施紫微 黃 婷 胡錫林

Mindray BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀低值血小板臨床性能評(píng)價(jià)

施紫微①黃 婷①胡錫林②*

目的：評(píng)估Mindray BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀低值血小板(PLT)臨床性能，對(duì)比評(píng)價(jià)自動(dòng)及手動(dòng)進(jìn)樣兩種模式低值PLT的檢測(cè)結(jié)果。方法：參照國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)、美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)等標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估BC-6800低值PLT重復(fù)性及攜帶污染率；選取108份PLT減少患者抗凝全血，采用自動(dòng)和手動(dòng)兩種模式進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估兩種模式對(duì)低值PLT檢測(cè)結(jié)果的一致性。結(jié)果：自動(dòng)及手動(dòng)模式低值PLT均有較好重復(fù)性，20×109/L以上樣本兩種模式變異系數(shù)(CV)均能保證在5%以內(nèi)。20×109/L以內(nèi)樣本兩種模式重復(fù)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)差(SD)和極差(R)均非常小，標(biāo)準(zhǔn)差(SD)分別為0.5和0.8，極差(R)分別為1和2，結(jié)果波動(dòng)均非常小。自動(dòng)及手動(dòng)模式PLT攜帶污染率均＜1%，高值PLT對(duì)低值PLT均無(wú)攜帶干擾。108份低值PLT樣本兩個(gè)模式相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.9910。對(duì)臨床醫(yī)學(xué)決定水平濃度點(diǎn)進(jìn)行分析，兩種模式偏差較小。結(jié)論：Mindray BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀對(duì)低值PLT具有良好臨床性能，自動(dòng)與手動(dòng)模式對(duì)低值PLT檢測(cè)一致性較好，可根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的模式進(jìn)行測(cè)試。

血液細(xì)胞分析儀；自動(dòng)進(jìn)樣；手動(dòng)進(jìn)樣；血小板減少；性能評(píng)估

[First-author’s address]Department of Clinical Laboratory, the Second Inpatient, Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command, Fuzhou 350003, China.

血小板(platelet，PLT)是研究止血與凝血障礙的重要指標(biāo)之一，準(zhǔn)確的PLT計(jì)數(shù)在臨床應(yīng)用和治療中均具有十分重要的參考意義[1-2]。Mindray BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀是全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀，采用激光散射、鞘流阻抗和流式細(xì)胞技術(shù)(含熒光染色)等方法對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)；同時(shí)血紅蛋白采用比色法進(jìn)行測(cè)定[3-4]。本研究參照國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(nternational Council for Standardization in Haematology，ICSH)和美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(Clinical and Laboratory Sstandards Institute，CLSI)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和指南，對(duì)該儀器的低值PLT檢測(cè)能力進(jìn)行研究，其主要研究項(xiàng)目包括低值PLT重復(fù)性、攜帶污染率、自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣兩種模式對(duì)低值PLT檢測(cè)的一致性。通過(guò)對(duì)這些項(xiàng)目的評(píng)估確認(rèn)BC-6800是否滿足低值PLT日常檢測(cè)的需要，自動(dòng)與手動(dòng)進(jìn)樣兩種模式在低值PLT檢測(cè)能力是否有差異。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

(1)儀器。BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)。

(2)試劑。BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀相應(yīng)配套檢測(cè)試劑：M-68FD染色液(批號(hào)2015042801)、M-68LB溶血?jiǎng)?批號(hào)2015081805)、M-68LD溶血?jiǎng)?批號(hào)2015081605)、M-68LH溶血?jiǎng)?批號(hào)2015061804)以及M-68DS稀釋液(批號(hào)20150811102)原裝試劑均由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供。乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)和真空采血管(2 ml)由福州長(zhǎng)庚醫(yī)療器械有限公司提供，均在有效期內(nèi)使用。

(3)質(zhì)控品。BC-6D血細(xì)胞分析儀室內(nèi)質(zhì)控物：批號(hào)分別為MB015L(低值)、MB015N(中值)及MB015H(高值)，由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供，均在有效期內(nèi)使用。

1.2 標(biāo)本來(lái)源

標(biāo)本均取自南京軍區(qū)福州總醫(yī)院2016年1-3月門(mén)診和住院的108例血液病患者。均按照世界衛(wèi)生組織(WHO)《靜脈采血的最佳操作》[5]采集的靜脈血液。

1.3 檢測(cè)方法

BC-6800全自動(dòng)血液分析儀在實(shí)驗(yàn)前使用廠商配套校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，并且參加福建省臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)成績(jī)優(yōu)秀以及南京軍區(qū)臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)比成績(jī)優(yōu)秀。每日對(duì)高值、中值、低值進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，在質(zhì)量控制后進(jìn)行檢測(cè)。所有操作均嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[6]的要求。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用Microsoft Excel 2007對(duì)重復(fù)性及攜帶污染率數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，兩種模式對(duì)比采用Analyseit v4.20統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行Deming Regression和Bland-Altman Plot分析。

2 結(jié)果

2.1 重復(fù)性試驗(yàn)

選取3份低值PLT全血標(biāo)本，分別在自動(dòng)進(jìn)樣模式及手動(dòng)進(jìn)樣模式進(jìn)行重復(fù)性測(cè)試，其中一份PLT≤20×109/L，一份PLT20～40×109/L，另一份PLT在40～60×109/L。每例樣本分別在自動(dòng)進(jìn)樣模式及手動(dòng)進(jìn)樣模式各連續(xù)檢測(cè)6次，計(jì)算兩種模式各組的均值(mean)、標(biāo)準(zhǔn)差(standard deviation，SD)及變異系數(shù)(coefficient variation，CV)%，對(duì)于低值樣本，從統(tǒng)計(jì)學(xué)上看PLT≤20×109/L的CV%會(huì)比PLT20～40×109/L和40～60×109/L樣本的CV%大，推薦采用SD作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，建議SD≤3×109/L。重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1、表2和表3。

表1 自動(dòng)進(jìn)樣和手動(dòng)進(jìn)樣的重復(fù)性[PLT＜(20×109)/L]

表2 自動(dòng)進(jìn)樣和手動(dòng)進(jìn)樣的重復(fù)性[PLT(20～40)×109/L]

表3 自動(dòng)進(jìn)樣和手動(dòng)進(jìn)樣的重復(fù)性[PLT(40～60)×109/L]

2.2 攜帶污染率測(cè)定

采用自動(dòng)進(jìn)樣模式和手動(dòng)進(jìn)樣模式，各選取一份高值標(biāo)本，連續(xù)檢測(cè)3次(H1、H2、H3)，立即選取一份低值標(biāo)本連續(xù)檢測(cè)3次(L1、L2、L3)。攜帶污染率計(jì)算為公式1：

攜帶污染率要求＜1.0%，攜帶污染率測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 攜帶污染率測(cè)定結(jié)果

2.3 兩種進(jìn)樣方式低值PLT對(duì)比測(cè)試

選取108例無(wú)PLT聚集報(bào)警的低值PLT標(biāo)本，對(duì)同一份標(biāo)本采用自動(dòng)進(jìn)樣模式與手動(dòng)進(jìn)樣模式分別進(jìn)行分析。將各檢測(cè)標(biāo)本結(jié)果采用EP9-A3進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并用Deming Regression和Bland-Altman Plot進(jìn)行分析，醫(yī)學(xué)決定水平的各濃度點(diǎn)要求絕對(duì)偏差在±5×109/L以內(nèi)，相對(duì)偏差在±10%以內(nèi)。

(1)將自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣模式進(jìn)行Deming Regression分析，其結(jié)果如圖1所示。

圖1 自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣模式Deming Regression分析圖

圖2 自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣模式Bland-Altman Plot分析圖

(2)將自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣模式檢測(cè)結(jié)果偏差進(jìn)行Bland-Altman Plot分析，＞95%的濃度點(diǎn)在偏差的95%置信區(qū)間內(nèi)，其結(jié)果如圖2所示。(3)醫(yī)學(xué)決定水平各濃度點(diǎn)的偏差分析。在臨床上，當(dāng)PLT在20～50×109/L時(shí)，可有輕度出血或手術(shù)后出血癥狀，當(dāng)＜20×109/L時(shí)，可有較嚴(yán)重出血。此外，美國(guó)CLSI H26-A2文件上將PLT為10×109/L定義為一個(gè)非常重要的醫(yī)學(xué)決定水平濃度點(diǎn)，因此參照EP9-A3文件的統(tǒng)計(jì)方法，對(duì)10×109/ L、20×109/L及50×109/L的3個(gè)濃度點(diǎn)進(jìn)行了分析(見(jiàn)表5)。

表5 自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣醫(yī)學(xué)決定水平濃度點(diǎn)的偏差分析

(4)將自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣模式進(jìn)行回歸分析(見(jiàn)表6)。

3 討論

BC-6800采用阻抗法、激光散射法、結(jié)合熒光染色的流式細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，采用比色法進(jìn)行血紅蛋白測(cè)定。輸出33項(xiàng)測(cè)量參數(shù)加14項(xiàng)研究參數(shù)；紅細(xì)胞分布直方圖、PLT分布直方圖兩個(gè)直方圖；分類散點(diǎn)圖、嗜堿散點(diǎn)圖、網(wǎng)織紅散點(diǎn)圖、光學(xué)PLT散點(diǎn)圖、擴(kuò)展網(wǎng)織紅散點(diǎn)圖及有核紅散點(diǎn)圖多個(gè)二維散點(diǎn)圖及三維散點(diǎn)圖[7-9]。具有手動(dòng)、自動(dòng)及預(yù)稀釋等3種血樣進(jìn)樣方式，CBC、CBC＋DIFF、CBC＋DIFF＋RET、CBC＋RET、CBC＋NRBC、CBC＋DIFF＋NRBC、CBC＋DIFF＋RET＋NRBC、RET等8種測(cè)量模式，每小時(shí)最快可測(cè)量125個(gè)樣本[10-11]。

表6 自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣的回歸分析

本研究重點(diǎn)對(duì)該儀器的低值PLT檢測(cè)能力進(jìn)行研究，主要研究項(xiàng)目包括低值PLT重復(fù)性、攜帶污染率、自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣兩種模式對(duì)低值PLT檢測(cè)的一致性[12]。通過(guò)對(duì)這些項(xiàng)目的評(píng)估確認(rèn)BC-6800是否滿足低值PLT日常檢測(cè)的需要，自動(dòng)與手動(dòng)進(jìn)樣兩種模式在低值PLT檢測(cè)能力的差異，其評(píng)估結(jié)果如下。

(1)自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣對(duì)低值PLT均具有良好的重復(fù)性，PLT＜20×109/L、PLT在20～40×109/L及PLT在40～60×109/L的3段內(nèi)，自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣SD均＜3，而20×109/L以上的樣本兩種模式CV%均能夠保證在5%以內(nèi)。而20×109/L以內(nèi)的樣本主要因?yàn)闃颖局当旧肀容^小所以CV%略大，但通過(guò)實(shí)際數(shù)據(jù)分析，兩種模式重復(fù)測(cè)試SD及極差(R)均非常小，自動(dòng)進(jìn)樣模式及手動(dòng)進(jìn)樣模式SD分別為0.5及0.8，兩個(gè)模式R分別為1及2，結(jié)果波動(dòng)均非常小。

(2)自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣攜帶污染率分析，自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣攜帶污染率分別為0.71%及0.36%，均＜1%，高值PLT樣本對(duì)低值PLT樣本無(wú)干擾。

(3)選取108例低值PLT樣本，采取兩種模式進(jìn)行測(cè)試對(duì)比分析，相關(guān)系數(shù)達(dá)到了0.9910。對(duì)臨床醫(yī)學(xué)決定水平濃度點(diǎn)進(jìn)行分析，兩種模式偏差較小，結(jié)果一致性較好。

準(zhǔn)確的PLT計(jì)數(shù)對(duì)于出血性、血液性疾病的診斷以及臨床輸注PLT的評(píng)價(jià)等都具有十分重要的參考意義[13-15]。PLT的輸注日益增多以及價(jià)格昂貴和存在風(fēng)險(xiǎn)，因此不準(zhǔn)確的PLT計(jì)數(shù)會(huì)誤導(dǎo)臨床診治，增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。本研究評(píng)估結(jié)果表明，Mindray BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀兩種檢測(cè)模式對(duì)低值PLT檢測(cè)結(jié)果具有高度一致性，但兩種檢測(cè)模式要求的血量具有較大差異，自動(dòng)進(jìn)樣模式為200 μl，手動(dòng)進(jìn)樣模式為150 μl。如果采用自動(dòng)進(jìn)樣模式進(jìn)行標(biāo)本測(cè)量，操作完全自動(dòng)化，人工干預(yù)較少；而手動(dòng)進(jìn)樣要求血量較少，150 μl左右即可完成測(cè)試，但操作略為繁瑣。兩種進(jìn)樣模式檢測(cè)全血細(xì)胞的原理雖然相同，但所需血液樣本量不同，表明兩種進(jìn)樣模式的進(jìn)樣通道和內(nèi)部管路不完全相同[16-17]。

手動(dòng)模式檢測(cè)標(biāo)本時(shí)由于人為因素的不穩(wěn)定性，因而可能會(huì)引起兩種檢測(cè)結(jié)果的偏差。在日常工作中多數(shù)標(biāo)本均通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣模式進(jìn)行檢測(cè)，并且室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)均在自動(dòng)進(jìn)樣模式下進(jìn)行，因而不能反映手動(dòng)進(jìn)樣模式的準(zhǔn)確性。手動(dòng)模式雖然用血量少，適用于兒童和老年人等不易采血的患者，但由于人為因素，例如混勻狀態(tài)的不穩(wěn)定，因而CV較于自動(dòng)進(jìn)樣模式偏高。因此，在計(jì)數(shù)PLT時(shí)，尤其當(dāng)檢測(cè)低值PLT時(shí)，應(yīng)考慮此類誤差可能給檢測(cè)結(jié)果帶來(lái)的不準(zhǔn)確性，必要時(shí)建議使用手工法進(jìn)行復(fù)檢以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外，由于某些生理或病理原因，有些標(biāo)本PLT會(huì)較容易聚集，標(biāo)本采集后放置時(shí)間越久，PLT越容易發(fā)生聚集，在PLT計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)排除大體積PLT、PLT聚集等PLT假性減少的標(biāo)本[18-20]。

4 結(jié)語(yǔ)

通過(guò)對(duì)Mindray BC-6800全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀低值PLT的臨床性能評(píng)估，并對(duì)自動(dòng)進(jìn)樣及手動(dòng)進(jìn)樣兩種進(jìn)樣模式低值PLT檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比評(píng)價(jià)，表明BC-6800對(duì)低值PLT檢測(cè)具有良好的臨床性能，自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣模式對(duì)低值PLT檢測(cè)一致性較好，可根據(jù)科室的實(shí)際情況，自行選擇合適的模式進(jìn)行PLT檢測(cè)。

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Clinical performance evaluation of low-count platelet samples for Mindray BC-6800 automatic hematology analyzer/

SHI Zi-wei, HUANG Ting, HU Xi-lin//China Medical Equipment,2017,14(2):23-26.

Objective:To evaluate the clinical performance of low-count platelet(PLT) samples for Mindray BC-6800 automatic hematology analyzer and compare the detection results between two sampling mode(automatic injection, manual injection).Methods:To evaluate the repeatability and contamination rate of low-count platelet samples depend on ICHC, CLSI and other standards; to choose 108 blood samples with thrombocytopenia and detect them in two kinds of detection mode (automatic and manual operation), and then evaluate the consistency of low-count PLT samples between the two modes.Results:The results of two detection modes for low-count platelet samples showed there were well repeatability between them. The CV% of those samples which PLT were upon 20×109/L can be assurance within 5% in two modes. The value and fluctuation of SD and range of those samples which PLT were under 20×109/L were smaller; the SD of two modes were 0.5 and 0.8, respectively; and the Range were 1 and 2, respectively. Both of the two modes were less than 1% in carryover rates, high PLT accounts has no influence on low accounts. The correlation coefficient was up to 0.9910 between the two modes by analyzing the 108 blood samples. The results demonstrate there were low deviation and well consistency between the two modes by analyzing medical decision level concentration point for them.Conclusion:Mindray BC-6800 has good clinical performance to detect low-count PLT samples and there are well consistency between automatic and manual operation. Clinical Laboratory chooses which suitable mode to detect samples may depend on self-situation.

Hematology analyzer; Automatic injection; Manual injection; Low-count platelet samples; Performance evaluation

1672-8270(2017)02-0023-04

R197.39

A

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.02.007

2016-09-16

①南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第二住院部檢驗(yàn)科 福建 福州 350003

②南京軍區(qū)鼓浪嶼療養(yǎng)院檢驗(yàn)科 福建 廈門(mén) 361002

*通訊作者：Hxl122@163.com

施紫微,女,(1990- ),本科學(xué)歷，技師。南京軍區(qū)福州總醫(yī)院第二住院部檢驗(yàn)科，從事臨床檢驗(yàn)工作和免疫學(xué)檢驗(yàn)工作。