朱風(fēng)華，陳 甫，劉文華，徐進(jìn)棟，朱連勤*

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東青島 266109；2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)與信息科學(xué)學(xué)院，山東青島 266109）

2016年山東省飼料原料及配合飼料霉菌毒素污染狀況調(diào)查

朱風(fēng)華1，陳 甫1，劉文華1，徐進(jìn)棟2，朱連勤1*

（1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東青島 266109；2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)與信息科學(xué)學(xué)院，山東青島 266109）

為了解山東省飼料原料及配合飼料中霉菌毒素含量及污染狀況，本研究隨機(jī)采集山東各地飼料原料373份，配合飼料92份，利用直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法分別測定黃曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）和嘔吐毒素（DON）含量。結(jié)果表明：飼料原料中AFB1污染率為33.51%，超標(biāo)率為14.40%；DON污染率為93.03%，超標(biāo)率為46.11%；ZEN污染率為58.45%，超標(biāo)率為20.64%。玉米及其副產(chǎn)物和次粉應(yīng)重點關(guān)注AFB1、ZEN和DON 3種毒素的污染，餅粕類飼料（花生餅粕除外）和米糠應(yīng)重點關(guān)注DON污染狀況，配合飼料應(yīng)關(guān)注鴨飼料中DON的污染，肉仔鴨及生長雞和產(chǎn)蛋雞的ZEN和AFB1污染。

飼料原料；配合飼料；黃曲霉毒素B1；玉米赤霉烯酮；嘔吐毒素；污染

霉菌污染尤其是產(chǎn)毒霉菌的污染是飼料及糧食安全生產(chǎn)需倍加關(guān)注的問題，據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織估算，全世界每年大約有5%～7%的糧食、飼料等農(nóng)作物產(chǎn)品受霉菌污染，所造成的經(jīng)濟(jì)損失可達(dá)數(shù)千億美元[1]。我國每年因霉菌污染造成的糧食損失高達(dá)2 100萬t，占全國糧食總產(chǎn)量的4.2%，是每年新增糧食產(chǎn)量的4倍多[2]。目前發(fā)現(xiàn)對糧食造成污染的霉菌有150多種。大多數(shù)霉菌繁殖最適宜的溫度是25～30℃，并產(chǎn)生次級代謝產(chǎn)物霉菌毒素[3]。已知的霉菌毒素有400多種，危害比較嚴(yán)重的有黃曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）和嘔吐毒素（DON）等，具有不同程度的急慢性毒性和致癌、致畸、致突變作用。謝文梅等[4]報道，2016年1—6月國內(nèi)飼料原料AFB1污染率為91.59%，超標(biāo)率為0.00%；DON污染率為100%，超標(biāo)率為48.28%； ZEN污染率為97.84%，超標(biāo)率為3.02%。王建林等[5]對2016年上半年我國原料及飼料中霉菌毒素污染情況調(diào)查表明，AFB1污染率為100%，超標(biāo)率為18.6%；DON污染率為95.8%，超標(biāo)率為5.1%；ZEN污染率為69.4%，超標(biāo)率為6.7%。由此可見，2016年飼料霉菌污染情況不容樂觀。由于各地氣候條件不盡一致，飼料原料毒素含量差異較大，為了確保飼料質(zhì)量安全，避免霉菌毒素污染飼料造成重大損失，本課題組對山東省飼料原料霉菌毒素污染情況進(jìn)行跟蹤調(diào)查，以期對畜牧業(yè)生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集與制備 本試驗所用樣品于2016年1—12月采集自山東省各地規(guī)模化動物養(yǎng)殖場、飼料廠，樣本總數(shù)量465份，其中原料373份：玉米187份、玉米副產(chǎn)物141份（DDGS 99份、玉米胚芽餅粕34份、玉米皮8份），餅粕類17份（豆粕7份、芝麻粕4份、其他粕類6份，不包括花生粕）、其他26份（大麥8份、米糠11份、次粉7份）；配合飼料92份（肉用仔雞9份、生長雞27份；蛋小雞4份、產(chǎn)蛋雞13份、肉用仔鴨19份、生長鴨7份、產(chǎn)蛋鴨13份）。

樣品采集方法按GB/T14699.1-2005進(jìn)行。樣品采集后，風(fēng)干飼料用四分法縮減取樣約200 g，粉碎過20目篩后，裝入自封袋貼好標(biāo)簽，置于-20℃冰箱備用。

1.2 檢測指標(biāo)與方法 利用直接競爭酶聯(lián)免疫吸附法采用AgraQuant?試劑盒提供的方法分別檢測飼料中AFB1、ZEN、DON含量，按照試劑盒中固體樣品前處理方法進(jìn)行樣品的萃取，保證樣品萃取液的pH在6～8，除了DDGS萃取液偏酸性，需用1mol的NaOH調(diào)至pH為7外，其他樣品均在要求范圍之內(nèi)。MK3酶標(biāo)儀為美國Thermo公司生產(chǎn)。

1.3 霉菌毒素的檢出限及回收率 3種霉菌毒素的檢出限及回收率見表1。

表1 3種霉菌毒素的檢出限及回收率

1.4 限量值和參考標(biāo)準(zhǔn) 飼料原料限量值和參考標(biāo)準(zhǔn)見表2。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SAS9.3軟件進(jìn)行統(tǒng)計，描述性統(tǒng)計量采用means過程，頻數(shù)統(tǒng)計采用freq過程。

2 結(jié)果與分析

2.1 全部被檢飼料原料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 被檢飼料原料霉菌毒素污染率為94.64%（353/373）。由表3可知，AFB1污染率為33.51%，DON污染率為93.03%，ZEN污染率為58.45%。DON、ZEN交叉污染率為57.65%（215/373）， DON、AFB1交叉污染率為32.44%（121/373），ZEN、AFB1交叉污染率為18.23%（68/373），DON、ZEN、AFB13種毒素交叉污染率為17.96%（67/373），DON、ZEN和AFB1超標(biāo)率分別為46.11%、20.64%、14.40%，污染狀況比2015年嚴(yán)重[6]。

2.2 玉米中霉菌毒素檢測結(jié)果 由表4可知，玉米中3種霉菌毒素污染以DON檢出率最高，為90.37%，ZEN為32.09%，AFB1為31.02%。玉米中DON最高含量為7 170 μg/kg，超出限量值6倍多，ZEN和AFB1的最高含量分別為1 326.30、136.10 μg/kg，分別是各自限量值的2.6倍和2.7倍。DON、ZEN、AFB13種毒素的中值分別為222.00、106.19、17.86 μg/kg，超標(biāo)率分別為15.39%、20.00%、25.86%。與2015年比，3種毒素的污染率高，超標(biāo)率低[6]。

2.3 玉米副產(chǎn)品中霉菌毒素檢測結(jié)果 由表5可知，各種玉米副產(chǎn)品DON污染較為嚴(yán)重，污染率均為100%，DON在 DDGS中最高含量15 063.26 μg/kg，是限量標(biāo)準(zhǔn)的15倍，中值高達(dá)2 010.00 μg/kg，超標(biāo)率為90.91%。DON在玉米胚芽餅粕中的最高含量和中值分別為12 277.84、3 240.00 μg/kg，是限量標(biāo)準(zhǔn)的12.28和3.24倍，超標(biāo)率為85.29%。DON在玉米皮中的中值為2 134.42 μg/kg，最高含量高達(dá)7 030.00 μg/kg，超標(biāo)率為62.50%。DON污染狀況比2015年嚴(yán)重[6]。

表2 飼料原料限量值和參考標(biāo)準(zhǔn)

表3 所有飼料原料中霉菌毒素檢測結(jié)果

ZEN在DDGS、玉米胚芽餅粕和玉米皮中檢出率分別為95.96%、97.06%和78.50%，最高含量分別為1 387.93、1 646.03、835.26 μg/kg，均超過限量標(biāo)準(zhǔn)，中值除了玉米胚芽餅粕（652.69 μg/kg）超過限量標(biāo)準(zhǔn)外，其余均在限量標(biāo)準(zhǔn)以下，超標(biāo)率分別為9.74%、21.64%、28.57%。ZEN污染程度明顯低于2015年[6]。

AFB1污染率較高的是玉米胚芽餅粕和玉米皮，檢出率分別為73.53%、62.50%，最高含量分別為50.35、38.43 μg/kg，中值分別為7.82、4.68 μg/kg，超標(biāo)率分別為4.00%、0.00%。其次是DDGS，檢出率為26.26%，最高含量為71.06 μg/kg，中值為4.27 μg/kg，超標(biāo)率7.69%。AFB1污染程度重于2015年[6]。

表4 玉米中霉菌毒素檢測結(jié)果

表5 玉米副產(chǎn)品中霉菌毒素檢測結(jié)果

表6 餅粕類霉菌毒素檢測結(jié)果

2.4 餅粕類霉菌毒素的檢測結(jié)果 由表6可知，在餅粕類中DON檢出率為88.24%，其中最高含量為1 356.04 μg/kg，中值為533.08 μg/kg，超標(biāo)率為40.00%。餅粕類ZEN和AFB1檢出率分別為64.71%和47.06%，最高含量分別為154.62、5.30 μg/kg，均在限量標(biāo)準(zhǔn)之內(nèi)。由此可見，餅粕類受DON污染較為嚴(yán)重。

2.5 其他飼料原料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 由表7可知，其他原料中DON污染率較高的是次粉（100.00%）和米糠(90.91%)，其次是大麥（37.50%），最高含量分別為1 447.61、2 680.00、559.40 μg/kg，超標(biāo)率分別為28.57%、10.00%、0.00%。

ZEN污染率較高的是米糠，檢出率為72.73%，最高含量為188.94 μg/kg，未超標(biāo)。次粉和大麥ZEN檢出率分別為28.57%、12.50%，最高含量為1 274.74、88.89 μg/kg，次粉的中值為744.00 μg/kg，超標(biāo)率為50.00%，大麥未超標(biāo)。

AFB1污染率較輕，次粉檢出率為14.29%，僅檢出1份，含量為3.84 μg/kg，米糠檢出率為9.09%，僅檢出1份，含量為4.86 μg/kg，均不超標(biāo)。大麥中未檢出。

2.6 配合飼料中霉菌毒素的檢測結(jié)果 配合飼料中DON污染最為嚴(yán)重，除了生長鴨和產(chǎn)蛋鴨檢出率為95.00%外，其余均為100%。鴨飼料DON超標(biāo)率為5.26%，其中，肉用仔鴨、生長及產(chǎn)蛋鴨配合飼料中DON最高含量分別為6 210.00、6 390.00 μg/kg，中值分別為1 838.48、826.30 μg/kg。雞飼料DON最高含量為1 887.49 μg/kg，不超標(biāo)。

表7 其他原料中霉菌毒素檢測結(jié)果

表8 配合飼料中霉菌毒素檢測結(jié)果

配合飼料中ZEN污染較為嚴(yán)重，小雞、生長鴨和產(chǎn)蛋鴨配合飼料中ZEN檢出率均為100.00%、肉用仔鴨為94.74%、生長雞和產(chǎn)蛋雞為85.00%。生長和產(chǎn)蛋雞配合飼料中ZEN最高含量為989.90 μg/kg，小雞配合飼料為788.24 μg/kg、肉用仔鴨配合飼料為547.59 μg/kg、生長鴨和產(chǎn)蛋鴨配合飼料為479.40 μg/kg。小雞配合飼料超標(biāo)率為30.77%，生長雞和產(chǎn)蛋雞配合飼料為8.82%、肉用仔鴨配合飼料為5.56%，生長鴨和產(chǎn)蛋鴨配合飼料為0.00%。

配合飼料中AFB1的檢出率為45.65%，最高含量為69.49 μg/kg，超標(biāo)率為16.47%。檢出率由高至低分別是肉用仔鴨（68.72%）、生長和產(chǎn)蛋雞(45.00%)、生長和產(chǎn)蛋鴨（40.00%）、小雞（23.08%）配合飼料。生長雞和產(chǎn)蛋雞、肉用仔鴨配合飼料最高含量分別為69.49、24.75 μg/kg，中值分別為4.08、3.53 μg/kg，超標(biāo)率分別為22.22%和15.38%。生長鴨和產(chǎn)蛋鴨、小雞配合飼料AFB1最高含量分別為13.38、4.92 μg/kg，均不超標(biāo)（表8）。

3 討 論

本調(diào)查結(jié)果顯示，2016年山東省飼料原料中DON、ZEN、AFB13種霉菌毒素的污染率顯著高于2015年[6]。微生物廣泛存在于自然界，霉菌寄生于土壤和作物上，在作物的生長過程中遇到合適的條件勢必會生長和繁殖，產(chǎn)生毒素。山東屬于暖溫帶半濕潤季風(fēng)型氣候區(qū)，降雨集中在每年的6—8月，2016年平均氣溫為26.10℃，較常年高0.70℃，降水量為441.60 mm，較常年多10.30%，因此造成2016年的玉米中3種毒素污染率高于2015年，突出表現(xiàn)在AFB1和ZEN污染程度加重，而DON污染程度較輕，但這3種毒素污染程度均高于全國2016年上半年的水平[4-5]，因此由玉米加工而成的玉米副產(chǎn)物污染狀況重于2015年。霉菌毒素污染狀況較為穩(wěn)定的是大麥，雖然DON污染率略有提高，但3種毒素同2015年一樣都不超標(biāo)。與2015年比，米糠DON的污染率略有提高，但污染程度有所降低，其他2種毒素皆在限量標(biāo)準(zhǔn)之內(nèi)。由于飼料原料霉菌毒素污染率提高而加重了配合飼料污染率，突出表現(xiàn)在ZEN和DON的污染范圍在85.00%～100.00%。鴨飼料DON超標(biāo)率為5.26%；雞飼料無DON超標(biāo)現(xiàn)象。ZEN污染程度較重，小雞、生長雞及產(chǎn)蛋雞、肉用仔鴨配合飼料中ZEN超標(biāo)率分別為30.77%、8.82%和5.56%。AFB1在生長雞和產(chǎn)蛋雞配合飼料中污染率和超標(biāo)率較高（22.22%），其次是肉用仔鴨配合飼料（15.38%）。由于飼料中AFB1理化性質(zhì)較為穩(wěn)定，可在-40～268℃穩(wěn)定存在[7]，并且可殘留在動物體內(nèi)影響人畜健康，建議飼料中添加脫霉劑。

4 結(jié) 論

經(jīng)調(diào)研檢測發(fā)現(xiàn)，在飼料原料中，AFB1污染率為33.51%，超標(biāo)率為14.40%；DON污染率為93.03%，超標(biāo)率為46.11%；ZEN污染率為58.45%，超標(biāo)率為20.64%。玉米及其副產(chǎn)物和次粉應(yīng)重點關(guān)注3種毒素的污染，餅粕類飼料（花生餅粕除外）和米糠應(yīng)重點關(guān)注DON污染狀況；在配合飼料中，鴨飼料的DON超標(biāo)率為5.26%，小雞配合料中ZEN超標(biāo)率為30.77%，生長雞和產(chǎn)蛋雞配合料中ZEN和AFB1的超標(biāo)率分別為8.82%、22.22%，在肉用仔鴨配合料中ZEN和AFB1的超標(biāo)率分別為5.56%、15.38%。

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S816

A

10.19556/j.0258-7033.2017-06-159

2017-03-15；

2017-04-07

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系家禽產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(SDAIT-11-07 )

朱風(fēng)華（1966-），女，山東萊州人，高級實驗師，碩士，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)，E-mail: zhufenghua10 29@126.com

* 通訊作者：朱連勤，男，教授，研究方向為動物營養(yǎng)代謝病與中毒病，E-mail: lqzhu@qau.edu.cn