李治明，張國良，楊雪梅

(1 海南大學(xué)材料與化工學(xué)院，海南 ?？?570228：2 康縣岸門口中學(xué)，甘肅 隴南 746500；3 康縣大南裕中學(xué)，甘肅 隴南 746505)

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脂樹果莢的化學(xué)成分分析

李治明1，張國良2，楊雪梅3

(1 海南大學(xué)材料與化工學(xué)院，海南 海口 570228：2 康縣岸門口中學(xué)，甘肅 隴南 746500；3 康縣大南裕中學(xué)，甘肅 隴南 746505)

以脂樹果莢為材料,為進(jìn)一步揭示脂樹果莢內(nèi)部復(fù)雜的生理生化過程提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù),同時為合理保護(hù)脂樹果莢資源提供理論依據(jù)。通過定性分析討論果莢中化學(xué)成分，再以定量方法測定各種化學(xué)成分的含量。其中粗脂肪采用索氏提取法，可溶性總糖、酚類、總黃酮、總皂苷采用分光光度法，淀粉采用酸水解法，揮發(fā)油采用氣相色譜法測定，所測得脂樹果莢中粗脂肪3.56%、可溶性總糖1.36%、淀粉8.82%、總黃酮3.63%、酚類0.62%、總皂苷0.93%。

脂樹果莢；化學(xué)成分；含量測定

脂樹(S.glabra Merr.ex de Wit)，別名:油楠、 科楠、蚌殼樹、柴油樹是熱帶、亞熱帶的能源樹種，除去種子即得果莢。脂樹的莢果成熟期為6～8月，莢果扁平，斜圓形，長4～8 cm，闊3.8～4.7 cm， 果瓣堅硬，有散生、短的直刺，很少無刺，刺在受到損傷時常有膠汁流出。脂樹體內(nèi)含有可直接點燃的油脂，具有作為能源植物開發(fā)利用的潛能，而其果莢同樣具有很高的研究價值[1]。目前對于脂樹的研究利用不斷的加強(qiáng)，還進(jìn)行了人工栽培大規(guī)模培育，然而由于其果實產(chǎn)量低，采收期集中，采集困難，對其的研究還處于初級階段，尚未有果莢化學(xué)成分的研究報道。

1 材料、儀器與試劑

1.1 材料

脂樹果莢采自海南中部山區(qū)，經(jīng)鑒定為脂樹，采集后的脂樹果莢風(fēng)干后密封后保存于干燥箱備用。

1.2 儀器與試劑

UV-2450紫外可見分光光度計，日本島津公司；2D-2A型自動電位滴定儀，上海大普儀器有限公司；毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(HP6890/5973MSD)，美國Hewlett-Packark 公司。

本實驗中所用試劑均為分析純(A.R.)，水均為蒸餾水,除非另有規(guī)定。

2 實驗方法

2.1 脂樹果莢化學(xué)成分的系統(tǒng)預(yù)試檢測

制備脂樹果莢水提取液、乙醇提取液、石油醚提取液進(jìn)行系統(tǒng)預(yù)試。

2.2 總皂甙測定

試樣經(jīng)正丁醇多次萃取[2],減壓蒸干,在強(qiáng)酸性無水條件下,以香草醛-高氯酸為顯色劑，人參皂甙為對照品，采用比色法測定，標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0066x-0.011, R2=0.9997，其中x為總酚含量(μg/mL)，y為吸光度，檢測波長為560 nm，以人參皂甙來計算。

2.3 淀粉含量測定

稱取2 g(精確至0.001 g)脂樹果莢粉末，用50 mL的石油醚沖洗果莢粉末除去脂肪，棄去石油醚。用150 mL 85%的乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘渣，除去果莢粉末中可溶性糖類，濾干乙醇后，將殘留物轉(zhuǎn)移至250 mL錐形瓶，并用50 mL蒸餾水洗滌濾紙，并入錐形瓶中，加入鹽酸(1+1)30 mL，沸水浴回流2 h，回流完畢后立即冷卻，得待測液。用酸水解法測定淀粉含量[3]。

2.4 可溶性總糖測定[4]

稱取1.0000 g左右脂樹果莢粉末加100 mL蒸餾水于圓底燒瓶中，置于沸水浴中30 min，冷卻，將溶液和殘渣均轉(zhuǎn)移至250 mL的容量瓶中，定容至刻度，抽濾，作為待測液。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0628x+0.0231；R2=0.9949，在490 nm處測定吸光度(y)，從測得的吸光度值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查算出待測液的葡萄糖含量x(μg/mL)，并且計算出樣品中可溶性總糖的百分含量[5]。

2.5 揮發(fā)油測定

取果莢100 g，用手撕成小塊，放在圓底燒瓶中，加水(水要淹沒果莢)。用電熱套加熱，回流3～4 h，蒸出揮發(fā)油。靜置過夜，然后把管內(nèi)蒸出的油和水一同倒出來，用一定量的乙醚萃取，留下乙醚層得待測液[6]。氣相色譜條件：石英毛細(xì)管柱HP-FFAP(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，程序升溫：從60 ℃開始，以8 ℃/min升到150 ℃, 以6 ℃/min升到250 ℃,保持5 min；載氣為He，柱流量1.0 mL/min，進(jìn)樣口溫度250 ℃，分流比50:1。質(zhì)譜條件：EI源；電離電壓70 eV，離子源溫度230 ℃，掃描范圍10～500 aum，進(jìn)樣量1.0 μL[7]。

2.6 粗脂肪測定-索氏抽提法

稱取10 g樣品,加足量乙醚,用索氏提取器提取10 h,蒸去提取液中的乙醚,將濾渣真空干燥至恒重,計算脂肪含量[8]。

2.7 總黃酮測定

總黃酮含量的測定采用硝酸鋁-亞硝酸鈉比色法，標(biāo)準(zhǔn)曲線: y=12.175x-0.0027，R2=0.9991，其中：y為吸光度，x為提取液中總黃酮含量(μg/mL)，檢測波長510 nm，以蘆丁來計算[9]。

2.8 總酚含量測定

總酚酸含量的測定采用 Folin-Ciocalteu 法，標(biāo)準(zhǔn)曲線: y=48.167x+0.0011，R2=0.9991，其中：x 為總酚含量(μg/mL)，y 為吸光度，檢測波長為765 nm，以沒食子酸來計算[10]。

3 結(jié)果與討論

3.1 脂樹果莢化學(xué)成分的系統(tǒng)預(yù)試

由表1得知，脂樹果莢中含有揮發(fā)油、油脂、甾體、三萜皂甙、蛋白質(zhì)、氨基酸、有機(jī)酸、酚類、鞣質(zhì)、糖類、香豆素、內(nèi)酯類、黃酮類等。

表1 脂樹果莢化學(xué)成分試管預(yù)試法鑒定結(jié)果

“+”代表實驗結(jié)果呈陽性，“-”代表實驗結(jié)果呈陰性，“±”表示實驗結(jié)果不穩(wěn)定。

3.2 總皂甙含量的測定

正丁醇萃取法測得的體積為58.788 μL，計算可得正丁醇萃取法中樣品的皂甙含量為0.93%。

3.3 淀粉含量測定

用酸水解法測定淀粉含量，經(jīng)計算樣品中淀粉的含量為8.82%。

3.4 可溶性總糖測定

以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品,用蒽酮試劑顯色后進(jìn)行比色，經(jīng)計算樣品中可溶性總糖的含量為1.36%。

3.5 揮發(fā)油測定

圖1 揮發(fā)油測定

峰號化合物名稱分子式分子量保留時間相對含量/%11S-(1,3a,3b,6a,6b)-十氫-3a-甲基-6-亞甲基-1-異丙基-環(huán)丁烷-[1,2,3,4]并二環(huán)戊烯C15H24204.196.6113.5321-甲基-6-亞甲基雙環(huán)[3.2.0]庚烷C9H14122.1111.790.343氧化石竹烯C15H24O220.1812.4742.08412-氧雜二環(huán)[9.1.0]十二-3,7-二烯,1,5,5,8-四甲基-[1R-(1R*,3E,7E,11R*)]-C15H24O220.1813.193.505螺[4.4]壬烷-2-酮C9H14O138.1013.244.186(-)-匙葉桉油烯醇C15H24O220.1813.968.41710,10-二甲基-2,6-二甲基乙烯基二環(huán)[7.2.0]十一烷-5β.-醇C15H24O220.1815.605.818異香樹烯環(huán)氧化物C15H24O220.1815.933.739石竹烯C15H24204.1916.070.45101-亞甲基-2B-羥甲基-3,3-二甲基-4α-(3-甲基丁-2-烯基)-環(huán)正己烷C15H26O222.2016.348.42111-十六碳烯C16H32224.2516.784.5312蒽C14H10178.0819.954.25132-乙基-2-甲基-十三烷醇C16H34O242.2620.900.78

研究結(jié)果表明，已鑒定的24種揮發(fā)性成分中，醛酮類7種、醇類10種、環(huán)烴類1種、烯烴類1種、胺類2種、酯類3種六大類化合物。其中以2,4二甲基-2,4-庚二烯醛、3,7,11-三甲基-1,6,10-十二碳三烯-3-醇、2-蒈烯-4-醇、2-(5-甲基呋喃-2-基)-丙酸乙醛、反式-2-甲基-5-(1-甲基乙烯基)-2-環(huán)己烯-1-醇等為構(gòu)成氣味和香味的主要物質(zhì)。

3.6 粗脂肪測定

用索氏提取法測定粗脂肪含量，經(jīng)計算粗脂肪的百分含量為3.56%。

3.7 總黃酮測定

采用硝酸鋁-亞硝酸鈉比色法測定黃酮含量，經(jīng)計算樣品中總黃酮含量為3.63%。

3.8 總酚含量測

采用 Folin-Ciocalteu 法測定總酚含量，經(jīng)計算樣品總酚的含量為0.62%。

4 結(jié) 論

本論文中通過各化學(xué)成分的特征性反應(yīng)，表明脂樹果莢中含有揮發(fā)油和脂肪、皂甙、萜類、甾體、糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、淀粉、香豆素、內(nèi)酯及其它酯類、黃酮類、酚類、有機(jī)酸、強(qiáng)心甙、酚醌類等。進(jìn)一步研究測定得到了以上各化學(xué)組成的含量。其中，采用正丁醇萃取法處理脂樹果莢乙醇浸出液，測定皂甙的含量為0.93%；用酸水解法測定淀粉含量為8.82%；用分光光度法分別測定可溶性總糖、總黃酮、總酚的含量，分別為1.36%、3.63%、0.62%；用索氏提取法測定粗脂肪含量為3.56%。為進(jìn)一步研究開發(fā)和利用脂樹果莢資源提供了科學(xué)依據(jù)。

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Study on Chemical Constituents of Sindora Glabra Merr.ex de Wit Pod

LIZhi-ming1,ZHANGGuo-liang2,YANGXue-mei3

(1 School of Materials and Chemical Engineering, Hainan University, Hainan Haikou 570228;2 Middle School of Anmenkou,Gansu Longnan 746500;3 Middle School of Danayu, Gansu Longnan 746500, China)

Using fat tree fruit pods as materials, basic data was provided for the complex physiological and biochemical process of fat tree fruit pods, and theoretical basis was provided for reasonable protection resource of fat tree fruit pods. Through qualitative analysis, chemical composition in pod was discussed, quantitative method was studied to determine the content of all kinds of chemical composition. Soxhlet extraction method was used in crude fat, spectrophotometry was used in soluble total sugar, phenols, flavonoids and total saponins, acid hydrolysis method was used in starch, gas chromatography was used in determination of volatile oil, the determination results showed that in fat measured tree fruit pods, crude fat was 3.56%, soluble total sugar was 1.36%, starch was 8.82%, flavonoids was 3.63%, phenols was 0.62% and total saponins was 0.93%.

Sindora glabra Merr.ex de Wit pod; chemical composition; content determination

李治明(1993-)，男，碩士研究生，主要從事精細(xì)化工與天然產(chǎn)物提取的研究。

O629.9，O629.1

B

1001-9677(2016)020-0108-03