常方圓杜曉玲戴弘季任志午廖志超楊吉龍

·臨床研究與應(yīng)用·

惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤中TBX2基因突變及相關(guān)蛋白表達(dá)的臨床意義*

常方圓①杜曉玲②戴弘季③任志午①廖志超①楊吉龍①

楊吉龍，教授，醫(yī)學(xué)博士，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師，現(xiàn)任天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科副主任。兼任中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)肉瘤專(zhuān)業(yè)委員會(huì)委員、中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤分會(huì)青年委員。曾獲天津市“131創(chuàng)新型人才”、天津市高?！爸星嗄旯歉蓜?chuàng)新人才”、“全國(guó)衛(wèi)生系統(tǒng)青年崗位能手”等稱號(hào)。主要從事骨與軟組織肉瘤的外科治療及肉瘤基因組學(xué)研究工作。主持及參與省部級(jí)以上課題12項(xiàng)。科研成果獲中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)科技獎(jiǎng)三等獎(jiǎng)（2014年）、天津市科技進(jìn)步獎(jiǎng)三等獎(jiǎng)（2015年）。在Clinical Cancer Research、Molecular&Cellular Pro?teomics、Cancer、Cancer letters、European Journal of Cancer、Journal of Hematology&Oncology、Oncotarget等期刊發(fā)表SCI論文30余篇，參與編寫(xiě)專(zhuān)著8冊(cè)。

目的：檢測(cè)惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤基因組異常并探討TBX2、CHK2和p53在惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤中的表達(dá)及其臨床意義。方法：收集天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科1991年1月至2011年12月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤組織標(biāo)本63例。從中選取新鮮且DNA質(zhì)量合格的腫瘤樣本12例，采用第二代測(cè)序（next-generation sequencing，NGS）方法，檢測(cè)人惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤組織樣本基因組異常情況。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)63例惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤組織樣本中TBX2、CHK2和p53的表達(dá)情況。結(jié)果：12例惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤組織樣本中，有1例TBX2基因突變。63例惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤組織樣本中，TBX2、CHK2和p53的高表達(dá)率分別為60.3%（38/63）、47.6%（30/63）及30.2%（19/63）。TBX2的高表達(dá)與AJCC分期、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性（P＜0.05）；TBX2的表達(dá)與CHK2的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.254，P=0.045），CHK2的表達(dá)與p53的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.343，P=0.006）。高表達(dá)TBX2、CHK2和p53的無(wú)病生存時(shí)間及總生存時(shí)間均顯著低于低表達(dá)組（P＜0.05），且TBX2、CHK2和p53均為惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤的獨(dú)立預(yù)后因素。結(jié)論：TBX2及其相關(guān)蛋白的表達(dá)可能在惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用，檢測(cè)其表達(dá)有望為MPNST預(yù)后提供理論依據(jù)。

惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤 TBX2 CHK2 預(yù)后

惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤（malignant peripheral nerve sheath tumor，MPNST）是指任何起源于外周神經(jīng)分支或外周神經(jīng)纖維鞘的惡性腫瘤，除外起源于神經(jīng)外膜或外周神經(jīng)血管系統(tǒng)的腫瘤［1-2］，約占所有軟組織惡性腫瘤的5%～10%［3］，其主要生物學(xué)特性是侵襲性和轉(zhuǎn)移性強(qiáng)，進(jìn)展迅速，預(yù)后差，屬于難治性腫瘤［4-6］。

MPNST的發(fā)生發(fā)展是多基因、多因素共同作用的結(jié)果。檢測(cè)MPNST組織中某些基因及其表達(dá)的異常情況可能會(huì)為探討MPNST的發(fā)病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。TBX2（T-box2）基因是T-BOX基因家族成員之一，能夠指導(dǎo)胚胎以及組織器官軸向發(fā)育，屬發(fā)育調(diào)控相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因［7］，在多種腫瘤中高表達(dá)，與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化以及腫瘤細(xì)胞增殖等相關(guān)［8］，其促進(jìn)腫瘤發(fā)生、發(fā)展的作用日益受到關(guān)注。細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2（cell cycle checkpoint kinase 2，CHK2）是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶，在DNA損傷修復(fù)及維持染色體穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用，其基因突變或功能異常與多種腫瘤的發(fā)生相關(guān)［9］。p53是重要的腫瘤抑制基因，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡和DNA修復(fù)具有調(diào)控作用，其突變或異常表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可作為指導(dǎo)治療和評(píng)價(jià)預(yù)后的重要指標(biāo)［10］。Wansleben等［11］在乳腺癌中的研究表明，TBX2能夠促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)，敲除TBX2后，其下游的CHK2和p53水平降低，從而阻止了DNA的修復(fù)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞有絲分裂紊亂而凋亡。

目前對(duì)一些原癌基因在MPNST發(fā)生發(fā)展中的作用已有一定認(rèn)識(shí)，但TBX2及其相關(guān)蛋白CHK2和p53在MPNST發(fā)病中的作用國(guó)內(nèi)外少有報(bào)道。本研究通過(guò)NGS方法檢測(cè)人MPNST基因組異常情況，并采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)TBX2、CHK2和p53在MPNST中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示TBX2及其相關(guān)蛋白CHK2和p53的異常表達(dá)可能與MPNST的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本

選取天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科1991年1月至2011年12月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤組織標(biāo)本63例。隨訪時(shí)間從1994年8月至2015年4月，部分病例（11例）隨訪時(shí)間＜2年。本研究獲得本院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書(shū)。

63例患者中：男性35例，女性28例；中位年齡45（6～86）歲；組織學(xué)分型：58例為散發(fā)型周?chē)窠?jīng)鞘膜瘤，5例為NF1型的惡性周?chē)窠?jīng)鞘膜瘤；頭部腫瘤10例，軀干部26例，四肢27例；腫瘤直徑≤5 cm者24例，5～10 cm者22例，＞10 cm者16例，1例失訪；根據(jù)美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)（American Joint Committee on Cancer，AJCC）腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn)，7例為Ⅰ期，32例為Ⅱ期，9例為Ⅲ期，12例為Ⅳ期，3例失例；25例術(shù)后接受放療，33例未接受放療5例失訪；25例術(shù)后接受化療，33例未接受化療，5例失訪；40例為廣泛切除，23例為邊緣切除5例失訪；40例復(fù)發(fā)，23例無(wú)復(fù)發(fā)；24例發(fā)生轉(zhuǎn)移，39例未轉(zhuǎn)移?；颊叩目偵妫╫verall survival，OS）定義為從疾病診斷開(kāi)始至因任何原因引起患者死亡的時(shí)間。患者的無(wú)病生存時(shí)間（diseasefree survival，DFS）定義為從疾病診斷開(kāi)始至疾病復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或由于疾病進(jìn)展導(dǎo)致患者死亡的時(shí)間。

從上述63例組織標(biāo)本中選取新鮮且DNA質(zhì)量合格的腫瘤樣本12例，對(duì)其全外顯子進(jìn)行第二代測(cè)序，其臨床資料見(jiàn)表1，其中編號(hào)為7的患者進(jìn)行了兩個(gè)不同部位腫瘤的測(cè)序。

1.2 主要試劑

DNA提取試劑盒購(gòu)自德國(guó)Qiagen公司。兔抗人TBX2多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Novus生物技術(shù)公司，兔抗人CHK2多克隆抗體及鼠抗人p53單克隆抗體均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司，工作濃度分別為1:50，1:200和1:50。SP染色試劑盒及DAB顯色試劑盒均購(gòu)自北京中杉試劑公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 全基因組、外顯子組測(cè)序和生物信息學(xué)分析由本課題組人員進(jìn)行組織樣本DNA提取［12］，將備好的DNA工作液送至華大基因公司（深圳）行第二代測(cè)序，并將所得測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析。

1.3.2 免疫組織化學(xué)法及結(jié)果評(píng)價(jià)采用免疫組化鏈霉素親生物素-辣根過(guò)氧化物酶法（SP法）進(jìn)行檢測(cè)，以已知陽(yáng)性切片做陽(yáng)性對(duì)照，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

在無(wú)背景染色情況下，以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核染成黃色至棕褐色細(xì)顆粒狀為陽(yáng)性反應(yīng)。在高倍鏡下（× 400）對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行評(píng)分，隨機(jī)選擇5個(gè)視野，總共計(jì)數(shù)500個(gè)細(xì)胞。將陽(yáng)性細(xì)胞按所占百分比分為5級(jí)：＜5%為0分，5%～25%為1分，25%～50%為2分，50%～75%為3分，＞75%為4分。同時(shí)對(duì)細(xì)胞著色強(qiáng)度進(jìn)行分級(jí)：0分為無(wú)色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為棕黑色。以兩者相加為所得分?jǐn)?shù)：≤1分為陰性（-），2～3分為弱陽(yáng)性（+），4～5分為中等陽(yáng)性（++），6～7分為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。陰性（-）和弱陽(yáng)性（+）為低表達(dá)組，而中等陽(yáng)性（++）和強(qiáng)陽(yáng)性（+++）為高表達(dá)組。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。TBX2、CHK2和p53的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法檢驗(yàn)。各蛋白間相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。各蛋白及臨床病理參數(shù)與生存的關(guān)系采用Log-rank檢驗(yàn)及Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型（Cox′s pro?portional hazards regression model，簡(jiǎn)稱Cox模型）計(jì)算。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MPNST基因組測(cè)序結(jié)果

對(duì)12例MPNST組織樣本進(jìn)行全基因組及外顯子組測(cè)序發(fā)現(xiàn)，NF1與TP53基因缺失及突變，CD?KN2A、EED及SUZ12等基因缺失，MDM2、CDK4及CCND2基因擴(kuò)增，與相關(guān)的報(bào)道相一致［12-15］。另外，還發(fā)現(xiàn)3例TBX1基因和1例TBX2基因突變（圖1）。TBX1基因與胚胎組織器官發(fā)育有關(guān)，目前尚無(wú)報(bào)道TBX1基因突變及蛋白表達(dá)水平與腫瘤有關(guān)，而既往文獻(xiàn)報(bào)道TBX2在腫瘤中作用較大，故本研究針對(duì)TBX2進(jìn)行了研究。結(jié)合TBX2在其他多種腫瘤中的重要作用，推測(cè)TBX2基因異?？赡苁荕PNST發(fā)生及演進(jìn)過(guò)程中的重要因素。

表112 例用于二代測(cè)序的MPNST樣本的臨床特點(diǎn)Table 1Clinical features of 12 MPNST samples used for the next-generation sequencing

?圖1 MPNST中TBX2基因突變及其它基因的改變Figure 1TBX2 gene mutation and other genetic changes in MPNST

2.2 MPNST中TBX2的表達(dá)情況與臨床病理參數(shù)的關(guān)系及預(yù)后作用

患者的DFS和OS分別為0～149.4個(gè)月（mDFS= 17.0）和0.3～150.5個(gè)月（mOS=66.87）。TBX2蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞核（圖2A），其高表達(dá)率為60.3%（38/ 63）。TBX2高表達(dá)與AJCC分期、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性，高表達(dá)TBX2組患者AJCC分期晚，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率顯著增高（表2）。而且，TBX2高表達(dá)組的DFS及OS均顯著降低（P均＜0.05，圖2B～2C）。

2.3 MPNST中TBX2與CHK2及p53的關(guān)系及其臨床意義

經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)性分析，TBX2的表達(dá)與CHK2的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.254，P=0.045），CHK2的表達(dá)與p53的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.343，P=0.006），而TBX2的表達(dá)與p53的表達(dá)無(wú)相關(guān)性（r=0.109，P=0.396）。

CHK2和p53蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞核（圖3A，3B），其高表達(dá)組陽(yáng)性率分別為47.6%（30/63）及30.2%（19/ 63）。CHK2和p53與臨床病理參數(shù)之間無(wú)相關(guān)性（P＞0.05，表2）。采用Kaplan-Meier分析CHK2和p53表達(dá)與DFS及OS的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)高表達(dá)CHK2組和p53組患者的預(yù)后均較低表達(dá)組預(yù)后差，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05，圖3C～3F）。

2.4 多因素預(yù)后生存分析

單因素分析顯示NF1亞型、有復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移組患者的預(yù)后均比非NF1亞型、無(wú)復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移患者的生存預(yù)后差，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01），而其他參數(shù)如性別、年齡、腫瘤的部位、腫瘤直徑、放療及化療等與生存預(yù)后無(wú)相關(guān)性（表3）。Cox多因素分析顯示復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、TBX2、CHK2及p53的表達(dá)均是MPNST的獨(dú)立預(yù)后因素（P均＜0.05，圖4）。

表2 MPNST中TBX2、CHK2和p53的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系Table 2Relationship of TBX2,CHK2,and p53 expression levels with clinicopathological parameters in MPNST

表2 MPNST中TBX2、CHK2和p53的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系（續(xù)表2）Table 2Relationship of TBX2,CHK2,and p53 expression levels with clinicopathological parameters in MPNST

圖2 MPNST中TBX2的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系Figure 2TBX2 expression and its relationship with MPNST prognosis

圖3 MPNST中CHK2和p53的表達(dá)及其與預(yù)后生存的關(guān)系Figure 3CHK2 and p53 expression and its relationship with MPNST prognosis

表3 MPNST患者的臨床病理參數(shù)與DFS和OS的關(guān)系Table 3The relationship of clinicopathological parameters with DFS and OS in MPNST

圖4 MPNST中顯著影響DFS及OS的因素Figure 4Significant influencing of DFS and OS in MPNST

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，高表達(dá)TBX2的MPNST患者預(yù)后明顯較差，提示TBX2可能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞惡性進(jìn)展，此結(jié)果與宋曉環(huán)等［16］應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)TBX2在甲狀腺癌組織中的表達(dá)、徐傲等［17］檢測(cè)TBX2在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)結(jié)果性質(zhì)一致。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，TBX2蛋白高表達(dá)與臨床分期、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是由于TBX2高表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)控失常，增強(qiáng)了癌細(xì)胞的增殖及浸潤(rùn)能力，易于突破基底膜向肌層及更遠(yuǎn)處浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，使MPNST的惡性程度增加，TBX2表達(dá)越高，預(yù)后越差。但是，MPNST中TBX2的具體作用及其與TBX2基因突變的關(guān)系還需進(jìn)一步研究。

本研究中，CHK2與臨床病理參數(shù)無(wú)相關(guān)性，但CHK2高表達(dá)組的MPNST患者預(yù)后較低表達(dá)組差，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明CHK2可能是影響MPNST發(fā)展的一個(gè)重要因素，但其具體機(jī)制，還有待進(jìn)一步研究。

Rouse等［18］報(bào)道當(dāng)DNA發(fā)生損傷時(shí)，毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因（ataxia telangiectasia mutated，ATM）/CHK2信號(hào)通路被激活，引起細(xì)胞周期阻滯，從而使DNA得到修復(fù)。ATM磷酸化后激活CHK2，CHK2又可磷酸化p53的絲氨酸Ser20位點(diǎn)，以保持p53的穩(wěn)定，說(shuō)明CHK2和p53相互作用可以維持細(xì)胞基因組的穩(wěn)定，使基因損傷得以修復(fù)。另有研究表明，在對(duì)順鉑耐藥的乳腺癌細(xì)胞系MCF-7中敲除了內(nèi)源性TBX2后，磷酸化的CHK2和p53水平降低，S期阻滯停止而G2/M期阻滯激活，阻止了DNA的修復(fù)，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞有絲分裂紊亂而凋亡，腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性增強(qiáng)［11］，說(shuō)明TBX2、CHK2和p53共同參與了乳腺癌細(xì)胞的惡化及增殖。本研究顯示TBX2、CHK2和p53均定位于細(xì)胞核，并且TBX2與CHK2的表達(dá)呈正相關(guān)，CHK2與p53的表達(dá)呈正相關(guān)，說(shuō)明在MPNST中三者可能發(fā)揮協(xié)同作用，從而影響MPNST的生物學(xué)行為。因此，盡管目前的結(jié)果提示TBX2、CHK2和p53可能與MPNST的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其具體作用和機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。

[1]Thway K,Fisher C.Malignant peripheral nerve sheath tumor:pathology and genetics[J].Ann Diagn Pathol,2014,18(2):109-116.

[2]Wang T,Yin H,Han S,et al.Malignant peripheral nerve sheath tumor (MPNST)in the spine:a retrospective analysis of clinical and molecular prognostic factors[J].J Neurooncol,2015,122(2):349-355.

[3]Tajima S,Koda K.A neurogenic tumor containing a low-grade malignant peripheral nerve sheath tumor(MPNST)component with loss of p16 expression and homozygous deletion of CDKN2A/p16:a case report showing progression from a neurofibroma to a high-grade MPNST[J].Int J Clin Exp Pathol,2015,8(5):5113-5120.

[4]Rodriguez FJ,Folpe AL,Giannini C,et al.Pathology of peripheral nerve sheath tumors:diagnostic overview and update on selected diagnostic problems[J].Acta Neuropathol,2012,123(3):295-319.

[5]Carlson ML,Jacob JT,Habermann EB,et al.Malignant peripheral nerve sheath tumors of the eighth cranial nerve arising without prior irradiation[J].J Neurosurg,2016,125(5):1120-1129.

[6]DurbinAD,KiDH,HeS,etal.Malignantperipheralnervesheathtumors [J].Adv Exp Med Biol,2016,916:495-530.

[7]Beukers W,Kandimalla R,Masius RG,et al.Stratification based on methylation of TBX2 and TBX3 into three molecular grades predicts progression in patients with pTa-bladder cancer[J].Mod Pathol,2015, 28(4):515-522.

[8]Abrahams A,Parker MI,Prince S.The T-box transcription factor Tbx2: its role in development and possible implication in cancer[J].IUBMB Life,2010,62(2):92-102.

[9]Jiri Bartek JL.Chk1 and Chk2 kinases in checkpoint control and cancer [J].Cancer Cell,2003,3(5):421-429.

[10]Duffy MJ,Synnott NC,McGowan PM,et al.p53 as a target for the treatment of cancer[J].Cancer Treat Rev,2014,40(10):1153-1160.

[11]WanslebenS,Davis E,Peres J,et al.Anovel rolefor theanti-senescence factor TBX2 in DNA repair and cisplatin resistance[J].Cell Death Dis, 2013,4(10):e846.

[12]Yang J,Ylipaa A,Sun Y,et al.Genomic and molecular characterization of malignant peripheral nerve sheath tumor identifies the IGF1R pathway as a primary target for treatment[J].Clin Cancer Res,2011, 17(24):7563-7573.

[13]Yang J,Du X.Genomic and molecular aberrations in malignant peripheral nerve sheath tumor and their roles in personalized target therapy[J].Surg Oncol,2013,22(3):e53-57.

[14]Fan Q,Yang J,Wang G.Clinical and molecular prognostic predictors of malignant peripheral nerve sheath tumor[J].Clin Transl Oncol,2014, 16(2):191-199.

[15]Mantripragada KK,Spurlock G,Kluwe L,et al.High-resolution DNA copy number profiling of malignant peripheral nerve sheath tumors using targeted microarray-based comparative genomic hybridization[J].Clin Cancer Res,2008,14(4):1015-1024.

[16]Song XH,Li W,Sun DM,et al.Expression and clinical significance of the transcriptional inhibition gene TBX2 in thyroid cancer[J].Chinese Journal of Gerontology,2011,19(31):3696-3698.[宋曉環(huán),李偉,孫冬梅,等.轉(zhuǎn)錄抑制基因TBX2在甲狀腺癌中的表達(dá)及其臨床病理意義[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2011,19(31):3696-3698.]

[17]Xu A,Chen K,Guo ZL,et al.Expression of TBX2 and PAX9 in endometrial adenocarcinomas and their correlation[J].J Clin Exp Pathol,2012,28 (2):158-161.[徐傲,陳柯,郭真理,等.子宮內(nèi)膜樣腺癌中TBX2、PAX9的表達(dá)及其相關(guān)性[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2012,28(2):158-161.]

[18]Rouse J,Jackson SP.Interfaces between the detection,signaling and repair of DNA damage[J].Science,2002,297(5581):547-551.

（2016-09-01收稿）

（2016-10-01修回）

（編輯：鄭莉校對(duì)：武斌）

TBX2 gene mutation and the clinical significance of related proteins expression in malignant peripheral nerve sheath tumor

Fangyuan CHANG1,Xiaoling DU2,Hongji DAI3,Zhiwu REN1,Zhichao LIAO1,Jilong YANG1

1Department of Bone and Soft Tissue Tumor,Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital,National Clinical Research Center for Cancer,Tianjin 300060,China;Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy,Tianjin 300060,China;Tianjin Clinical Research Center for Cancer,Tianjin 300060,China;2Department of Diagnostics,Tianjin Medical University,Tianjin 300061,China;3Department of Epidemiology and Biostatistics

This work was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81372872 and 81402215)

Jilong YANG,E-mail:yangjilong@tjmuch.com

Objective:To detect genomic aberrations and investigate the expression and clinical significance of TBX2,CHK2,and p53 in malignant peripheral nerve sheath tumor(MPNST)tissues.Methods:We collected 63 cases of MPNST tissue samples,which were removed by resection and were confirmed by pathology,from January 1991 to December 2011 in Department of Bone and Sofer Tissue Tumor,Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital.Twelve fresh tumor samples with qualified DNA quality were selected from the above 63 cases of tissue samples.Genome abnormalities of 12 MPNST tissues were detected by next-generation sequencing. The protein expression levels of TBX2,CHK2,and p53 in 63 MPNST tissue samples were assessed by immunohistochemistry staining.Results:One case of TBX2 gene mutation was observed out of the 12 MPNST tissue samples.In 63 MPNST tissue samples,the proteinexpression rates of TBX2,CHK2,and p53 were 60.3%(38/63),47.6%(30/63),and 30.2%(19/63),respectively.TBX2 expression was significantly correlated with AJCC(American Joint Committee on Cancer,AJCC)stage,recurrence,and metastasis(P＜0.05).TBX2 expression was directly correlated with that of CHK2(r=0.254,P=0.045),and CHK2 expression was directly correlated with that of p53(r= 0.343,P=0.006).In terms of the disease-free survival and overall survival time,patients with high expression levels of TBX2,CHK2,and p53 had significantly worse prognosis than patients with low expression levels of TBX2,CHK2,and p53(all P＜0.05).TBX2,CHK2,and p53 were independent prognostic factors of MPNST.Conclusion:TBX2 and its associated proteins may play important roles in MPNST development and progression.Detecting TBX2 expression may provide the theoretical basis for estimating the prognosis of patients with MPNST.

malignant peripheral nerve sheath tumor,TBX2,CHK2,prognosis

10.3969/j.issn.1000-8179.2017.01.014

①天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科，國(guó)家腫瘤臨床研究中心，天津市腫瘤防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津市惡性腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心（天津市300060）；②天津醫(yī)科大學(xué)診斷學(xué)教研室；③分子流行病室

*本文課題受?chē)?guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（編號(hào)：81372872，81402215）資助

楊吉龍yangjilong@tjmuch.com

常方圓專(zhuān)業(yè)方向?yàn)楣桥c軟組織腫瘤診治。

E-mail：fangyuanbaby@163.com