周萬(wàn)青，王菁菁，張之烽(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院檢驗(yàn)科，南京 210008)

·案例分析·

侵蝕艾肯菌致血流感染1例

周萬(wàn)青，王菁菁，張之烽(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院檢驗(yàn)科，南京 210008)

侵蝕艾肯菌；血流感染

侵蝕艾肯菌(Eikenellacorrodens)是人類(lèi)黏膜表面正常菌群。當(dāng)機(jī)體免疫力下降或黏膜損傷時(shí)可進(jìn)入周?chē)M織引起軟組織膿腫、中耳炎、肺炎、心內(nèi)膜炎、敗血性關(guān)節(jié)炎及術(shù)后感染等[1]。我們?cè)谑彻馨┬g(shù)后發(fā)熱患者血液中檢出侵蝕艾肯菌1例，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 病歷摘要

患者男，59歲。2016年12月17日外院行食管癌切除術(shù)，2017年1月15日患者受涼后出現(xiàn)發(fā)熱并持續(xù)近1個(gè)月，體溫最高達(dá)39.5 ℃。有高血壓病史10余年。于2017年2月11日以“發(fā)熱待查”收治入院。入院查體：體溫40 ℃，伴畏寒、寒戰(zhàn)、咳嗽咳痰，胸腹部見(jiàn)一長(zhǎng)約12 cm豎行手術(shù)瘢痕，愈合良好，右側(cè)季肋部可見(jiàn)長(zhǎng)約15 cm斜行手術(shù)瘢痕；實(shí)驗(yàn)室檢查：WBC 14.6×109/L，N 92.8%，Hb 110 g/L，C反應(yīng)蛋白 81.4 mg/L，降鈣素原50.13 ng/mL，血沉44 mm/h；胸部+上腹部增強(qiáng)CT：“食管癌術(shù)后”改變，右側(cè)胸腔胃；右肺上葉局限性肺氣腫，兩肺多發(fā)索條伴少量滲出，雙側(cè)胸膜增厚；心包少量積液；雙側(cè)胸腔及右肺葉間裂積液；脾臟低密度灶(脾膿腫)。分別于2017年2月12日和13日發(fā)熱時(shí)抽取血液送培養(yǎng)，均鑒定為侵蝕艾肯菌。臨床給予哌拉西林/他唑巴坦和復(fù)方磺胺甲噁唑治療，患者體溫降為正常，各項(xiàng)指標(biāo)均恢復(fù)正常，于2017年3月9日好轉(zhuǎn)出院。

2 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定

無(wú)菌操作下于2017年2月12日和13日分別抽取患者靜脈血各10 mL，注入SA培養(yǎng)瓶并置Bact/Alert 3D血培養(yǎng)儀(法國(guó)生物梅里埃公司)進(jìn)行培養(yǎng)，分別于40.08 h和21.6 h報(bào)陽(yáng)，直接涂片革蘭染色(貝索公司)見(jiàn)革蘭陰性桿菌，細(xì)長(zhǎng)、筆直狀，見(jiàn)圖1。轉(zhuǎn)種哥倫比亞血瓊脂平板和巧克力平板(法國(guó)生物梅里埃公司)，置35 ℃、5% CO2環(huán)境培養(yǎng)24 h后呈針尖樣菌落，72 h后呈扁平、光滑、圓形、中間凸起菌落，棉簽蘸取可見(jiàn)黃色，其中巧克力平板上菌落呈明顯黃色并不易刮取，見(jiàn)圖2。經(jīng)Vitek 2 Compact NH卡鑒定為侵蝕艾肯菌，生物編碼為0622002000，鑒定率為99%。生化反應(yīng)：觸酶陰性，氧化酶陽(yáng)性，鳥(niǎo)氨酸脫羧酶、L-脯氨酸氨基肽酶、亮氨酸氨基肽酶、丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸氨基肽酶及ELLMAN試驗(yàn)均陽(yáng)性。并經(jīng)16S rRNA鑒定[2]為侵蝕艾肯菌，測(cè)序結(jié)果經(jīng)NCBI上BLAST比對(duì)，顯示與侵蝕艾肯菌(登錄號(hào)：NR_104685.1)相似度為99.4%。參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)M45A[3]，采用E-test條(鄭州安圖生物公司)檢測(cè)該菌株對(duì)青霉素和頭孢曲松的最低抑菌濃度(MIC)結(jié)果分別為1.5 mg/mL和0.48 mg/mL。

圖1 血培養(yǎng)直接涂片革蘭染色(×1 000)

注：A，72 h 血平板菌落；B，72 h巧克力平板菌落。

圖2 侵蝕艾肯菌菌落形態(tài)

3 討論

本文患者在菌株分離前2個(gè)月行食管癌切除術(shù)，存在黏膜損傷的高危因素，術(shù)后持續(xù)性發(fā)熱。外院不規(guī)則抗感染治療效果不佳，曾間斷性使用青霉素和亞胺培南等藥物。比較術(shù)前與入本院后CT檢查結(jié)果顯示，患者發(fā)生術(shù)后的脾膿腫，可能由于手術(shù)操作導(dǎo)致致病菌血行播散，于脾臟形成遷徙性膿腫灶。而臨床脾膿腫的有效抗感染治療療程較長(zhǎng)，需根據(jù)脾膿腫吸收情況決定療程。因此推測(cè)該患者可能發(fā)生術(shù)后感染，由于診治療程的不規(guī)范，造成嚴(yán)重的敗血癥。

常規(guī)工作中血培養(yǎng)直接涂片見(jiàn)革蘭陰性桿菌而轉(zhuǎn)種血平板不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)緩慢者，需警惕厭氧菌或苛養(yǎng)性細(xì)菌。本文分離侵蝕艾肯菌生長(zhǎng)要求較高，巧克力平板生長(zhǎng)速度快于血平板。連續(xù)2天血培養(yǎng)報(bào)陽(yáng)時(shí)間均超過(guò)20 h，表明該菌種生長(zhǎng)緩慢的特性。對(duì)于此類(lèi)細(xì)菌的鑒定目前商品化鑒定板卡均可獲得較好的結(jié)果，前提是板卡的正確使用。此菌涂片發(fā)現(xiàn)為革蘭陰性桿菌，而選擇常規(guī)革蘭陰性桿菌鑒定板卡進(jìn)行鑒定，會(huì)造成判斷錯(cuò)誤并誤導(dǎo)臨床。對(duì)于少見(jiàn)菌種的鑒定，質(zhì)譜技術(shù)的使用具有快速、簡(jiǎn)便的特性，并已廣泛推廣。而對(duì)于菌種的確切鑒定，分子方法為金標(biāo)準(zhǔn)。本文該菌株首先經(jīng)生化鑒定，并經(jīng)分子鑒定的確認(rèn)。

文獻(xiàn)報(bào)道該菌可引起頸部膿腫、腹腔感染等[4-5]，而且多為混合感染，對(duì)于血流感染報(bào)道卻少見(jiàn)[1]。血流感染多為單一菌種，本例患者是否合并厭氧菌感染尚不知。對(duì)該菌株進(jìn)行青霉素MIC測(cè)定，依據(jù)CLSI M45A判為敏感。臨床選取哌拉西林/他唑巴坦聯(lián)合復(fù)方磺胺甲噁唑治療1周后患者各項(xiàng)炎癥指標(biāo)均有所下降，并維持正常體溫。經(jīng)過(guò)延長(zhǎng)治療療程，脾臟病灶吸收消失，病情穩(wěn)定后帶藥出院，鞏固治療。

[1]陳東科, 陳相, 胡云建, 等. 4株侵蝕艾肯菌的分離與鑒定[J].臨床檢驗(yàn)雜志, 2005, 23(5): 355-357.

[2]屈平華, 趙紅波, 黃彬, 等. 衛(wèi)生部微生物室間質(zhì)評(píng)1012菌的鑒定與放線菌屬的系統(tǒng)發(fā)生分析[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 34(9): 814-819.

[3]Clinical and Laboratory Standards Institute. CLSI document M45-A2. Methods for antimicrobial dilution and disk susceptibility testing of infrequently isolated or fastidious bacteria; approved guideline-second edition[S]. Wayne, PA: CLSI, 2010.

[4]張繼東. 腹水檢出嚙噬艾肯菌1例[J]. 臨床檢驗(yàn)雜志, 2014, 32(2): 160.

[5]趙碩, 徐瑞龍, 單小云. 侵蝕艾肯菌致頸前瘺管感染1例[J]. 臨床檢驗(yàn)雜志, 2007, 25(2): 119.

(本文編輯：劉群)

10.13602/j.cnki.jcls.2017.04.24

周萬(wàn)青，1981年生，男，主管技師，碩士，主要從事微生物檢驗(yàn)及相關(guān)耐藥機(jī)制研究。

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2017-02-28)