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土大黃根提取物對(duì)小鼠非特異性免疫功能的影響*

2016-12-29 03:35尤力都孜買買提阿布都吉力力阿布都艾尼熱比姑麗伊斯拉木
中國(guó)藥業(yè) 2016年10期
關(guān)鍵詞:提取物體重小鼠

尤力都孜·買買提,阿布都吉力力·阿布都艾尼,熱比姑麗·伊斯拉木

(1.新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所,新疆 烏魯木齊 830049; 2.新疆維吾爾醫(yī)方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)室,新疆 烏魯木齊 830049)

土大黃根提取物對(duì)小鼠非特異性免疫功能的影響*

尤力都孜·買買提1,2,阿布都吉力力·阿布都艾尼1,2,熱比姑麗·伊斯拉木1,2

(1.新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所,新疆 烏魯木齊 830049; 2.新疆維吾爾醫(yī)方劑學(xué)實(shí)驗(yàn)室,新疆 烏魯木齊 830049)

目的 探討土大黃根提取物對(duì)正常小鼠非特異性免疫功能的影響。方法 采用小鼠體內(nèi)吞噬廓清能力測(cè)定試驗(yàn)(惰性炭粒吞噬廓清法),觀測(cè)土大黃根提取物(1,2,4 g/kg)灌胃給藥后,小鼠的一般狀況、體重、脾臟及胸腺指數(shù)、廓清指數(shù)。結(jié)果 土大黃提取物(1,2,4 g/kg)在試驗(yàn)期間小鼠的一般狀況、體重、脾臟及胸腺指數(shù)變化無(wú)明顯異常(P>0.05);各給藥組雖能升高正常小鼠廓清指數(shù),但其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 土大黃根提取物對(duì)正常小鼠非特異性免疫功能(單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能)有一定影響。

土大黃根提取物;小鼠;非特異性免疫

土大黃 RumexL.是蓼科 Polyonaceae酸模屬 Rumex多年生草本植物,維吾爾藥物名有阿提庫(kù)拉克(Atkulak)、歐麻孜(Hummaz)、土日謝(Turux)、塔給庫(kù)斯(Tagkusi),其藥用部位為全草、葉子、根莖及根,用于腎、肝及胃腸疾患,并用于皮疹及皮膚瘙癢等[1-2]。本研究中通過(guò)小鼠體內(nèi)吞噬廓清能力測(cè)定試驗(yàn),探討了土大黃根提取物對(duì)正常小鼠非特異性免疫功能的影響。

1 材料與方法

1.1 儀器、動(dòng)物與試藥

儀器:CPA1245型精密電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);UV-7504C型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海精科實(shí)業(yè)有限公司)。

動(dòng)物:昆明種小鼠80只,雄性,體重18~22 g,由新疆實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供,試驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(新)2011-0001,試驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)SYXK(新)2011-0005。試驗(yàn)開(kāi)始前檢疫,經(jīng)一般行為觀察,選用符合要求的70只小鼠進(jìn)行試驗(yàn)。

試藥:土大黃根(新疆華安中藥飲片有限責(zé)任公司,批號(hào)為12110),由新疆大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院努爾巴依·阿不都沙力克教授鑒定為土大黃根;醋酸地塞米松片(DXM,浙江仙琚制藥股份有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H33020822,批號(hào)為 140670,規(guī)格為每片 0.75 mg);消銀顆粒(XYKL,陜西康惠制藥股份有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字Z20000019,批號(hào)為130809,規(guī)格為每袋3.5 g);異常黏液質(zhì)成熟劑[木尼孜其白里海密,維吾爾語(yǔ)命名為Munziq Balgam(MB),批準(zhǔn)文號(hào)為M20052633],由新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)醫(yī)院制劑室(GMP認(rèn)證)提供。印度墨汁(Cat.NO.18060);碳酸鈉(Na2CO3,天津永晟精細(xì)化工有限公司,批號(hào)為20111020)。

1.2 試驗(yàn)方法

土大黃根提取物的制備:土大黃根用乙醇室溫密閉浸泡 1 h后回流提取3次,過(guò)濾,合并濾液減壓濃縮,真空干燥,得干膏粉,試驗(yàn)時(shí)配成所需濃度。

體內(nèi)吞噬廓清能力測(cè)定[3]:將70只小鼠隨機(jī)分為7組,分別為空白對(duì)照組(CON組),地塞米松組(DXM組),消銀顆粒組(XYKL組),異常黏液質(zhì)成熟劑組(MB組),土大黃根醇提物低劑量組(RE-L組)、中劑量組(RE-M組)、高劑量組(RE-H組),每組10只。給予相應(yīng)藥物每10 g體重0.2 mL灌胃,每日1次,共10 d。末次給藥后1 h,于小鼠尾靜脈注入稀釋的印度墨汁每10 g體重0.1 mL。于注入墨汁后2 min(T2)及10 min(T10)用特制取血吸管從小鼠眼眶后靜脈叢取血20 μL,立刻吹入0.1%Na2CO3液2 mL中,吸管于該液中吸入、吸出數(shù)次,以充分洗出吸管壁附著血液,取血完畢,以20 μL正常小鼠血溶于2 mL 0.1%Na2CO3液校零,于UV-7504C型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)675 nm波長(zhǎng)處比色,計(jì)算廓清指數(shù)(K)。K=(lg OD2-lg OD10)/(T10-T2),其中 OD2為T2時(shí) OD值,OD10為T10時(shí) OD值。

小鼠臟器指數(shù)測(cè)定:取小鼠脾臟、胸腺觀察并稱重,計(jì)算臟器指數(shù)。臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量/體重。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用 SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料用 X±s表示,采用One-Way ANOWA方法行多組樣本均數(shù)比較,檢驗(yàn)水準(zhǔn) α=0.05。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 小鼠一般狀況及體重變化

與CON組比較,陽(yáng)性對(duì)照藥物組(DXM組、XYKL組、MB組)、土大黃根醇提物組(RE-L組、RE-M組、RE-H組)小鼠在試驗(yàn)期間,行為活動(dòng)、皮毛、糞便、飲食等均未見(jiàn)異常。與 CON組比較,DXM組、XYKL組小鼠體重減輕(P<0.05),其余各組小鼠體重差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。詳見(jiàn)表1。

表1 各組小鼠體重變化比較(X±s,g,n=10)

2.2 小鼠臟器指數(shù)和廓清指數(shù)變化

與CON組比較,DXM組正常小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)均顯著降低(P<0.01),其余組對(duì)正常小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)無(wú)明顯影響(P>0.05)。與CON組比較,各給藥組雖能升高正常小鼠廓清指數(shù),但其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 小鼠臟器指數(shù)及廓清指數(shù)變化(X±s,n=10)

3 討論

機(jī)體免疫系統(tǒng)除T及B淋巴細(xì)胞外,還有自然殺傷細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞等,是同樣具有免疫功能的細(xì)胞,這些細(xì)胞活性的測(cè)定對(duì)于研究中藥對(duì)機(jī)體免疫功能的影響具有重要意義[4]。

小鼠體內(nèi)吞噬廓清能力測(cè)定試驗(yàn)[5-6]是從整體水平測(cè)定單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)(RES)的吞噬功能,常用方法有惰性炭粒廓清試驗(yàn)。當(dāng)顆粒異物進(jìn)入體內(nèi)血液循環(huán)時(shí),可迅速被單核-巨噬細(xì)胞吞噬而清除,其主要作用部位為肝、脾,故測(cè)定血中異物的清除能力可反映機(jī)體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng))的吞噬功能狀況,以觀察藥物對(duì)該系統(tǒng)吞噬能力的影響。

本研究中通過(guò)小鼠體內(nèi)吞噬廓清能力測(cè)定試驗(yàn),探討土大黃根提取物對(duì)正常小鼠非特異性免疫功能的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,小鼠灌胃給藥10 d后,與空白對(duì)照組比較,各給藥組小鼠在試驗(yàn)期間,行為活動(dòng)、皮毛、糞便、飲食等未見(jiàn)異常;地塞米松組、消銀顆粒組小鼠體重減輕(P<0.05);地塞米松組小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)降低(P<0.01);地塞米松組(1.02 mg/kg)、消銀顆粒組(1.577 g/kg)、異常黏液質(zhì)成熟劑組(2 g/kg)、土大黃根醇提物組(低、中、高劑量組,1,2,4 g/kg),雖能升高正常小鼠廓清指數(shù)(惰性炭粒吞噬廓清法),但其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),提示土大黃根醇提物能對(duì)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能有一定影響,有待深入研究。

[1]阿不力克木·努爾買買提阿吉,穆塔力甫·艾力阿吉·艾米奇.維吾爾醫(yī)常用草藥(維文)[M].烏魯木齊:新疆人民衛(wèi)生出版社,2006:335-336.

[2]吐?tīng)柡椤の豳I爾.維吾爾醫(yī)生藥學(xué)(維文,上冊(cè))[M].烏魯木齊:新疆人民衛(wèi)生出版社,2006:362-363.

[3]張 帥,王紅梅,常秀娟,等.熱毒寧注射液抗菌及調(diào)節(jié)免疫活性作用研究[J].世界科學(xué)技術(shù)——中醫(yī)藥現(xiàn)代化技術(shù)應(yīng)用研究,2015,17(5):1 056-1 060.

[4]郭金英,杜 潔,李彤輝,等.發(fā)狀念珠藻胞外多糖對(duì)小鼠免疫活性的影響[J].河南科技大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2015,36(1):72-75.

[5]陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2006:308-309,346-347.

[6]魏 偉,吳希美,李元建.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:1 299-1 300.

Effects of Rumex L.Root Extract on Non-Specific Immune Function of Mice

Yultuz Mamat1,2,Abdujilil Abdugheny1,2,Rabigul Islam1,2
(1.Inistitute of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049; 2.Xinjiang Laboratory of Traditional Uyghur Medicine Prescription,Wulumuqi,Xinjiang,China 830049)

Objective To explore the effect of Rumex L.root extract on non-specific immune function of mice.M ethods Carbon clearance test was used in mice(inert carbon granule clearance method)to observe the effect of Rumex L.extract administration(1,2,4 g/kg)on mice in the general status,body weight,spleen and thymus index and then clearance index.Results There were no obvious abnormality in mice of Rumex L.root extract(1,2,4 g/kg)in the general status,body weight,spleen and thymus index(P>0.05);though the clearance index was increased in normal mice,there was no significant changes(P>0.05).Conclusion Rumex L.root extract has a certain influence on non-specific immune function(phagocytosis of mononuclear scavenger system)of mice.

Rumex L.root;mice;non-specific immunity

R285.5;R282.71

A

1006-4931(2016)10-0018-03

尤力都孜·買買提,女,大學(xué)本科,助理研究員,研究方向?yàn)榫S藥藥理毒理學(xué),(電子信箱)1453187693@qq.com;熱比姑麗·伊斯拉木,女,博士研究生,副研究員,研究方向?yàn)榫S藥藥理毒理學(xué),本文通訊作者,(電子信箱)rabiya272@126.com。

2015-12-10)

*2015年新疆維吾爾自治區(qū)公益性基金項(xiàng)目,項(xiàng)目編號(hào):KY2015139,KY2015138。

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