王玉瑩

摘 要：鹽酸氨溴索片是一種常見(jiàn)的非處方類(lèi)藥品，對(duì)于患者痰液粘稠不易可咳出的現(xiàn)象有一定的改善作用。高效液相色譜法常用于檢驗(yàn)混合溶劑的含量分析，在化學(xué)、醫(yī)學(xué)等各項(xiàng)檢驗(yàn)中都有廣泛的應(yīng)用。本文將對(duì)應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行的鹽酸氨溴索片的含量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)進(jìn)行將要的概括和分析。希望能為廣大醫(yī)學(xué)工作者的臨床實(shí)驗(yàn)和工作提供有一定價(jià)值的參考。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；鹽酸氨溴索片；含量；測(cè)定

鹽酸氨溴索，化學(xué)名稱為反式4-[（2-氨基-3，5二溴-苯基）甲基-氨基]環(huán)己醇鹽酸鹽，通常情況下呈白色，是一種粘液調(diào)節(jié)劑，針對(duì)咳痰癥狀有一定的改善作用，在醫(yī)療領(lǐng)域常被用于治療支氣管炎和哮喘等呼吸道疾病。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，可以采用紫外分光光度法對(duì)鹽酸氨溴索片的含量進(jìn)行測(cè)定。但這種方法存在這某些不確定因素，會(huì)影響正常實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，產(chǎn)生誤差。而選用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸氨溴索片含量的方式準(zhǔn)確性較強(qiáng)，值得推廣。本文將對(duì)該實(shí)驗(yàn)進(jìn)行簡(jiǎn)要介紹。

1 實(shí)驗(yàn)器材與實(shí)驗(yàn)樣品

1.1 實(shí)驗(yàn)器材

高效液相色譜法也叫做高壓液相色譜法，是色譜法的以一種主要構(gòu)成形式。使用高效液相色譜法，所需的器材主要有高壓輸液泵、色譜柱、進(jìn)樣器、檢測(cè)器等。對(duì)該技術(shù)的準(zhǔn)確應(yīng)用，可以在較短時(shí)間內(nèi)通過(guò)對(duì)相對(duì)較少的樣品的實(shí)驗(yàn)分析得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這種方法優(yōu)于傳統(tǒng)的紫外分光光度法，能夠靈敏而精確地對(duì)樣品進(jìn)行準(zhǔn)確的分析，從而達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>

1.2 鹽酸氨溴索片

鹽酸氨溴索片的主要成分是鹽酸氨溴索，輔料包括淀粉、乳糖、硬脂酸鎂和膠態(tài)二氧化硅。鹽酸氨溴索片外觀為白色的片劑，在陰涼、密閉的環(huán)境中可以保存60個(gè)月。它的服用方法也比較簡(jiǎn)單，成人每日在三餐后服用，每次服用一到兩片就可以了。

1.3 實(shí)驗(yàn)樣品

實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選用藥品和試劑主要有鹽酸氨溴索片、甲醇、醋酸銨溶液，以及分析純。為準(zhǔn)確完成實(shí)驗(yàn)，應(yīng)準(zhǔn)備充足的樣品，用以設(shè)置對(duì)照組實(shí)驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)流程

為使實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，實(shí)驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格遵循規(guī)定的實(shí)驗(yàn)流程。在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行工程中，要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行操作。

2.1 色譜

色譜的選擇應(yīng)該嚴(yán)格滿足實(shí)驗(yàn)所需要求。實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選用Phenomenex C18色譜柱。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇甲醇和0.1mol/L的醋酸銨緩沖液按照65比35的比例制作形成流動(dòng)相。其中，需要向800ml的水中，加入7.7g的醋酸銨，使之溶解后，再將溶液的PH值調(diào)至3.3，之后，加入適量的水，將溶液稀釋到1000ml。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇波長(zhǎng)244nm，波速1.0ml/min的檢測(cè)波，同時(shí)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)樣量應(yīng)為10μl。

另外，實(shí)驗(yàn)只需在室溫條件下進(jìn)行即可。

2.2 實(shí)驗(yàn)溶液的配制

實(shí)驗(yàn)所用溶液也按照相關(guān)操作、配比后，使之成為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組兩份溶液樣品。

2.2.1 實(shí)驗(yàn)組溶液。進(jìn)行試驗(yàn)之前，應(yīng)選取20片鹽酸氨溴索片，準(zhǔn)確稱量其重量后，將其研磨成分，再稱取10mg的鹽酸氨溴索細(xì)粉。再把細(xì)粉放置在容量瓶中，加流動(dòng)相至100ml，搖晃使其均勻溶解后，取其濾液作為實(shí)驗(yàn)組試液。

2.2.2 對(duì)照組溶液。把之前研磨成粉的鹽酸氨溴索再取10mg，同樣放置在容量瓶中，加入流動(dòng)相至100ml后，搖晃均勻，不做其他處理。將這部分溶液作為對(duì)照組溶液。

2.3 試用性實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)該按照已經(jīng)規(guī)定好的色譜條件，取實(shí)驗(yàn)組溶液和對(duì)照組溶液各10μl。把兩組溶液均記錄在色譜圖中。下圖1-A為對(duì)照組溶液所記錄的色譜圖，圖1-B表明實(shí)驗(yàn)中鹽酸氨溴索的保留持續(xù)時(shí)間大概是11分，與其他組分峰的分離度超過(guò)了1.5。實(shí)驗(yàn)中的理論板書(shū)為3300。

2.4 輔料干擾試驗(yàn)

按處方中各輔料的比例配制成不含鹽酸氨溴索的空白樣品，照“2.2.1”項(xiàng)下方法配制溶液，按給定的色譜條件，取10μl進(jìn)樣，記錄色譜圖，見(jiàn)圖1-C。輔料對(duì)鹽酸氨溴索峰無(wú)干擾。

2.5 線性關(guān)系

分別取鹽酸氨溴索對(duì)照品適量，照“2.2.2”項(xiàng)下方法操作，配制10、20、50、100和150μg/ml對(duì)照品溶液，按給定的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄各濃度的色譜峰面積，以峰面積對(duì)溶液濃度求得回歸方程為Y=1.15×10^4X+28573，r=0.9992，在10～150μg/ml范圍內(nèi)峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn)

取濃度為100μg/ml的對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次，RSD=0.44%，表明所選定的色譜條件系統(tǒng)穩(wěn)定。

2.7 實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性

按照之前選擇的藥品，取同一批次的藥品進(jìn)行前后共5此的測(cè)量實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)表明，樣品鹽酸氨溴索片的平均含量大約是藥品標(biāo)識(shí)含量的99.2%，RSD=0.18%。實(shí)驗(yàn)測(cè)得的數(shù)據(jù)說(shuō)明，這種實(shí)驗(yàn)發(fā)放的重現(xiàn)性比較好。

2.8 回收率試驗(yàn)

取處方量的輔料適量，精密稱取鹽酸氨溴索對(duì)照品8、10和12mg各3份，照“2.2.1”項(xiàng)下方法配制溶液，按給定的色譜條件，取10μl進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)得平均回收率為99.0%，RSD=0.77%（n=9）。

2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一供試品溶液，按給定的色譜條件在0、2、4、6和8h分別進(jìn)樣測(cè)定峰面積，RSD=0.82%，表明樣品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.10 樣品含量測(cè)定

取鹽酸氨溴索片3批各20片，稱重，研細(xì)，照“2.2.1”項(xiàng)下方法操作，按給定的色譜條件，取10μl進(jìn)樣，各批分別進(jìn)樣3次，記錄色譜圖。另精密稱取鹽酸氨溴索對(duì)照品10mg，置100ml量瓶中，照“2.2.1”項(xiàng)下方法配制溶液，按給定的色譜條件，取10μl進(jìn)樣，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，3批樣品含量測(cè)定結(jié)果，見(jiàn)表3。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后，如果測(cè)量得出實(shí)驗(yàn)所用流動(dòng)相中，甲醇的比例較實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前減少，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)中樣品的保留時(shí)間較長(zhǎng)，消耗也相應(yīng)增多。如果流動(dòng)相中，甲醇比例較實(shí)驗(yàn)前增加，則說(shuō)明樣品的分離度比較小，所以是實(shí)驗(yàn)選用流動(dòng)相的最佳比例為65個(gè)單位的甲醇比35個(gè)單位的醋酸銨緩沖液。

結(jié)束語(yǔ)

鹽酸氨溴索片是臨床醫(yī)學(xué)中用于治療咳痰病癥的重要藥品，在臨床醫(yī)學(xué)中對(duì)相關(guān)疾病的治療具有非常顯著的改善作用。采用高效液相色譜法對(duì)鹽酸氨溴索片的含量進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量實(shí)驗(yàn)方法較為簡(jiǎn)單、快捷，能夠?yàn)閷?shí)際制藥工作和醫(yī)學(xué)研究工作提供有用的參考。因此，高效液相色譜法測(cè)定鹽酸氨溴索片含量的方法可被廣泛應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1]鄭芳，朱雪松，師娉嬪，等.鹽酸氨溴索注射液與注射用加替沙星的配伍穩(wěn)定性考察[J].中國(guó)藥師，2010，13（9）：1367-1368.

[2]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）[S].YBH21062005.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[S].二部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：225-226，765-768.

[4]王博，李洪起，徐芳，等.HPLC法測(cè)定鹽酸氨溴索注射液中有關(guān)物質(zhì)[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2012，27（3）：226-228.

[5]宋曉楠，王曉波，襲榮剛，等.高效液相色譜法測(cè)定人血漿中鹽酸氨溴索的濃度[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志，2012，30（1）：29-30.