蘇繼洲，胡志東

（天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，天津 300052）

1 EBV引起兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥的臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室檢查特點(diǎn)

1.1 臨床癥狀

EBV引起兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥是一種臨床綜合征，典型特征為發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大、扁桃體大和上腭斑等，部分患兒還可為不典型傳單，傳單與咽峽炎，更有甚者會(huì)出現(xiàn)嗜血細(xì)胞綜合征、再生不良性貧血、自身免疫性疾病以及免疫功能低下等情況。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢查特點(diǎn)

外周血異型淋巴細(xì)胞增多及出現(xiàn)嗜異性凝集抗體，可合并有肝脾腫大與肝功能異常，EBV抗體陽(yáng)性反應(yīng)，特別說(shuō)明EBV感染是引發(fā)傳染性單核細(xì)胞增多癥的常見(jiàn)原因，包括近些年來(lái)研究的EBV-DNA拷貝數(shù)的監(jiān)測(cè)也尤為重要。

2 EBV的病原學(xué)特征及病理機(jī)制

2.1 病原學(xué)特征

EBV是一種雙鏈DNA病毒，具有親淋巴細(xì)胞性和親上皮細(xì)胞性。出現(xiàn)EBV原發(fā)感染后患兒臨床癥狀通常不明顯，特別是對(duì)于年齡低于六歲的兒童而言，主要表現(xiàn)為輕型或者隱性發(fā)病，但處于兒童期、青春期以及青年期的患兒，進(jìn)展為IM的機(jī)率在50%。

2.2 病理機(jī)制

EBV感染包括兩種方式，即潛伏感染以及復(fù)制性感染，復(fù)制性感染可誘發(fā)IM。EBV損害機(jī)體淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞的溶細(xì)胞，T淋巴細(xì)胞活化和其B細(xì)胞（受感染）之間產(chǎn)生交互作用，促使B細(xì)胞裂解后分解出VCA（衣殼抗原）和EA（早期抗原），其與細(xì)胞毒性T細(xì)胞、B細(xì)胞產(chǎn)生的免疫復(fù)合物的沉積侵犯到其他器官組織為IM臨床多樣化表現(xiàn)的前提。

3 EBV抗體的檢測(cè)

人體受EBV感染后可以產(chǎn)生抗-VCA（抗-VCA）、早期抗體（抗-EA）、EBV核抗體（抗-EBNA）等。各種抗體出現(xiàn)的時(shí)間，其中VCA-IgM在感染早期出現(xiàn)，是近期急性感染的主要標(biāo)志物；VCA-lgG一般提示為既往感染。EA是病毒增殖的標(biāo)志，抗一EA出現(xiàn)在原發(fā)感染的恢復(fù)期，同樣是提示近期感染的標(biāo)志物?？挂籈BNA出現(xiàn)于急性感染的數(shù)周后，VCA-IgG和EA-lgG水平下降，兒童EBNA-IgG開(kāi)始出現(xiàn)，其臨床意義提示為EBV的既往感染。其中VCA-IgM抗體陽(yáng)性對(duì)診斷最有價(jià)值，其可將EBV近期感染反映出，具有較高的特異性與急性期陽(yáng)性率，在診斷早期不典型IM具有極其重要的現(xiàn)實(shí)意義。

4 EBV-DNA的研究進(jìn)展及優(yōu)勢(shì)

（1）個(gè)體遭受EBV感染后，經(jīng)宿主本身免疫抑制性所產(chǎn)生的控制作用，大部分患者的體內(nèi)EBV不會(huì)出現(xiàn)增殖過(guò)度的情況，進(jìn)而致病，值得注意的是，部分病毒可于人體B細(xì)胞中長(zhǎng)期潛伏，因此受到感染的患者會(huì)成為終生帶毒者。通過(guò)某些誘導(dǎo)因子或者一定條件作用下，激活了感染細(xì)胞中潛伏的EBV基因組，進(jìn)而出現(xiàn)表達(dá)，最終增殖誘發(fā)疾病。在此階段，患者外周血液白細(xì)胞中存在較多的EBV-DNA。

據(jù)近些年來(lái)很多文獻(xiàn)報(bào)道，在疾病早期如第一周內(nèi)，EBV的檢出率較低。在EBV初次感染的急性期，VCA-IgM可表現(xiàn)為明顯的滴度升高，健康攜帶者或者處于恢復(fù)期的患者抗體滴度則維持在低水平，免疫抑制、復(fù)發(fā)于再次感染的患兒患兒常常未出現(xiàn)抗體增高，假陰性反應(yīng)發(fā)生率較高。

EBV-DNA的提取方法是采用EBV核酸擴(kuò)增實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒，以一條EBV特異性熒光探針與一對(duì)EBV特異性引物，結(jié)合PCR反應(yīng)液、核苷酸單體以及耐熱DNA聚合酶等成分，通過(guò)PCR體外擴(kuò)增法檢測(cè)EB-DNA。

（2）有研究表明，血清中DNA載量更能反映裂解期感染，在IM其陽(yáng)性率94.9%，敏感度94.9%，特異度97.4%，采用EBV-DNA檢測(cè)可在EBV感染7天以內(nèi)或到12天的檢測(cè)是最有效的，但病程14天后，多數(shù)EBV—IM患者血清中已檢測(cè)不到病毒核酸。研究顯示IM患者的外周血中EBV—DNA載量與臨床表現(xiàn)的嚴(yán)重程度成正相關(guān)。也有報(bào)道認(rèn)為重癥病人血清中存在高拷貝數(shù)的EBV—DNA，要注意并發(fā)噬血組織細(xì)胞增生癥的可能。

5 小 結(jié)

綜上所述，EBV－DNA檢測(cè)作為EBV感染的分子生物學(xué)標(biāo)記，快速、簡(jiǎn)便、特異性強(qiáng)，具有較高的準(zhǔn)確性和可靠性。對(duì)臨床確診EBV感染所導(dǎo)致的兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥，及時(shí)調(diào)整治療方案，避免濫用抗生素有積極的指導(dǎo)意義。因此，將實(shí)時(shí)定量熒光聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)應(yīng)用在EBV-DNA檢測(cè)中，其拷貝數(shù)能夠作為血清學(xué)診斷早期未明確兒童IM診斷方式及監(jiān)測(cè)病情的評(píng)估更有值。

[1] 劉 浩,蔣龍鳳.EB病毒相關(guān)傳染性單核細(xì)胞增多癥102例臨床分析.中華臨床醫(yī)師雜志[EB/OL],2013,7(18):8209-8212.

[2] 祁新蕾.PCR檢測(cè)70例兒童EBV-DNA的臨床分析[B].中國(guó)醫(yī)藥指南,2013,11(2):573.