劉燕芳, 種貝貝，辛?xí)詡? 高德民

(山東中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，山東 濟南 250355)

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不同產(chǎn)地、不同種類以及不同部位中的石韋總黃酮含量分析

劉燕芳, 種貝貝，辛?xí)詡? 高德民*

(山東中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，山東 濟南 250355)

目的：采用紫外可見分光光度法對不同產(chǎn)地、不同種類以及不同部位的石韋藥材中的總黃酮的含量進行分析研究，對藥用石韋的質(zhì)量控制提供一定的依據(jù)。 方法： 利用60%乙醇超聲提取不同石韋粉末，采用紫外-可見光分光光度法在510 nm波長處測吸光度，分析不同石韋中的總黃酮含量。 結(jié)果：不同種類、不同產(chǎn)地以及不同部位的石韋中總黃酮含量存在明顯差異。 結(jié)論：通過本實驗對不同石韋中的總黃酮含量測定的分析，為石韋藥材品種的鑒別和質(zhì)量研究提供了一定的參考。

石韋；紫外-可見分光光度法；總黃酮含量

石韋屬于水龍骨科(Polypodiaceae)石韋屬(Pyrrosia)植物，性味甘、苦，微寒，歸肺、膀胱經(jīng)[1]，有利尿通淋、清熱止血的作用[2-3]，用于熱淋，血淋，石淋，小便不通，淋瀝澀痛，肺熱喘咳等癥[4-6]。廬山石韋[Pyrrosiasheareri(Bak.)Ching]、石韋[Pyrrosialingua(Thunb.) Farwell]和有柄石韋[Pyrrosiapetiolosa(Christ)Ching]現(xiàn)已收載于藥典，此外，還有氈毛石韋[Pyrrosiadrakeana(Franch.) Ching]、華北石韋[Pyrrosiadavidii(Baker) Ching]等[7]。石韋中主要含有黃酮、綠原酸、芒果苷、木犀草素等多種化學(xué)成分[8]。黃酮類化合物具有抗過敏、降血壓、抗炎、抗菌、抗突變、抗?jié)?、保肝和降血脂等活性[9]，現(xiàn)已制成多種中成藥，如排石顆粒、蕩滌靈、復(fù)方石韋片等。不同種類、產(chǎn)地以及不同部位的石韋藥材之間可能存在差異，這會導(dǎo)致不同石韋在藥用功效上的不同，本實驗針對不同地域的廬山石韋、氈毛石韋、膠東石韋、有柄石韋、石韋及其不同部位的總黃酮含量進行測定[10]，分析其差異，以期對臨床用藥提供指導(dǎo)。

1　材料與儀器

1.1材料

廬山石韋(四川天順康、湖北)、有柄石韋(浙江、華北新采、梯子山膠東、長白山、亳州、濟南新采，膠東、陜西洋縣、河北、四川成都、云南、湖北、四川、江蘇)、石韋(廣西桂林、安徽、浙江溫州、福建寧德、云南昆明)、云鄉(xiāng)石韋、中越石韋(廣西宜州)、華北石韋(黃巢)以及氈毛石韋(安徽亳州)如表1，蘆丁(批號：20130917購置上海金穗生物科技有限公司)純度≥98%，亞硝酸鈉(天津博迪化工股份有限公司)、氯化鋁(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所)、氫氧化鈉(天津市登科化學(xué)試劑有限公司)均為分析純。60%乙醇，保鮮膜，蒸餾水。

1.2儀器

上海菁華754PC 紫外-可見分光光度計、KQ-250E型醫(yī)用超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)、循環(huán)水式多用真空泵(菏澤市鑫源儀器有限公司)、微量移液器(上海求精生化試劑儀器有限公司)、電子天平/H27-A100(福州華志科學(xué)儀器有限公司)、電子天平/FA2004N(上海菁華儀器有限公司)、DS-T250 型高速多功能粉碎機(上海市頂帥工貿(mào)有限公司)、上海樹立FXB101-1 加熱鼓風(fēng)干燥箱。

表1　不同產(chǎn)地、品種和提取部位的石韋中黃酮含量

2　實驗方法

2.1總黃酮的提取及測定

稱取一定量的石韋藥材置于錐形瓶中，加入60%乙醇20 mL，超聲1.5 h，抽濾，移取濾液1 mL置于試管中，作為供試品藥材溶液。用60%的乙醇稀釋，依次加入顯色劑(5%亞硝酸鈉0.3 mL，10%氯化鋁0.3 mL、1 mol/L氫氧化鈉4 mL)搖勻，顯色15 min后，采用紫外-可見分光光度法在510 nm波長處測吸光度。

2.2標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

精密稱取蘆丁4.0 mg置于100 mL燒杯中，加入60%乙醇30 mL，經(jīng)超聲溶解，得到0.13 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

取上述標(biāo)準(zhǔn)品溶液，稀釋不同濃度，采用紫外-可見分光光度法在510 nm波長下測吸光度[11]，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立回歸方程y=13.331x+0.023 5,R2=0.993 1。

2.4樣品總黃酮含量的測定

以蘆丁作為對照品，采用亞硝酸鈉-氯化鋁-氫氧化鈉顯色法、紫外-可見分光光度法進行測定，得各石韋中總黃酮的含量如表1。

3　實驗結(jié)果

從表1中可見，石韋中不同產(chǎn)地、品種和提取部位的總黃酮含量存在著明顯的區(qū)別。其中以安徽的石韋總黃酮最高，湖北的廬山石韋含量次之，有柄石韋中總黃酮含量相對較少，但是四川成都的有柄石韋中的總黃酮含量最少，還不足10%。同種石韋中，一般葉中的總黃酮含量較高，葉柄和根莖中含量較少，但是產(chǎn)于湖北的廬山石韋和安徽的石韋根莖中總黃酮含量明顯超過其他的藥用部位。因此，石韋在藥用時要充分考慮到不同藥材中有效成分的含量以期達(dá)到最好的藥用效果。

本實驗收集了全國20多種石韋樣品，通過對不同提取部位黃酮含量的測定，發(fā)現(xiàn)有柄石韋(江蘇)、中越石韋(廣西宜州)以及氈毛石韋(安徽亳州)根莖中也含有豐富的黃酮類成分。因此，建議《中國藥典》增加根莖類入藥部分，以最大限度地利用石韋這一珍貴資源，為其臨床應(yīng)用提供了參考依據(jù)。

[1]張藝軒，李開通，李秋月，等.不同產(chǎn)地和品種石韋藥材的高效液相指紋圖譜研究[J].中藥材,2011(1):20-26.

[2]陳露，劉布鳴. 中藥石韋的研究概況[J]. 廣西醫(yī)學(xué)，2011, 33(11): 1486-1489.

[3]中國科學(xué)院植物研究所.中國高等植物圖鑒：第1冊[M].北京：科學(xué)出版社，1983.

[4]國家藥典委員會.中國藥典：一部[S]. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2010:83-84.

[5]薛芳,許占民. 中國藥物大全：中藥卷[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2005.

[6]江蘇省植物研究所.新華本草綱目：第3冊 [M] .上海:上海科技出版社, 1991: 715 .

[7]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志：第21卷[M].北京：科學(xué)出版社, 1979： 18-19.

[8]鄭興，許云龍，徐軍. 西南石韋化學(xué)成分的研究[J] . 中國中藥雜志, 1998, 23( 2) : 98-99.

[9]PARALLADE J ,GUINEA M. Flavonoid inhibitors of trypsin and leucineaminopeptidase :A proposed mathematical model for IC50estimation [J]. J Nat Prod, 1995, 58 (6): 823-829.

[10]朱賁峰,賀肇東,王政峰,等.不同產(chǎn)地青錢柳的總黃酮含量比較[J].海峽藥學(xué), 2004, 16(3): 88-8.

[11]李曉丹，肖婭萍. 5種藥用石韋總黃酮的提取及測定[J]. 中國野生植物資源, 2009,2(1): 59-61.

Determination of Total Flavone inPyrrosiafrom Different Areas, Species and Extractive Fractions

Liu Yanfang, Zhong Beibei, Xin Xiaowei, Gao Demin*

(School of Pharmacy, Shandong University of TCM, Jinan 250355, China)

Objective : To compare total flavone in different areas, different species and different extractive fractions ofPyrrosia. Methods: To extract with 60% ethyl alcohol then detect by UV-VIS spectrophotometry in 510 nm. Results: There are obvious differences of total flavone content in different species, different areas and different extract fractions ofPyrrosia. Conclusion: According to the analysis of total flavone content in differentPyrrosia, some references were provided for the identification and research ofPyrrosiaspecies.

Pyrrosia; UV-VIS spectrophotometry; total flavone

10.3969/j.issn.1006-9690.2016.04.010

2015-12-21

山東中醫(yī)藥大學(xué)2014年SRT資助項目(2014382)。

劉燕芳(1994—)，女，山東中醫(yī)藥大學(xué)2012級中藥學(xué)本科生。

高德民，男，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：中藥資源與質(zhì)量控制。E-mail:gdm607@126.com

R284.1

A

1006-9690(2016)04-0037-03