王 可

（吉安市中心血站，江西吉安343000）

·病例報告·

1例A3亞型

王 可

（吉安市中心血站，江西吉安343000）

疑難血型鑒定；ABO亞型；A3亞型；臨床輸血

臨床輸血配型時常常會涉及到紅細(xì)胞血型、抗原-抗體反應(yīng)等免疫學(xué)問題。免疫血液學(xué)是伴隨著臨床輸血的歷史而發(fā)展，是臨床輸血安全有效的重要保障。最近筆者接收醫(yī)院患者血型正反定型不符，疑難血型鑒定申請1例，經(jīng)血型血清學(xué)試驗(yàn)后確認(rèn)為A3亞型，現(xiàn)報告如下。

1 病例簡介

患者，男，6歲，2015年10月20日因皮膚出血點(diǎn)、口腔黏膜血皰就診，接診醫(yī)生為患者申請備血，在血型檢查中，發(fā)現(xiàn)ABO血型正反定型不一致，隨后申請疑難血型鑒定。

2 血型血清學(xué)試驗(yàn)

2.1 試劑與方法抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1和抗-H試劑均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供，A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞反定型試劑紅細(xì)胞均由北京金豪制藥股份有限公司提供；經(jīng)典試管法鑒定ABO血型，并采用微柱凝膠、吸收放散和血型物質(zhì)檢測等方法相結(jié)合［1］，在顯微鏡下觀察結(jié)果。

2.2 患者血型正反定型見表1。

2.3 患者H抗原反應(yīng)結(jié)果見表2。

2.4 患者放散液反應(yīng)結(jié)果見表3。

2.5 吸收放散試驗(yàn)取1ml患者紅細(xì)胞，用生理鹽水充分洗滌三次后，制成壓積紅細(xì)胞，再與等量的抗-A血清試劑混合，4℃吸收1h，其間顛倒搖勻4次，用冰鹽水在13min內(nèi)洗滌輕吸打離心棄上清液反復(fù)6次后得到吸收后的壓積紅細(xì)胞，再加入等量的鹽水混勻，至56℃水浴中輕搖1min，靜置9min后離心取放散液與Ac、Oc反應(yīng)，患者放散液與Ac有凝集、與Oc無凝集，表明患者紅細(xì)胞有弱A抗原存在。

2.6 唾液血型物質(zhì)檢測唾液中檢出A、H兩種血型物質(zhì)。

2.7 直接抗人球試驗(yàn)、間接抗人球試驗(yàn)均呈陰性。

3 討論

當(dāng)經(jīng)血型血清學(xué)試驗(yàn)顯示正反定型不一致及抗原減弱等多種表現(xiàn)形式時，稱為ABO亞型。ABO血型亞型是表型，很多亞型具有特異性的抗原，主要是經(jīng)血型血清學(xué)試驗(yàn)以抗原性弱為主要特征的多種表型，而經(jīng)血型血清學(xué)確定的紅細(xì)胞同一ABO亞型，經(jīng)過抗原分子水平、糖基轉(zhuǎn)移酶和基因水平等研究亦證實(shí)其存在著異質(zhì)性［2］。ABO血型表型的判定，特別是對亞型的判定往往是根據(jù)與抗體反應(yīng)強(qiáng)度、H抗原強(qiáng)度、吸收放散能力等血清學(xué)試驗(yàn)的反應(yīng)格局［3］。應(yīng)用血清學(xué)對ABO亞型進(jìn)行分類時，正定型的凝集強(qiáng)度和“凝集的狀態(tài)”是很重要的信息［4］。

表1 血型正反定型反應(yīng)結(jié)果

表2 患者H抗原反應(yīng)結(jié)果

表3 患者放散液反應(yīng)結(jié)果

此患者標(biāo)本血清學(xué)檢測結(jié)果在室溫立即離心與抗-A反應(yīng)很弱，此時考慮A抗原減弱或者亞型，經(jīng)多次離心后出現(xiàn)了3+mf，見表1?；旌弦曇芭c弱凝集有時候很難區(qū)分，弱凝集僅是指肉眼看到的背景混濁，混合視野是專指在鏡下可以觀察到游離細(xì)胞，兩者缺一不可。A3亞型紅細(xì)胞最大特征為鏡下呈混合視野凝集（mixed field agglutination，mf），即A3紅細(xì)胞與抗-A和大多數(shù)抗-AB孵育后出現(xiàn)一些有數(shù)個紅細(xì)胞形成的小凝集塊，并被絕大部分游離的非凝集紅細(xì)胞包圍［5］?？?A1試劑是用于檢測A亞型的試劑，標(biāo)本紅細(xì)胞與抗-A1反應(yīng)呈陰性，抗-AB試劑與Ax、Bx抗原會產(chǎn)生較強(qiáng)反應(yīng)，常用于鑒定Ax和Bx，標(biāo)本紅細(xì)胞與抗-AB反應(yīng)呈3+mf。表達(dá)弱A抗原的紅細(xì)胞在直接離心試驗(yàn)中不被抗-A所凝集，必須通過吸收這種特異性抗體，再用放散的方法洗脫吸收的抗體，以此來證明弱A抗原的存在。吸收放散試驗(yàn)極為敏感，對試驗(yàn)技術(shù)的要求也較高，通常需要設(shè)置合適的對照，比較好的對照是用等量O型紅細(xì)胞與待檢細(xì)胞平行吸收放散，然后平行檢測放散液中的抗體［4］。見表3，患者放散液與Ac有凝集、與Oc無凝集，表明患者紅細(xì)胞有弱A抗原存在。H抗原的數(shù)量與個體的ABO血型相關(guān)，是A、B抗原的前身，大部分亞型H抗原會增強(qiáng)，AB亞型的H抗原是會減弱，而罕見孟買型、類孟買型無H抗原。根據(jù)能量守恒定律，H抗原最強(qiáng)，Oc作為純陽性對照，Bc為強(qiáng)陽性對照，若病人細(xì)胞抗H檢測反應(yīng)強(qiáng)度在Oc、Bc之間，則亞型的可能性大，見表2，此患者抗-H結(jié)果為3+w。一般用唾液檢測ABO血型物質(zhì)［6］。唾液中有A和H兩種血型物質(zhì)。

對ABO亞型，尤其是Ax亞型因血清中常含抗-A1［7］，血交叉時應(yīng)先用鹽水介質(zhì)試管法篩選，再用Polybene和微柱凝膠法進(jìn)一步交叉驗(yàn)證，以選擇配型相合的血液進(jìn)行輸注為宜。A3亞型的產(chǎn)生原因與遺傳有關(guān)系［8］，為了解該患者A3亞型的遺傳來源，可進(jìn)一步做正反定型與抗-H物質(zhì)檢測家系調(diào)查。ABO血型基因的運(yùn)用可以很好地解決血型鑒定困難問題［9］。當(dāng)這些疑難血型誤判時，將會使受血者發(fā)生嚴(yán)重的輸血性溶血反應(yīng)，導(dǎo)致急性腎功能衰竭而危及患者生命［10］。因此ABO血型鑒定的準(zhǔn)確性是非常重要的，只有準(zhǔn)確鑒定血型才是保證安全輸血最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)之一［11］。

［1］胡麗華.臨床輸血檢驗(yàn)［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2004，8： 54-61，151-152.

［2］Daniels G.Human Blood Groups［M］.2th ed，Oxford：Blackwell Science Ltd，2002：32-37.

［3］曾光，李凌波.一例A3亞型血型的鑒定及分析［J］.中國熱帶醫(yī)學(xué)，2014，14（4）：506.

［4］向東.ABO亞型的檢測［J］.中國輸血雜志，2010，23（8）：577-580.

［5］Pipatvanichkul A，Permpikul P，Vejbaesya S，et al.Mutation of ABO gene in Thai blood donors with A3 phenotype［J］.J Med Assoc Thai，2011：94（3）：379-385.

［6］中華人民共和國衛(wèi)生部.中國輸血技術(shù)操作規(guī)程血站部分［M］.天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1998：81-83.

［7］Henk-Brunner H.ABO（H）system［M］∥Sehenkel-Brunner H.Human blood groups chemical and biochemical basis of antigen specificity. 2nd ed.New York：Springer，2000：118-161.

［8］楊天楹，楊成民，田兆嵩.臨床輸血科［M］.北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1993：51-54.

［9］喻瓊，蘇宇清，鄧志輝.異常ABO表型遺傳的分子背景研究［J］.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31（1）：49-51+55.

［10］李效平，曹丹銘.B3亞型產(chǎn)婦大出血輸0型血搶救1例［J］.中國輸血雜志，2002，15（3）：203-220.

［11］馬曉旭.1例A亞型的家系調(diào)查情況分析［J］.中國醫(yī)藥指南，2015，26（13）：215-216.

R457.1+1

A

1674-1129（2016）05-0699-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.059

2016-06-02；

2016-09-01）