燒傷、壓瘡潰瘍等患者中發(fā)病增多，且多系醫(yī)院內(nèi)獲得。此外，住院時(shí)間長(zhǎng)，先前曾應(yīng)用廣譜抗菌藥物，尤其對(duì)該菌抗菌活性差的頭孢菌素的應(yīng)用是引起血流感染的危險(xiǎn)因素［8］。本研究顯示，醫(yī)院血流感染腸球菌屬中屎腸球菌的檢出率高于糞腸球菌。屎腸球菌的耐藥率明顯高于糞腸球菌，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［2］。醫(yī)院血流感染未發(fā)現(xiàn)耐萬(wàn)古霉素的革蘭陽(yáng)性球菌。

本次統(tǒng)計(jì)資料顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是血流感染主要革蘭陰性桿菌。對(duì)第一、二代頭孢菌素、環(huán)丙沙星、慶大霉素具有較高的耐藥性，對(duì)含β內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合制劑、碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥率較低，治療上可作為重癥感染的首選。血流感染中ESBL陽(yáng)性的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出率分別為50.0 %和36.5 %，與文獻(xiàn)報(bào)道較為一致［9］。產(chǎn)ESBL病原菌常顯示為多重耐藥、泛耐藥菌。

血流感染中鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為51.1 %，略低于文獻(xiàn)報(bào)道［8］。但也超過(guò)了50 %。鮑曼不動(dòng)桿菌引起的血流感染多系醫(yī)院內(nèi)獲得，患者?；加袊?yán)重的發(fā)熱性疾病，臨床治療相當(dāng)棘手。碳青霉烯類(lèi)抗生素耐藥菌株體外試驗(yàn)對(duì)含舒巴坦制劑、多黏菌素B或黏菌素敏感［10］。

血流感染銅綠假單胞菌檢出比例相對(duì)較小，對(duì)哌拉西林耐藥率較高，對(duì)其他抗菌藥物耐藥率相對(duì)較低。近年來(lái)，多重耐藥和泛耐藥菌株的出現(xiàn)給臨床抗感染治療帶來(lái)嚴(yán)重問(wèn)題［11］，且泛耐藥株引起的血流感染多來(lái)自ICU患者［12］，病情兇險(xiǎn)、病死率極高，血流感染中銅綠假單胞菌對(duì)頭孢他啶的耐藥率明顯低于頭孢吡肟，可作為治療的選用藥物之一。

與綜合醫(yī)院相比，從病原菌檢出率來(lái)看中醫(yī)醫(yī)院血流感染革蘭陽(yáng)性球菌和凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率（55.4 %，34.9 %）低于綜合醫(yī)院的檢出率（61.9 %，43.6 %），鮑曼不動(dòng)桿菌和腸球菌的檢出率（7.4 %，9.9 %）高于綜合醫(yī)院的檢出率（3.7 %，7.7 %）［8］。從藥敏結(jié)果來(lái)看，綜合醫(yī)院血流感染分離的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南、美羅培南有耐藥的情況。本次研究中，我院的血流感染尚未發(fā)現(xiàn)耐亞胺培南、美羅培南的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌。萬(wàn)古霉素、利奈唑胺對(duì)血流感染葡萄球菌和腸球菌的敏感率為100 %，與綜合醫(yī)院較為一致［13］。

全球耐藥菌株的增長(zhǎng)和播散使臨床用藥面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，中醫(yī)院血流感染與綜合醫(yī)院既有相似之處同時(shí)也存在一定的差異，加強(qiáng)中醫(yī)院血流感染細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)，掌握病原菌耐藥規(guī)律，根據(jù)藥敏結(jié)果正確使用抗菌藥物，減少耐藥菌株尤其是多重耐藥菌株的發(fā)生和傳播對(duì)治療血流感染有著重要的意義。

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讀者· 作者· 編者

《中國(guó)感染與化療雜志》常用縮略語(yǔ)

Distribution and antibiotic resistance of pathogenic bacteria isolated from bloodstream infections in Xiangyang Traditional Chinese Medicine Hospital

Lü Chunlan， HANG Guoqing， XU Yun， SU Dalin， CHEN Yan， Huang Jingjing. （Department of Laboratory Medicine， Xiangyang Traditional Chinese Medicine Hospital Affiliated to Hubei University of Chinese Medicine，Xiangyang Hubei 441000， China）

Objective To analyze the distribution and resistance profile of the pathogens isolated from bloodstream infections for better management of bloodstream infections. Methods The pathogenic bacteria were isolated from outpatients and inpatients with bloodstream infection during the period from January to December in 2014 and subjected to antimicrobial susceptibility testing. The susceptibility data were reviewed retrospectively. Results A total of 637 strains of pathogenic bacteria were isolated from blood culture， including gram positive cocci （55.4%， 353/637）， gram negative bacilli （44.1%， 281/637）， and fungus （0.5%， 3/637）. The most common pathogen was coagulase-negative Staphylococcus （34.9%）， followed by Escherichia coli （14.4%）， Klebsiella pneumoniae （9.9%）， Enterococcus （9.9%）， Staphylococcus aureus （8.3%） and Acinetobacter baumannii （7.4%）. The staphylococcal strains isolated from blood were highly resistant to penicillin， erythromycin， clindamycin， but showed low resistance to rifampin. No staphylococcal strain was found resistant to vancomycin， linezolid， or teicoplanin. Enterococcus faecium isolates showed significantly higher resistance rate than Enterococcus faecalis. The prevalence of methicillin-resistant S. aureus was 47.1% in the staphylococcal strains isolated from blood. And 59.0% of the coagulase-negative Staphylococcus isolates from blood were resistant to methicillin. E. coli and K. pneumoniae isolates were highly resistant to the first and second generationcephalosporins， but showed relatively low resistance to amikacin. Extended-spectrum beta-lactamases were produced in 50.0% of the E. coli isolates and 36.5% of the K. pneumoniae isolates. Of the A. baumannii strains isolated from bloodstream infections，51.1% were resistant to imipenem， and 29.7% resistant to minocycline. A few of Pseudomonas aeruginosa strains were isolated from bloodstream infections， which were highly resistant to piperacillin. Conclusions More than half of the pathogens isolated from bloodstream infection in this hospital are gram positive bacteria. The resistance profile of these pathogens are helpful for doctors to select appropriate antimicrobial therapies in this hospital.

blood culture； pathogenic bacteria； antibiotic resistance profile血流感染是臨床常見(jiàn)嚴(yán)重感染性疾病，起病急、病死率高。為了解我院血流感染病原菌的臨床分布及耐藥情況。本研究對(duì)2014年1—12 月門(mén)診及住院患者血培養(yǎng)分離的637株病原菌進(jìn)行了回顧性分析?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

英文縮寫(xiě)　英文全稱(chēng)中文全稱(chēng)AIDS　acquired immune deficiency syndrome　　獲得性免疫缺陷綜合征ALT　alanine aminotransferase 　　丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST　aspartate aminotransferase 　　天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶BUN　blood urea nitrogen　　血尿素氮CLSI　American Clinical and Laboratory Standards Institute　　美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)Cr　creatinine　　肌酐ESBL　extended spectrum β-lactamase　　超廣譜β內(nèi)酰胺酶FDA　Food and Drug Administration　　食品藥品監(jiān)督管理局HIV　human immunodeficiency virus　　人類(lèi)免疫缺陷病毒I intermediate中介ICU　intensive care unit　　重癥監(jiān)護(hù)病房MIC　minimum inhibitory concentration　　最低抑菌濃度MRCNS　methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococcus　　甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌MRSA　methicillin-resistant Staphylococcus aureus　　甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌MSCNS　methicillin-susceptible coagulase-negative Staphylococcus甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌MSSA　methicillin-susceptible Staphylococcus aureus　　甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌PCR　polymerase chain reaction 　　聚合酶鏈反應(yīng)R resistant耐藥S susceptible or sensitive　　敏感VRE　vancomycin-resistant Enterococcus　　萬(wàn)古霉素耐藥腸球菌WHO　World Health Organization　　世界衛(wèi)生組織

·論著·

R378

A

1009-7708（2016）01-0024-06

10.16718/j.1009-7708.2016.01.006

湖北中醫(yī)藥大學(xué)附屬襄陽(yáng)市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北襄陽(yáng) 441000。

呂春蘭（1973—），女，學(xué)士，副主任技師，主要從事臨床微生物研究。

呂春蘭，E-mail： lvchunlan888@163.com。

2015-05-14

2015-08-10