吳先輝

.實(shí)驗(yàn)研究.

不同直徑樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根提取物抗炎及鎮(zhèn)痛作用對(duì)比分析

吳先輝

目的探討比較不同直徑樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根提取物的抗炎及鎮(zhèn)痛作用.方法選取昆明(KM)小鼠進(jìn)行觀察研究, 分別通過(guò)小鼠毛細(xì)血管通透性抗炎實(shí)驗(yàn)、小鼠熱板鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)、小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)觀察不同直徑樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根提取物的對(duì)小鼠的抗炎作用和鎮(zhèn)痛作用, 并進(jìn)行對(duì)比分析.結(jié)果實(shí)驗(yàn)后, 樟樹(shù)根組小鼠光密度(OD)值為(0.090±0.034)、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組為(0.102±0.029)、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組為(0.088±0.026)、復(fù)方乙酰水楊酸片組為(0.089±0.033), 均明顯低于對(duì)照組的(0.143±0.042),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);樟樹(shù)莖枝Ⅰ組小鼠OD值為(0.132±0.028), 低于對(duì)照組的(0.143±0.042),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).樟樹(shù)根組、樟樹(shù)莖枝Ⅰ組、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組、復(fù)方乙酰水楊酸片組小鼠的扭體次數(shù)明顯少于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).結(jié)論同等劑量的樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根提取物在抗炎、鎮(zhèn)痛等方面的作用有較大相似性, 且直徑越大的樟樹(shù)莖枝抗炎、鎮(zhèn)痛作用效果可能還強(qiáng)于樟樹(shù)根.

樟樹(shù)莖枝提取物;樟樹(shù)根提取物;直徑;抗炎;鎮(zhèn)痛

樟樹(shù)為樟科常綠大喬木, 別名木樟、烏樟等, 是我國(guó)珍貴用材和經(jīng)濟(jì)樹(shù)種[1].腸炎寧糖漿是目前臨床治療大腸濕熱的主要藥物, 而樟樹(shù)樹(shù)根作為其主要成分, 為避免樟樹(shù)樹(shù)根資源匱乏導(dǎo)致腸炎寧糖漿治療藥效發(fā)生變化, 本研究通過(guò)對(duì)比分析樟樹(shù)根與樟樹(shù)莖枝在抗炎、止瀉、鎮(zhèn)痛等方面的藥效,旨在為樟樹(shù)莖枝代替樟樹(shù)根作為腸炎寧糖漿的主要成分的開(kāi)發(fā)研究提供參考依據(jù), 具體報(bào)告如下.

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取小鼠均由常州卡文斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供, 型號(hào)為KM小鼠, 品牌為CAVENS, 大小均在18～22 g,雌雄兼用.

1.2 藥物 樟樹(shù)根及直徑1～2 cm、2～3 cm、>3 cm的樟樹(shù)莖枝提取物(西安天瑞生物技術(shù)有限公司);復(fù)方乙酰水楊酸片(山西天源制藥有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字H4024066);羅通定片(赤峰蒙欣藥業(yè)有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字H15020512).臨用前復(fù)方乙酰水楊酸片、羅通定片均用蒸餾水分別制成濃度為10 mg/ml、1.7 mg/ml的溶液.

1.3 試劑 醋酸(湖南爾康制藥股份有限公司, 國(guó)藥準(zhǔn)字H43020194);伊文思藍(lán)(品牌:Spectrum, 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司).

1.4 儀器 紫外分光光度儀(廣州科曉科學(xué)儀器有限公司,型號(hào):UV-6100).

1.5 方法

1.5 . 1 小鼠毛細(xì)血管通透性抗炎實(shí)驗(yàn) 選取72只健康KM小鼠, 將其按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、樟樹(shù)根組、樟樹(shù)莖枝Ⅰ組(直徑1～2 cm)、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組(直徑2～3 cm)、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組(直徑>3 cm)、復(fù)方乙酰水楊酸片組, 每組12只.前5組(除對(duì)照組)小鼠給藥劑量為3.96 g生藥/kg, 復(fù)方乙酰水楊酸片組給藥劑量為0.2 g/kg.所選小鼠均連續(xù)灌胃給藥4 d, 給藥容量為0.2 ml/10 g, 末次給藥前所選小鼠均需禁食不禁水16 h, 給藥1 h后, 所選小鼠均于尾部靜脈注射0.5%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1 ml/10 g, 同時(shí)腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml, 于20 min后均脫頸椎處死所選小鼠, 打開(kāi)小鼠腹腔,用5 ml 0.9%NaCl溶液分2次洗滌腹腔, 將洗滌液吸出, 以3 000 r/min離心速度離心15 min, 離心后取上清液于試管內(nèi),將其置入分光光度計(jì)590 nm處測(cè)定OD值.

1.5 . 2 小鼠醋酸鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn) 取72只健康KM小鼠, 將其按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、樟樹(shù)根組、樟樹(shù)莖枝Ⅰ組、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組、復(fù)方乙酰水楊酸片組, 每組12只.前5組(除對(duì)照組)小鼠給藥劑量為3.96 g生藥/kg, 復(fù)方乙酰水楊酸片組給藥劑量為0.2 g/kg.所選小鼠均連續(xù)灌胃給藥4 d, 給藥容量為0.2 ml/10 g, 末次給藥前所選小鼠均需禁食不禁水16 h, 給藥1 h后, 所選小鼠均腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml, 觀察20 min內(nèi)小鼠扭體次數(shù).

1.5 . 3 小鼠熱辦法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn) 首先篩選合格小鼠, 具體措施如下:每次將1只小鼠放在熱板上, 若小鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)舔后足時(shí)間<9 s或>24 s或跳躍者視為不合格者, 將選取合格小鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、樟樹(shù)根組、樟樹(shù)莖枝Ⅰ組、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組、羅通定片組, 前5組(除對(duì)照組)小鼠給藥劑量為3.96 g生藥/kg, 羅通定片組給藥劑量為54 mg/kg.所選小鼠給藥前均測(cè)定其正常痛閾值作為給藥前痛閾值, 連續(xù)灌胃給藥3 d, 給藥容量0.2 ml /10 g, 末次給藥前所選小鼠均需禁食不禁水12 h, 分別測(cè)量給藥后0.5、1.0、1.5 h時(shí)的痛閾值.如60 s仍無(wú)反應(yīng), 將小鼠取出, 其痛閾值以60 s計(jì)算.

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.計(jì)量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差表示, 采用t檢驗(yàn).P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 小鼠毛細(xì)血管通透性抗炎實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較 實(shí)驗(yàn)后, 樟樹(shù)根組小鼠OD值為(0.090±0.034)、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組為(0.102±0.029)、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組為(0.088±0.026)、復(fù)方乙酰水楊酸片組為(0.089±0.033), 均明顯低于對(duì)照組的(0.143±0.042),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);樟樹(shù)莖枝Ⅰ組小鼠OD值為(0.132±0.028), 低于對(duì)照組的(0.143±0.042), 但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).

2.2 小鼠醋酸鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較 實(shí)驗(yàn)后, 樟樹(shù)根組小鼠扭體次數(shù)為(5.54±4.21)次、樟樹(shù)莖枝Ⅰ組為(9.64±6.34)次、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組為(6.77±5.26)次、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組為(6.48±5.06)次、復(fù)方乙酰水楊酸片組為(6.48±5.06)次, 均明少于對(duì)照組的(17.96±10.53)次, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).

3 討論

腸炎寧糖漿是純中藥制劑, 其中樟樹(shù)根是腸炎寧糖漿中的主要成分之一, 為樟樹(shù)科植物紅葉木姜子的根, 有著祛風(fēng)散寒、理氣活氣、止痛止癢、強(qiáng)心鎮(zhèn)痙等功效, 主治風(fēng)濕骨痛、跌打損傷、感冒頭痛等[2].紅葉木姜子屬多年生落葉喬木,其生長(zhǎng)年限較長(zhǎng), 生長(zhǎng)速度緩慢.而樟樹(shù)分布廣泛, 樟樹(shù)莖枝藥用資源豐富, 隨著近年來(lái)對(duì)其研究的深入, 其藥用價(jià)值日益被人們所重視.據(jù)相關(guān)報(bào)道稱, 樟樹(shù)根與樟樹(shù)莖枝均具有祛風(fēng)、行氣血、除風(fēng)濕、得關(guān)節(jié)的功效, 臨床主要用于治療心腹脹痛、痛風(fēng)、跌打損傷、霍亂嘔吐等, 同時(shí)樟樹(shù)樹(shù)根與楓樹(shù)葉合劑治療痢疾腸炎有較好療效[3].

本次研究結(jié)果顯示, 樟樹(shù)根組小鼠光密度(OD)值為(0.090±0.034)、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組為(0.102±0.029)、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組為(0.088±0.026)、復(fù)方乙酰水楊酸片組為(0.089±0.033),均明顯低于對(duì)照組的(0.143±0.042), 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);樟樹(shù)莖枝Ⅰ組小鼠OD值為(0.132±0.028), 低于對(duì)照組的(0.143±0.042), 但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).說(shuō)明樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根均能明顯降低伊文思藍(lán)的滲出量.樟樹(shù)根組、樟樹(shù)莖枝Ⅰ組、樟樹(shù)莖枝Ⅱ組、樟樹(shù)莖枝Ⅲ組、復(fù)方乙酰水楊酸片組小鼠的扭體次數(shù)明顯少于對(duì)照組, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05).說(shuō)明樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根均有一定的外周鎮(zhèn)痛作用.提示樟樹(shù)根和直徑為2～3 cm和>3 cm的樟樹(shù)莖枝均能減少炎癥滲出量, 達(dá)到抗炎效果, 同時(shí)發(fā)現(xiàn)不同直徑的樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根均能減少醋酸疼痛引起的小鼠扭體次數(shù), 有較好的外周性鎮(zhèn)痛作用.

綜上所述, 同等劑量的樟樹(shù)莖枝與樟樹(shù)根在抗炎、鎮(zhèn)痛等方面的作用有較大相似性, 而且直徑越大的樟樹(shù)莖枝抗炎、鎮(zhèn)痛作用效果可能還強(qiáng)于樟樹(shù)根, 但在其他藥理作用方面的研究還需進(jìn)一步探討.

[1] 龔琴, 陳蘭英, 羅穎穎, 等. 不同直徑的樟樹(shù)莖枝和樟樹(shù)根提取物主要藥效學(xué)比較研究. 江西中醫(yī)藥, 2012, 43(6):55-57.

[2] 彭穎, 歐陽(yáng)婷, 顏紅, 等. 樟樹(shù)揮發(fā)油的提取及包合物制備與鑒定研究. 中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志, 2014, 26(6):86-88.

[3] 周富強(qiáng), 田素英, 潘建龍, 等. 樟樹(shù)莖與沉香醇提物藥理作用對(duì)比研究. 中醫(yī)學(xué)報(bào), 2013, 28(12):1849-1850.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.22.116

鷹潭市科技局科技計(jì)劃項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):鷹科鑒字[2012]第6號(hào))

335000 鷹潭市疾病預(yù)防控制中心

2017-10-11]