顧 林，李新旺，李 靜，汪 莉

（揚子江藥業(yè)集團南京海陵藥業(yè)有限公司，江蘇 南京 210049）

高效液相色譜法測定羧甲基淀粉鈉中氯乙酸殘留量

顧 林，李新旺，李 靜，汪 莉

（揚子江藥業(yè)集團南京海陵藥業(yè)有限公司，江蘇 南京 210049）

目的建立高效液相色譜法（HPLC）測定羧甲基淀粉鈉中氯乙酸殘留量。方法 采用Agilent SBC8柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以水-乙腈（90.5:9.5）為流動相，流速為1.0 mL/min，檢測波長214 nm，柱溫30℃，進樣20μL。結(jié)論 氯乙酸結(jié)果在0.9860 ng/mL～19.7208 ng/mL濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為y=580.94x+0.0509（r=1.000，n=5），重復(fù)性RSD為2.0%，平均回收率為90.9%（n=9），溶 液在10小時之內(nèi)穩(wěn)定，該方法的定量限濃度為1.97208 μg/mL。該方法簡便、經(jīng)濟、快速、專屬性好、重復(fù)性好，測定羧甲基淀粉鈉中氯乙酸殘留。

高效液相色譜法（HPLC）；外標法；氯乙酸殘留物

羧甲基淀粉鈉是一種用羧甲基醚化的變性淀粉，無味、無毒、不易霉變、易溶于水。它廣泛應(yīng)用于不溶性藥物及可溶性藥物片劑的高效崩解劑、賦形劑。羧甲基淀粉鈉常用制備工藝是由淀粉與氯乙酸反應(yīng)制備[1]，若生產(chǎn)過程中殘留氯乙酸，將與某些原料藥發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致制劑有關(guān)物質(zhì)不合格。羧甲基淀粉鈉收錄于《中國藥典》2015年版二部第608頁[2]，但無氯乙酸殘留量標準，目前國內(nèi)僅有離子色譜法測定其氯乙酸殘留量[3-4]。因此，本文首次采用高效液相色譜法測定羧甲基淀粉鈉中氯乙酸殘留量，方法較為簡便、快速、準確。

1 儀器設(shè)備與試藥

1.1 儀器設(shè)備儀器

Agilent1260高效液相色譜儀（安捷倫科技：含在線脫氣機、自動進樣器、四元泵、柱溫箱、溫控模塊及VWD檢測器）、XS-205電子天平（梅特勒-托利多）。

1.2 試劑與試藥

羧甲基淀粉鈉（湖州展望藥業(yè)有限公司，批號：20160502），氯乙酸（國藥集團化學(xué)試劑有限公司，批號20170214，純度99%），乙腈為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

硅烷鍵合硅膠色譜柱（Agilent SB C8，250 mm×4.6 mm 5 μm）；檢測器：VWD檢測器，檢測波長214 nm，柱溫：30℃，進樣量：20 μL，流速：1.0 mL/min，以水-水乙腈（90.5:9.5）為流動相。

2.2 供試品溶液的制備

精密稱取羧甲基淀粉鈉0.625 g置50 mL容量瓶中，加水適量，充分震蕩使溶解，加水定容，過濾，即得供試品溶液。

2.3 梯度標準溶液的制備

精密稱取氯乙酸0.1 g置100 mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻作為標準貯備液，分別移去0.1 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL標準貯備液于5個100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為梯度標準溶液（梯度標準溶液臨用新配，不能貯存）。

2.4 測定方法

按照2.1項下的色譜條件，精密量取梯度標準溶液及供試品溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積計算羧甲基淀粉鈉中氯乙酸的含量。

2.5 專屬性

取溶劑空白溶劑、流動相、供試品溶液及最高濃度的梯度標準溶液各20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果表明空白溶劑及流動相記錄的色譜圖中各成分峰均不干擾主成分色譜峰的測定，供試品溶液中主峰相鄰雜質(zhì)峰與主成分峰的分離度R＞1.5，表明該試驗方法的專屬性良好。

2.6 溶液穩(wěn)定性按

2.2項下所述操作，制備供試品溶液，室溫避光放置，分別于0小時、2小時、4小時、6小時、8小時、10小時，精密量取20 μL注入高效液相色譜儀，以其峰面積計算相對標準偏差RSD（%），各時間點的RSD均小于2.0%，，表明供試品溶液在11小時內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。

2.7 精密度

2.7.1 重復(fù)性

取本品，按2.2項下配制方法配制供試品溶液6份，按2.3項下梯度標準溶液制備的配制方法制備梯度標準溶液，照2.1及2.4項下的色譜條件及測定方法進行檢測，計算得依帕司他膠囊-顆粒的平均含量為0.062%，RSD=2.0%（n=6），說明該方法的重復(fù)性良好。

2.7.2 中間精密度

取同一批羧甲基淀粉鈉，在不同的日期，由不同的操作人員使用的不同儀器，照2.1、2.2、2.3及2.4所述色譜條件和測定方法對其進行檢驗，計算得氯乙酸的平均含量為0.061%，RSD為2.8%，表明該方法的中間精密度良好。

2.8 線性關(guān)系考察

精密稱取氯乙酸適量，用水分別配制成每1 mL中含氯乙酸為0.00098604 mg、0.0049302 mg、0.0098604 mg、0.0147906 mg和0.0197208 mg的溶液，在214 nm波長下測定的峰面積為0.691304、2.82073、5.85289、8.52245和11.58158。以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，進行線性回歸，求得回歸方程為：y=580.94x+0.0509（r=1.000，n=5）。結(jié)果表明氯乙酸在0.9860 μg/mL～19.7208 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.9 準確度

精密稱取氯乙酸0.08 g、0.1 g、0.12 g各三份分別置200 mL量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，得準確度測定三個濃度梯度母液共九份，再精密稱取羧甲淀粉鈉0.250 g、0.312 g、0.375 g各三份，分別置50 mL量瓶中，依次量取準確度梯度母液各0.5 mL置上述9份樣品中，加水適量，充分震蕩使溶解，加水定容，過濾，即得準確度梯度考察溶液，取三個濃度梯度考察溶液各20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算氯乙酸的回收率。氯乙酸的平均回收率為90.9%，RSD=0.1%（n=9）。

2.10 定量限

取氯乙酸約99.6 mg，置200 mL量瓶中，加水稀釋至適至刻度，搖勻。 再精密量取1 mL，置250 mL量瓶中，加水稀釋至適至刻度，搖勻，精密量取20 μL注入液相色譜儀，此時溶液濃度為1.97208 μg/mL，精密量取20 μL注入液相色譜儀，其信噪比為11.1，符合規(guī)定，即該方法的定量限濃度為1.97208 μg/mL。

3 討 論

首次以高效液相色譜法測定羧甲基淀粉鈉中氯乙酸的殘留量，準確度高，精密度高，且線性、回收率、穩(wěn)定性等結(jié)果均符合要求。

[1]江雄知,崔麗麗,李和平,羧甲基淀粉鈉的合成與應(yīng)用研究進展[J].精細與專用化學(xué)品,2008,17:23-27.

[2]張錦梅,張苗苗,鄭秀瑾,商榮寧,張習(xí)志,離子色譜法測定羧甲基淀粉鈉中羥基乙酸根、氯乙酸根、氯離子、磷酸根和硫酸根的含量[J].理化檢驗(化學(xué)分冊),2017,53:611-614.

Determination of chloroacetic acid residue in sodium carboxymethyl starch by high performance liquid chromatography

GU Lin, LI Xin-wang, LI Jing, WANG Li
(Yangtze River Pharmaceutical Group Nanjing Hailing Pharmaceutical Co., Ltd.,Jiangsu Nanjing 210049, China)

ObjectiveTo establish a method for the determination of thechloroacetic acidresidueofSodium Carboxymethylstarch. Methods the determination was performed on AgilentSB C8column,withmoboile phasewater:aceticacid(90.5:9.5).The flow rateis 1.0mL/min.The detection wavelength was set at 214 nm and the injection volum was 20μL. Results The liner range was 0.9860μg/mL～19.7208μg/mL(R2=0.9974),the RSD of repeatability is 2.0pecent. Conclusion The method is simple and accurate,and suitable for quality control of the chloroacetic acid residue of Sodium Carboxymethyl starch.

High Performance Liquid Chromatography; Chloroacetic acid; Residue

R927

A

ISSN.2095-8242.2017.40.7726.02

本文編輯：王雨辰