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川藏公路拉薩-林芝沿線藏豬沙門氏菌的流行病學(xué)與敏感藥物篩選

2017-02-02 03:05晉美多吉馬金英拉巴次仁
養(yǎng)豬 2017年5期
關(guān)鍵詞:林芝沙門氏菌瓊脂

晉美多吉,馬金英,拉巴次仁

(1.西藏自治區(qū)拉薩市達(dá)孜縣農(nóng)牧局,西藏 拉薩 850100;2.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,拉薩 850009;3.西藏自治區(qū)畜牧總站,拉薩 850000)

川藏公路拉薩-林芝沿線藏豬沙門氏菌的流行病學(xué)與敏感藥物篩選

晉美多吉1,馬金英2,拉巴次仁3

(1.西藏自治區(qū)拉薩市達(dá)孜縣農(nóng)牧局,西藏 拉薩 850100;2.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,拉薩 850009;3.西藏自治區(qū)畜牧總站,拉薩 850000)

為了解拉薩-林芝公路沿線藏豬沙門氏菌的流行情況,通過(guò)常規(guī)的直腸棉拭子分離培養(yǎng)對(duì)沿線12個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的1 200份藏豬直腸棉拭子進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)拉薩-林芝公路沿線12個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)存在沙門氏菌感染的情況,經(jīng)細(xì)菌分離培養(yǎng)和生化鑒定,從62份直腸棉拭子分離出沙門氏菌,藏豬沙門氏菌病呈零星分布。采用藥敏紙片擴(kuò)散法對(duì)62株藏豬沙門氏菌進(jìn)行了敏感藥物篩選發(fā)現(xiàn),拉薩-林芝公路沿線12個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的藏豬沙門氏菌對(duì)卡那霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、先鋒霉素和慶大霉素5種藥高度敏感,對(duì)諾氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感,對(duì)青霉素耐藥。

藏豬沙門氏菌;分離鑒定;敏感藥物;拉薩-林芝公路沿線

沙門氏菌為腸桿菌科沙門氏菌屬成員,是一類條件性細(xì)胞內(nèi)寄生的革蘭氏陰性腸桿菌,血清型眾多,能致多種動(dòng)物患沙門氏菌病,該菌是自然界分布極為廣泛的病原菌,幾乎可以從所有脊椎動(dòng)物乃至昆蟲體內(nèi)分離得到[1-2]。鑒于川藏公路沿線的旅游人士較多和拉薩-林芝公路沿線是藏豬養(yǎng)殖較為密集區(qū),了解拉薩-林芝公路沿線藏豬沙門氏菌的感染情況與敏感藥物篩選,在獸醫(yī)及人醫(yī)領(lǐng)域均有重要的公共衛(wèi)生意義[1]。筆者于2016年8月對(duì)拉薩-林芝公路沿線12個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)采集藏豬直腸棉拭子共計(jì)1 200份,分離出了豬沙門氏菌,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步做了菌株分離及敏感藥物篩選,結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)菌株 拉薩-林芝公路沿線蔡公堂鄉(xiāng)、章多鄉(xiāng)、甲瑪鄉(xiāng)、工卡鎮(zhèn)、扎西崗鄉(xiāng)、日多鄉(xiāng)、加興鄉(xiāng)、金達(dá)鎮(zhèn)、巴河鎮(zhèn)、百巴鎮(zhèn)、更章門巴民族鄉(xiāng)、八一鎮(zhèn)為采樣點(diǎn),采集被檢藏豬直腸棉拭子1 200頭份,保存于1 mL營(yíng)養(yǎng)肉湯的滅菌醫(yī)用配離心管,車載冰箱4℃保存。標(biāo)明樣品采集時(shí)間、地點(diǎn)、編號(hào)。

采樣原則:每個(gè)采樣點(diǎn)分別采集1歲以上藏豬直腸棉拭子40頭份、斷奶仔藏豬60頭份。

1.1.2 標(biāo)準(zhǔn)菌株 沙門氏菌[CMCC(B)50094] 標(biāo)準(zhǔn)菌株購(gòu)于杭州百思生物技術(shù)有限公司。

1.1.3 細(xì)菌培養(yǎng)基及配制 菌志賀氏增菌肉湯購(gòu)于廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。稱取營(yíng)養(yǎng)肉湯31.5 g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15 min,待冷至常溫,備用。

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基購(gòu)于廣東環(huán)凱微生物科技有限公司。稱取麥康凱瓊脂粉末55 g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15 min。待培養(yǎng)基冷至50~55℃傾注滅菌平皿,待凝固后,備用。

SS瓊脂培養(yǎng)基平板、水解酪蛋白瓊脂(MH瓊脂)培養(yǎng)基平板和三糖鐵瓊脂培養(yǎng)管均購(gòu)于杭州百思生物技術(shù)有限公司。

LB營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板購(gòu)于上海凡儀科技發(fā)展有限公司。

1.1.4 沙門氏菌API-20E生化鑒定試紙條 生化反應(yīng)鑒定試紙條API-20E購(gòu)于法國(guó)梅里埃生物技術(shù)有限公司,用于腸桿菌屬細(xì)菌的快速生化鑒定。

1.2 方法

1.2.1 沙門氏菌的分離和初步鑒定 細(xì)菌分離采用國(guó)標(biāo)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)方法(GB 4789.4—1994)[3]。藏豬直腸棉拭子接種于選擇性菌志賀氏增菌肉湯培養(yǎng)基中37℃于搖床上振搖過(guò)夜。取一接種環(huán)細(xì)菌富集樣本接種于麥康凱瓊脂37℃培養(yǎng)12 h。將無(wú)色透明或中間有黑色圓點(diǎn)的單菌落接種瓊脂,取典型菌落接種于三糖鐵(TSI)試管,37℃培養(yǎng)12 h,并進(jìn)一步做生化鑒定、血清型鑒定及抗生素敏感性分析。

1.2.2 沙門氏菌的生化鑒定 取疑似沙門氏菌典型菌落接種生化鑒定管37℃培養(yǎng)18~24 h。根據(jù)參考文獻(xiàn)[3]食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)有關(guān)沙門氏菌檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果判斷。

1.2.3 沙門氏菌API-20E試紙條的生化鑒定 將少量疑似沙門氏菌典型菌接種于API-20E試驗(yàn)條,培養(yǎng)20 h左右,加入相應(yīng)顯色試劑后觀察其顏色的變化,根據(jù)說(shuō)明表判讀反應(yīng),參照分析圖索引和APLAB PLus軟件得到鑒定結(jié)果。

1.3 敏感藥物篩選試驗(yàn)

青霉素、慶大霉素、諾氟沙星、左氟沙星、阿莫西林、卡那霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、先鋒霉素9種藥,按照常規(guī)藥敏紙片擴(kuò)散法于MH瓊脂培養(yǎng)基平板上操作,并根據(jù)抑菌圈直徑(Ф)判定藥物敏感性,Ф≥20 mm為高度敏感,15 mm≤Ф<20 mm為中度敏感,Ф<15 mm為耐藥。

2 結(jié)果

2.1 分離菌株鑒定結(jié)果

從拉薩-林芝公路沿線蔡公堂鄉(xiāng)、章多鄉(xiāng)、甲瑪鄉(xiāng)、工卡鎮(zhèn)、扎西崗鄉(xiāng)、日多鄉(xiāng)、加興鄉(xiāng)、金達(dá)鎮(zhèn)、巴河鎮(zhèn)、百巴鎮(zhèn)、更章門巴民族鄉(xiāng)、八一鎮(zhèn)采集的藏豬直腸棉拭子1 200頭份的樣品中,共分離鑒定出62株沙門氏菌菌株。

2.2 敏感藥物篩選試驗(yàn)

對(duì)分離出的62株沙門氏菌菌株敏感藥物篩選試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),從拉薩-林芝公路沿線蔡公堂鄉(xiāng)、章多鄉(xiāng)、甲瑪鄉(xiāng)、工卡鎮(zhèn)、扎西崗鄉(xiāng)、日多鄉(xiāng)、加興鄉(xiāng)、金達(dá)鎮(zhèn)、巴河鎮(zhèn)、百巴鎮(zhèn)、更章門巴民族鄉(xiāng)、八一鎮(zhèn)不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)分離獲得的藏豬沙門氏菌致病菌株對(duì)卡那霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、先鋒霉素和慶大霉素5種藥高度敏感,對(duì)諾氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感,對(duì)青霉素耐藥。

3 討論

沙門氏菌生化反應(yīng)繁雜,血清型眾多,用常規(guī)的檢驗(yàn)程序復(fù)雜,且不容易給出正確的結(jié)果。鑒于科研條件有限,本研究未做血清型鑒定,只是在篩選鑒定出沙門氏菌的基礎(chǔ)上針對(duì)青霉素、慶大霉素、諾氟沙星、左氟沙星、阿莫西林、卡那霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、先鋒霉素9種藥做了敏感藥物篩選試驗(yàn)。

從拉薩-林芝公路沿線12個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)藏豬養(yǎng)殖較為密集區(qū)分離出的62株沙門氏菌對(duì)卡那霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、先鋒霉素和慶大霉素5種藥高度敏感,對(duì)諾氟沙星、左氟沙星、阿莫西林中度敏感,對(duì)青霉素耐藥。說(shuō)明拉薩-林芝公路沿線藏農(nóng)牧民經(jīng)常盲目給發(fā)病豬使用青霉素,致使沙門氏菌產(chǎn)生耐藥。對(duì)發(fā)病藏豬,在確診的基礎(chǔ)上,有必要與相關(guān)教學(xué)科研單位協(xié)作,通過(guò)藥敏試驗(yàn),有目的、有針對(duì)性地用藥,且用藥應(yīng)有足夠療程和劑量,盡量減少耐藥菌株產(chǎn)生。不可盲目濫用、亂用抗生素[4]導(dǎo)致菌群失調(diào)引起藏豬腹瀉,尤其是藏豬仔豬[5]。

藏豬沙門氏菌病是由沙門氏菌屬細(xì)菌感染藏豬引起的一種傳染病,發(fā)病藏豬和帶菌藏豬是主要傳染源,可從糞、尿、乳汁以及流產(chǎn)的胎兒、胎衣和羊水排菌。沙門氏菌很容易在動(dòng)物與動(dòng)物、動(dòng)物與人、人與人之間通過(guò)直接或間接的途徑傳播,沒(méi)有中間宿主。主要經(jīng)消化道感染。一年四季均可發(fā)生,但陰雨潮濕季節(jié)多發(fā)[1]。

感染沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染食品,可使人發(fā)生食物中毒。人畜感染沙門氏菌后可呈無(wú)癥狀帶菌,降低動(dòng)物的繁殖力,或者可能加重病態(tài)或死亡率,也可表現(xiàn)為有臨床癥狀的致死性疾病,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。同時(shí)嚴(yán)重威脅人們的身體健康和畜牧業(yè)的健康發(fā)展。因而做好沙門氏菌病的防控工作在醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)和公共衛(wèi)生上都有十分重要的意義。

[1] 陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M] .第6版.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2016:117-125.

[2] 李決.獸醫(yī)微生物及免疫學(xué)[M] .第2版.成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,2003:184-190.

[3] GB 4789.4—1994,食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)[S] .

[4] 陳洪生.動(dòng)物疫病防控中存在的問(wèn)題及應(yīng)對(duì)措施[J] .畜牧與飼料科學(xué),2015,36(1):111-112.

[5] 王艷敏,古金元,謝全喜,等.仔豬菌群失調(diào)引起腹瀉的微生態(tài)防治方法[J] .畜牧與飼料科學(xué),2015,36(2):114-119.

(編輯:郭玉翠)

中國(guó)居民收入差距不斷縮小

國(guó)家統(tǒng)計(jì)局發(fā)布統(tǒng)計(jì)報(bào)告說(shuō),黨的十八大以來(lái),我國(guó)城鄉(xiāng)居民收入持續(xù)較快增長(zhǎng),收入差距不斷縮小。2016年,全國(guó)居民人均可支配收入基尼系數(shù)為0.465,比2012年的0.474下降0.009。

數(shù)據(jù)顯示,十八大以來(lái)我國(guó)居民收入增速快于經(jīng)濟(jì)增速。2016年全國(guó)居民人均可支配收入23821元,比2012年增長(zhǎng)44.3%,扣除價(jià)格因素,實(shí)際增長(zhǎng)33.30%,年均實(shí)際增長(zhǎng)7.4%,快于同期GDP年均增速0.2個(gè)百分點(diǎn),更快于同期人均GDP年均增速0.8個(gè)百分點(diǎn)。

同時(shí),城鄉(xiāng)收入差距持續(xù)縮小。2016年,城鎮(zhèn)居民人均可支配收入33 616元,比2012年增長(zhǎng)39.3%,實(shí)際增長(zhǎng)28.6%,年均實(shí)際增長(zhǎng)6.5%;農(nóng)村居民人均可支配收入12 363元,比2012年增長(zhǎng)47.4%,實(shí)際增長(zhǎng)36.3%,年均實(shí)際增長(zhǎng)8.0%;城鄉(xiāng)居民人均可支配收入之比為2.72(農(nóng)村居民收入=1),比2012年下降0.16。

(摘自 人民日?qǐng)?bào)海外版[J] ,2017-07-07)

S858.28

A

1002-1957(2017)05-0113-02

2017-06-13

晉美多吉(1983-),男,西藏日喀則人,初級(jí)獸醫(yī)師,主要從事高原畜禽疫病防控技術(shù)服務(wù)指導(dǎo)工作.

E-mail:jinmeiduoji0891@126.com

馬金英(1971-),女,西藏拉薩人,副研究員,碩士,主要從事高原動(dòng)物安全生產(chǎn)研究工作.E-mail:majinying0891@163.com

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