高 波 高司晗

1吉林省吉林市船營(yíng)區(qū)婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心檢驗(yàn)科 吉林省吉林市 132011 2吉林省吉林市船營(yíng)區(qū)青島保健院檢驗(yàn)科 吉林省吉林市 132011

免疫學(xué)檢驗(yàn)中的酶免疫技術(shù)分析

高 波1高司晗2

1吉林省吉林市船營(yíng)區(qū)婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心檢驗(yàn)科 吉林省吉林市 132011 2吉林省吉林市船營(yíng)區(qū)青島保健院檢驗(yàn)科 吉林省吉林市 132011

目的：分析免疫學(xué)檢驗(yàn)中酶免疫技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值。方法：選取我院診治的42例乙型肝炎患者作為研究組，另選取42例健康體檢者作為對(duì)照組，所有人員均應(yīng)用酶免疫技術(shù)進(jìn)行免疫學(xué)檢驗(yàn)，對(duì)比兩組患者的檢驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果：在研究組的重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果中，+20%濃度臨界值的陽(yáng)性率≥95%，-20%濃度臨界值的陽(yáng)性率≤5%，檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性者41例，靈敏度為97.2%。對(duì)照組檢測(cè)結(jié)果呈陰性者41例，靈敏度為97.2%。結(jié)論：在免疫學(xué)檢驗(yàn)中，酶免疫技術(shù)具有較高的應(yīng)用價(jià)值，可在臨床上推薦。

免疫學(xué)檢驗(yàn)；酶免疫技術(shù)；乙型肝炎

乙型肝炎是因乙型肝炎病毒感染所致，我國(guó)是乙型肝炎流行區(qū)域。一項(xiàng)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)的乙型肝炎病毒感染者約達(dá)10%，對(duì)人們的身心健康造成了一定的影響[1]。乙型肝炎的免疫學(xué)檢驗(yàn)對(duì)其防治與療效判斷具有非常重大的意義。目前我國(guó)進(jìn)行免疫學(xué)檢驗(yàn)的方法有很多，酶聯(lián)免疫技術(shù)分析法（enzyme linked Immunosor bent assay，ELISA）是常用方法之一。本研究為了進(jìn)一步分析免疫學(xué)檢驗(yàn)中酶免疫技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值，選取了我中心（院）2016年2月到2017年2月診斷的42例乙型肝炎患者與健康體檢者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我中心（院）診治的42例乙型肝炎患者作為研究組，所有患者均符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)與感染病學(xué)分會(huì)聯(lián)合修訂的《中國(guó)慢性乙型肝炎防治指南》診斷分型標(biāo)準(zhǔn)[2]。患者中，男25例，女17例；年齡22～67歲，平均（38.2±4.8）歲；慢性乙肝攜帶者15例，慢性活動(dòng)性乙肝13例，急性乙肝7例，乙肝合并肝硬化5例，肝癌2例。另選取42例健康體檢者作為對(duì)照組，對(duì)比兩組人員的性別、年齡等一般資料，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

檢測(cè)儀器為酶標(biāo)儀、洗板機(jī)，均源自安圖斯生物有限公司，型號(hào)為PHOMO。檢測(cè)試劑盒源自珠海麗珠生物技術(shù)有限公司。質(zhì)控血清源自衛(wèi)生部臨檢中心，批號(hào)為200902001。所有操作均嚴(yán)格根據(jù)試劑盒的操作說(shuō)明進(jìn)行，具體操作步驟為：所有人員均于清晨空腹采集靜脈血3~5ml，凝集30min以上，分離血清待檢測(cè)。將酶復(fù)合物稀釋后加入血清、陰性、陽(yáng)性對(duì)照與質(zhì)控品；放置1h后孵育，洗板，添加底物，避光反應(yīng)30min后添加終止液；添加底物溶液，在酶作用下使供氫體由無(wú)色的還原型變成有色的氧化型；通過(guò)底物顏色反應(yīng)判斷有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)，底物顏色深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原量呈正比。收集檢測(cè)組S/CO檢測(cè)值（即陽(yáng)性對(duì)照吸光度值之比，<1視為陽(yáng)性，否則為陰性）接近于1的陽(yáng)性樣本進(jìn)行稀釋，重復(fù)檢測(cè)樣本直至陰性、陽(yáng)性率均為50%，此濃度則為臨界值濃度，以此計(jì)算臨界值樣本±20%濃度的稀釋倍數(shù)，并進(jìn)行20次檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以%表示，組間對(duì)比采用X2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在研究組的重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果中，+20%濃度臨界值的陽(yáng)性率≥95%，-20%濃度臨界值的陽(yáng)性率≤5%，檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性者41例，靈敏度為97.2%。對(duì)照組檢測(cè)結(jié)果呈陰性者41例，靈敏度為97.2%。

3 討論

乙型肝炎已是目前全球上僅次于艾滋病的第二大公害病，會(huì)發(fā)展為肝硬化以及乙型肝炎相關(guān)性肝癌，進(jìn)而對(duì)人們的身體健康與生命安全造成較大影響。我國(guó)是乙型肝炎病毒感染的多發(fā)區(qū)，正常人群中HBsAg陽(yáng)性者約占10%。乙型肝炎的發(fā)病因素主要是乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染，此病毒具有獨(dú)特的復(fù)制功能，可誘發(fā)多種肝臟病癥，因此導(dǎo)致患者病情常反復(fù)發(fā)作、難以根治，對(duì)其生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響，也給社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展與醫(yī)療服務(wù)工作帶來(lái)了一定的壓力[3]。

乙型肝炎病毒感染后，其治療效果判定的參考指標(biāo)主要為血清免疫學(xué)標(biāo)志物，包括表面抗原（HBsAg）、表明抗體（HBsAb）、e抗原（HBeAg）、e抗體（HBeAb）、核心抗體（HBcAb），俗稱乙肝兩對(duì)半。乙肝兩對(duì)半的檢測(cè)具有一定的敏感性與特異性，其檢測(cè)結(jié)果是當(dāng)前臨床診斷患者感染的重要參考數(shù)據(jù)。然而，近年來(lái)有研究結(jié)果指出，藥物等因素的影響，會(huì)造成乙型肝炎病毒變異株的產(chǎn)生，使個(gè)別乙型肝炎病毒患者的血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)出現(xiàn)失誤。因此，有必要進(jìn)一步研究更有效的免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。

隨著科學(xué)越來(lái)越進(jìn)步，臨床檢測(cè)手段也越來(lái)越多，當(dāng)中應(yīng)用最為廣泛的就屬酶聯(lián)免疫技術(shù)分析法。該方法是將已知的抗原或抗體附著于固相載體表面中，使具有酶標(biāo)記的抗原、抗體的反應(yīng)在此處進(jìn)行，并洗除液相中的游離成分。本研究對(duì)乙型肝炎患者與健康體檢者應(yīng)用酶聯(lián)免疫技術(shù)分析法進(jìn)行免疫學(xué)檢驗(yàn)，對(duì)比兩組人員的檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)研究組重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果中+20%濃度臨界值的陽(yáng)性率≥95%，-20%濃度臨界值的陽(yáng)性率≤5%，提示±20%是酶聯(lián)免疫技術(shù)分析法的臨界濃度值，對(duì)此范圍外的標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)可獲得準(zhǔn)確結(jié)果，本研究的檢測(cè)結(jié)果是研究組與對(duì)照組的靈敏度均為97.2%，提示酶聯(lián)免疫技術(shù)分析法的靈敏度高，可用于乙型肝炎的免疫學(xué)檢驗(yàn)中。值得注意的是，酶聯(lián)免疫技術(shù)分析法存在一定概率的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果，因此應(yīng)謹(jǐn)慎操作，盡量消除相關(guān)影響因素。

綜上所述，在免疫學(xué)檢驗(yàn)中，酶免疫技術(shù)具有較高的應(yīng)用價(jià)值，可在臨床上推薦。

[1]程育春.化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2016,11(15):53-55.

[2]劉麗,何露,孔凡虹,等.應(yīng)用快速孵育法優(yōu)化酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)過(guò)程探討——以乙型肝炎病毒表面抗原檢測(cè)為例[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2016,23(09):1073-1076.

[3]付磊磊.兩種不同方法在全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析檢測(cè)乙型肝炎病毒表面抗原中的應(yīng)用[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2015(12):1298-1299.

高波（1968-），男。大學(xué)?？茖W(xué)歷。主管檢驗(yàn)師。研究方向?yàn)榕R床檢驗(yàn)。

高司晗（1992-），女。大學(xué)?？茖W(xué)歷。研究方向?yàn)榕R床檢驗(yàn)。