張乾，郝詠芳，曹琛，呂曉民，魏國慶，黃金勇，盧偉，閆喜武

（營口市水產(chǎn)科學研究所，遼寧　營口　115004）

薄片鏡蛤苗種繁育技術研究

張乾，郝詠芳，曹琛，呂曉民，魏國慶，黃金勇，盧偉，閆喜武

（營口市水產(chǎn)科學研究所，遼寧營口115004）

薄片鏡蛤（Dosinia laminat）隸屬于軟體動物門，瓣鰓綱，簾蛤目，簾蛤科，薄片鏡蛤?qū)?，俗稱蛤叉，主要生活在潮間帶中、低潮區(qū)的泥沙底質(zhì)中，以浮游植物為食，食物鏈短，生態(tài)效率高，對生態(tài)環(huán)境的維持和改善有重要作用。薄片鏡蛤在國外從日本陸奧灣到九州、朝鮮半島、菲律賓、印度尼西亞，在中國北起遼寧，南至海南瓊山北港均有分布[1]，是一種名貴海產(chǎn)貝類，具有出肉率高、營養(yǎng)豐富、肉味鮮美、經(jīng)濟價值高等優(yōu)點。

近年來，海洋生物資源的超強度開發(fā)利用導致海洋生態(tài)失衡不斷加劇，薄片鏡蛤的野生資源量逐年減少。為了保護海洋生物的多樣性，維持海洋資源的可持續(xù)發(fā)展，恢復和發(fā)展這一珍貴海產(chǎn)經(jīng)濟貝類，開展薄片鏡蛤的人工繁育研究具有重要意義。關于薄片鏡蛤人工育苗的報道較少[2-3]，且均處于起步階段。遼寧省營口市水產(chǎn)科學研究所開展了遼寧省大連市莊河海域日本薄片鏡蛤的苗種繁育工作，以期為遼寧省日本薄片鏡蛤的苗種繁育及規(guī)?；斯び缣峁├碚撘罁?jù)。

1　材料及方法

1.1材料

1.1.1種貝來源該研究用2～3齡薄片鏡蛤作為親貝，于2014年5月采自大連市莊河近海，平均殼長7.2 cm，平均殼高7.1 cm。親貝采取干運法運輸，即將種貝放入打孔泡沫保溫箱（1 m×0.5 m×0.35 m）中快速運輸，運輸時間為2.5 h。

1.1.2育苗地點及設施試驗在營口市水產(chǎn)科學研究所貝類研發(fā)基地進行。種貝暫養(yǎng)和幼體培育池規(guī)格為10 m3，池內(nèi)設有排水充氣裝置，使用前以1∶10 HCl清洗消毒。室內(nèi)光照強度控制在2 000 lx以下。

1.1.3附著基選用天然海區(qū)細沙經(jīng)40目篩網(wǎng)初篩后，用沙濾海水充分清洗4～5遍。均勻撒在池底，厚度1.0～1.5 cm。

1.2苗種繁育技術及方法

1.2.1親貝選擇及培育大連市莊河海區(qū)薄片鏡蛤在6—7月性腺發(fā)育成熟度最高，其繁殖盛期集中在7、8月[4]。

6月下旬，選進種貝約30 kg，平均殼長及殼高7 cm，清洗干凈后裝于40 cm×80 cm×5 cm的塑料盤中，培育密度20～30個/m2，置于培育池中。親蛤運回后要及時放入室內(nèi)暫養(yǎng)，水溫與采捕水溫盡量一致。親蛤入池穩(wěn)定1 d后開始循環(huán)換水，日換水1次，換水量70%～100%。換水前及時剔除受傷種貝，清理池底污物，換水后適當投喂新鮮無污染的新月菱形藻和金藻。培育水溫20～22℃，定期鏡檢性腺發(fā)育情況，便于準確判斷產(chǎn)卵時間。在種貝培育過程中，餌料是育肥促熟的關鍵，餌料品種及投喂量根據(jù)攝食情況、水溫、水環(huán)境適當調(diào)整。

1.2.2水質(zhì)調(diào)控天然海水沉淀池初步沉淀，砂濾罐黑暗沉淀后無閥過濾，150目篩絹網(wǎng)二次過濾后注入培育池。鹽度22，pH值7.5～8.6。水質(zhì)新鮮、干凈無污物，符合我國漁業(yè)水質(zhì)標準。當培育池內(nèi)原生動物、細菌較多時，視實際情況向沉淀池內(nèi)投撒2～40 mg/L漂白粉，晴天曝曬1～5 d，檢測無余氯后投入EM菌或枯草芽孢桿菌。

1.2.3餌料培養(yǎng)餌料品種為金藻（Isochrysis zhanjiangensis）、角毛藻（Chaetoceros muelleri）、塔胞藻（Pyramimimonas.sp）、小球藻（Chlorella saccharophila），扁藻（Tetraselmis chui），藻種購自遼寧省海洋水產(chǎn)科學研究院。一級藻種在容積為5 L的三角燒瓶中靜止培養(yǎng)，二級培養(yǎng)在室外半封閉空間50 L白塑料桶內(nèi)進行（攪棍攪動），三級培養(yǎng)在10 m2連續(xù)充氣的水泥池內(nèi)，二級、三級餌料培養(yǎng)用水經(jīng)次氯酸鈉消毒，硫代硫酸鈉中和后使用。

1.2.4產(chǎn)卵親貝解剖后肉眼觀察，看性腺色澤是否鮮艷，如成熟的雌性應呈橘紅色，而雄性為乳白色，性腺包圍整個內(nèi)臟團，且飽滿。鏡檢種貝，精子遇海水活躍、卵子遇海水散開，則產(chǎn)卵期臨近。此時換水后或投餌料后會自然排放，應加強觀察親貝培育池。自然排放的卵子質(zhì)量好，孵化率和變態(tài)率高。該次研究親貝7月6日產(chǎn)卵，水溫27℃。產(chǎn)卵密度達8～12粒/mL時，取出沙盤放入另一培育池繼續(xù)產(chǎn)卵。產(chǎn)卵結束后將裝有親貝的沙盤取出。

1.2.5幼蟲選優(yōu)孵化密度約5～6粒/mL，孵化期間連續(xù)微量充氣，增加海水溶氧量，滿足幼蟲的耗氧的同時也使培育池的水處于流動狀態(tài)，使幼蟲分布均勻，防止幼蟲密度過大。為防止卵堆積于池底，孵化初期半小時要進行上下輕攪1次。

受精卵發(fā)育至D型幼蟲時，用300目篩絹網(wǎng)將幼蟲虹吸至提前備好新鮮海水的培育池充氣培育，投喂金藻（密度3 000 cell/mL）。選育完的幼蟲從第2天起虹吸分池并加水。

1.2.6幼蟲管理幼蟲培育密度1～2粒/mL。連續(xù)充氣，光照強度控制在800 lx以下，有利于幼體分布均勻和生長發(fā)育。投喂餌料3 h后鏡檢幼體的胃腸飽滿度。定期檢測培育池水質(zhì)，測量幼蟲的生長和發(fā)育情況，并做好記錄，發(fā)現(xiàn)問題及時處理。

餌料是幼蟲生長發(fā)育的物質(zhì)基礎，是幼蟲培育成敗的關鍵。在薄片鏡蛤幼蟲培育期間，前期金藻為主，小球藻為輔；幼蟲培育后期主要投喂扁藻，金藻為輔。每次投喂前要鏡檢幼體攝食情況和水中餌料量，及時調(diào)整投餌量與投餌次數(shù)。具體日常管理見表1。

表1　幼體培育期間的日常管理

1.2.7附著基的投放產(chǎn)卵10 d后，幼體殼長達到220～250 μm，培育池水中極少見到幼體，絕大部分幼體已下沉，吸底鏡檢發(fā)現(xiàn)變態(tài)基本完成。這時要投放附著基，然后進行大換水，加大餌料投喂量，以扁藻和塔胞藻為主，角毛藻和金藻為輔。

1.2.8稚貝的管理營口海區(qū)水質(zhì)較肥，天然餌料豐富，隨著薄片鏡蛤稚貝生長，引入室外沉淀池海水（經(jīng)150目篩絹網(wǎng)過濾），利用海水中天然餌料，減輕室內(nèi)單胞藻培養(yǎng)的壓力，保證稚貝營養(yǎng)均衡。視具體情況輔助投餌。

1.2.9出苗9月2日，稚貝出池，平均殼長0.4 cm，出苗量1 200萬枚。

1.2.9數(shù)據(jù)的處理與計算對數(shù)據(jù)的處理與計算主要采用Excel圖表軟件。

2　結果

2.1產(chǎn)卵量、卵徑、孵化率及D形幼蟲大小

薄片鏡蛤雌雄異體，雌性性腺呈淡橘紅色，雄性性腺呈乳白色。殼長7.2 cm的薄片鏡蛤雌性個體每次產(chǎn)卵量可達300萬粒。卵屬沉性卵，卵徑68～70 μm。該試驗共產(chǎn)卵3 000萬枚，D型幼體孵化率90%，D形幼蟲大?。らL×殼高）為100 μm×80 μm。

薄片鏡蛤幼體在殼長210 μm左右時開始變態(tài)，此時可投放附著基。該試驗薄片鏡蛤幼體變態(tài)率達到83.3%。

2.2幼體的生長發(fā)育

水溫27～28℃時，薄片鏡蛤受精卵經(jīng)15～18 h可發(fā)育至D型幼蟲。幼體的發(fā)育過程見表2。

表2　幼體的發(fā)育過程表

由表1可知，薄片鏡蛤在溫度27～28℃時幼體發(fā)育較快，D型幼體經(jīng)28 d殼長可達1.0～1.2 mm，這與王成東等[5]的薄片鏡蛤幼蟲生長的適宜溫度為22～30℃、最適生長溫度為26℃差別不大。

2.3出苗

9月2日出苗，出池平均殼長0.4 cm的稚貝1 200萬枚，單位面積出苗量40萬枚/m2，養(yǎng)殖成活率較低。主要原因為：幼體生長后期也就是8月份，水溫較高，進入玻璃海鞘繁殖的高峰期，其附著于池底及池壁，稚貝被吸附現(xiàn)象較嚴重，成活率下降。

出池的幼貝人工均勻播撒于室外泥沙底的海水池塘中（池塘事先潑灑清塘藥物消毒，幼貝投放前對池塘水質(zhì)指標進行測定，確定符合漁業(yè)水質(zhì)標準）。

3　小結

3.1親貝選擇及暫養(yǎng)

親貝最好選擇生活在水深5 m以上，餌料豐富海區(qū)的野生薄片鏡蛤，殼長和殼高5～7 cm、2～3齡、個體肥大健壯，殼形規(guī)整、無損傷的個體作為繁殖群體。如有條件，最好異地多選幾個地方的薄片鏡蛤作為種貝。親貝性腺是否成熟，是人工育苗能否成功的首要條件。只有獲得充分成熟的卵子和精子，才能保證人工育苗的順利進行，在生產(chǎn)成本允許的情況下，也可提前選進親貝進行室內(nèi)培育，投喂新鮮的單胞藻，進行營養(yǎng)強化以提高其產(chǎn)卵率。

本研究采用沙盤暫養(yǎng)親貝，接近薄片鏡蛤生長的自然條件，解決了親貝培育的成活率低的問題，產(chǎn)卵率高，卵的質(zhì)量也較好，同時也有利于分池以控制孵化密度。

3.2餌料

餌料種類、搭配比例及餌料質(zhì)量是影響育苗效果的重要因素，多種餌料混合投喂效果好于單一餌料投喂[6-8]。控制好餌料投喂量不僅不必倒池，還能抑制原生動物的繁殖，使水質(zhì)清新，餌料利用率高。由于薄片鏡蛤繁殖盛期為7月，溫度較高，水質(zhì)變化快，敵害生物較多，單胞藻的培養(yǎng)較困難。本研究中，餌料主要為小球藻、扁藻和金藻，D型幼體的開口餌料為金藻，效果較好。前期金藻搭配小球藻投喂，幼體殼長160 μm以上時開始投喂扁藻，后期引入室外天然海水補充餌料，整個生長過程餌料不足，營養(yǎng)搭配一般，故幼體生長速度較慢?？山梃b閆喜武等[3]建議的培養(yǎng)耐高溫且貝類適口、營養(yǎng)價值高的單胞藻，提高餌料培育技術；或適當提高生產(chǎn)成本，提前選進親貝進行人工促熟，以提早繁育時間，避開高溫季節(jié)。

3.3附著基的投放

當薄片鏡蛤幼體在26～29℃的培育條件下，經(jīng)9～12 d，殼長達到210 μm以上、有60%以上幼體出現(xiàn)下沉、開始形成足時即可投放，也可以吸底鏡檢看池底是否出現(xiàn)爬行的匍匐幼體為標準。附著基投放太晚，幼體體表尤其是水管表面易掛臟，影響運動及攝食。附著基種類也是影響灘涂貝類幼蟲變態(tài)和稚貝生長的重要因素[9-11]。該試驗證明，薄片鏡蛤附著基最好是經(jīng)40目篩子篩過的天然海區(qū)海砂，經(jīng)過自然海水清洗后投放，幼蟲能夠順利附著變態(tài)、生長，這與閆喜武等[3]海泥的采苗效果好于其他附著基、王海濤等[2]薄片鏡蛤的附著基以灘泥附著效果最好的說法略有差異?？赡芘c附著基的選擇及處理方式不同有關，在今后的生產(chǎn)過程中，對此可以進一步進行研究。

3.4幼貝個體大小差異大

幼貝培育后期個體大小差異較大，生長速度較慢。原因可能為：換水不及時，換水量不夠，隨著稚貝生長初期培育密度較高，導致稚貝生長所需餌料供應不足；幼貝培養(yǎng)后期尤其是8月份，池底及池壁附著生長了大量玻璃海鞘，其表面黏附了大量稚貝，嚴重限制了稚貝的運動及攝食，導致其生長變慢且個體差異較大。因此，在今后的薄片鏡蛤育苗生產(chǎn)中，為避免分池移池對其損傷可在出池規(guī)格一定的前提下提前計劃好初期培育密度及初期附著密度，及時換水投餌，在玻璃海鞘大量生長之前出池或是產(chǎn)生玻璃海鞘之時倒池清理，保證稚貝健康生長。

[1]莊啟謙．中國動物志軟體動物門[M]．北京:科學出版社，2001：153－157．

[2]王海濤，王世黨，鄭春波，等.薄片鏡蛤室內(nèi)人工育苗技術研究[J].齊魯漁業(yè)，2009，26（7）：22-24.

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10.3969/j.issn.1004-2091.2016.11.001

大連市科學技術基金資助項目（2013J21DW010）；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項（CARS-48）

郝詠芳（1985-），女，工程師，研究方向：海水貝類、甲殼類人工育苗、生物餌料培養(yǎng).E-mail：690938298@qq.com

（2016-05-23）