卡麗比努爾·艾依提

艾山江1，2

努爾古麗·熱合曼1，2

(1. 新疆師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830054；2. 新疆特殊環(huán)境物種保護(hù)與調(diào)控生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，新疆 烏魯木齊 830054)

4組沙漠綠藻分子生物學(xué)鑒定及其生物學(xué)特性研究

卡麗比努爾·艾依提1，2

艾山江1，2

努爾古麗·熱合曼1，2

(1. 新疆師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830054；2. 新疆特殊環(huán)境物種保護(hù)與調(diào)控生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，新疆 烏魯木齊 830054)

對(duì)從塔克拉瑪干沙漠中分離的4組沙漠綠藻進(jìn)行形態(tài)特征鑒定，繪制生長(zhǎng)曲線，考察pH對(duì)其生長(zhǎng)的影響，并進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析。形態(tài)特征結(jié)果顯示a組為橢圓形藻，b、c和d組為球狀藻。a組沙漠藻最適pH值為6.0，c組的最適pH值以原BG-11培養(yǎng)基為準(zhǔn)，b和d組最適pH值為8.0。采用分子生物學(xué)18S rDNA序列分析法鑒定出代表性4株沙漠藻的基因序列，結(jié)果表明：a組的3YS16①和c組3YS21-1的序列跟Chlamydomonasincerta親緣關(guān)系很近;b組的 KXII(2)序列跟Chlorosarcinopsisbastropiensis親緣關(guān)系很近;d組的YS2-3的序列跟Chlorosarcinopsiscommunis親緣關(guān)系很近。該研究確定了4組藻的分類地位和最佳生長(zhǎng)pH條件,可為沙漠綠藻分子生物學(xué)和食品應(yīng)用方面的研究提供理論依據(jù)。

沙漠綠藻；18S rDNA；形態(tài)特性

新疆塔克拉瑪干沙漠作為典型的內(nèi)陸干旱地區(qū)沙漠，是中國(guó)最大的沙漠，也是世界第二大流動(dòng)沙漠[1]。藻類在世界荒漠地區(qū)廣泛分布，是荒漠、半荒漠系統(tǒng)的生物結(jié)皮先行者[2]。生物結(jié)皮主要包括藍(lán)藻、綠藻、衣藻、苔蘚及微小節(jié)肢動(dòng)物等[3-4]。結(jié)皮在沙漠中對(duì)固定土壤和養(yǎng)分循環(huán)發(fā)揮著重要的作用，也是固沙的首要標(biāo)志[5]。沙漠綠藻通過光合作用為土壤提供碳源和有機(jī)質(zhì)[6]，還隨著藻細(xì)胞數(shù)量的增加，藻結(jié)皮轉(zhuǎn)化為地衣結(jié)皮。張建成[7]、李芳芳[8]等通過藻細(xì)胞形態(tài)觀察和分子生物學(xué)等方法對(duì)古爾班通古特沙漠結(jié)皮藻類進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)沙漠中有小球藻、衣藻、克里藻等藻種。目前關(guān)于塔克拉瑪干沙漠結(jié)皮藻類的研究較少，依里夏提等[5]對(duì)塔克拉瑪干沙漠藻進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定，發(fā)現(xiàn)沙漠中存在衣藻、絲狀藻、綠藻等藻種。

綠藻除對(duì)生物結(jié)皮有重要的作用以外，還因富含生長(zhǎng)因子(CGF)、堿性多糖、不飽和脂肪酸、膳食纖維等成分得到了廣泛關(guān)注。隨著人們對(duì)高品質(zhì)生活及對(duì)綠色健康食品的追求，藻類保健也逐漸得到開發(fā)[9]。綠藻含有多種維生素、胡蘿卜素、煙堿酸、泛酸、葉酸、葉綠素(約3%)、蛋白質(zhì)(約60%)、纖維等，是維持健康和養(yǎng)顏相當(dāng)理想的健康食品，被稱為“21世紀(jì)最佳食品”[10]。

目前關(guān)于藻類研究主要集中于海洋藻和淡水藻[11-13]，塔克拉瑪干沙漠藻類的研究和其食品應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道尚未見。本研究運(yùn)用形態(tài)學(xué)觀察、分子鑒定，研究其生物學(xué)特性及沙漠藻生長(zhǎng)最適pH，為塔克拉瑪干沙漠藻類在分子生物學(xué)和后續(xù)藻類保健品應(yīng)用方面提供基礎(chǔ)性理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 土壤樣品

從新疆塔克拉瑪干沙漠采集，提供單位：新疆葉希麗生物科技有限公司。

1.2 培養(yǎng)基

藻種用的BG-11培養(yǎng)基：K2HPO4· 3H2O 0.04 g/L，NaNO31.5 g/L，MgSO4· 7 H2O 0.075 g/L，檸檬酸鐵銨 0.006 g/L，CaCl2· 2 H2O 0.036 g/L，檸檬酸0.006 g/L，EDTANa20.001 g/L，Na2CO30.02 g/L，H3BO32.86 g/L，MnCl4· 4H2O 1.81 g/L，ZnSO4·7H2O 0.222 g/L，Na2MoO4·2H2O 0.39 g/L，CuSO4·5H2O 0.079 g/L，Co(NO3)2·6H2O 0.049 g/L。

1.3 主要儀器

超凈工作臺(tái)：Boxun SW-CJ-2FD型，昆山廣測(cè)儀器設(shè)備有限公司；

成像儀：ChampGel6000型，北京賽智創(chuàng)業(yè)科技有限公司；

PCR儀：PEQSTAR型，德國(guó)Peqlab公司；

臺(tái)式冷凍離心機(jī)：SIGMA 3K30型，德國(guó)Sigma公司；

制冰機(jī)：SIM-F140AY65-PC型，日本上海公司；

紫外/可見分光光度計(jì)：4802UV/VIS型，上海龍尼柯儀器有限公司；

智能人工氣候箱：RTOP-260Y型，浙江托普儀器有限公色；

pH計(jì)：pH-220型，廈門國(guó)島科技有限公司。

1.4 方法

1.4.1 藻種的培養(yǎng)與分離 稱取30 g沙樣置于盛有100 mL BG-11培養(yǎng)基的三角瓶中靜置培養(yǎng)，溫度30 ℃，光照強(qiáng)度 2 500 Lx，光暗比為14∶10。光照培養(yǎng)設(shè)置為兩個(gè)工作段：6:00～20:00，光強(qiáng) 2 500 Lx；20:00～6:00，光強(qiáng) 0 Lx，培養(yǎng)2周后，采用稀釋涂布法進(jìn)行純化，定期觀察藻液，并用光學(xué)顯微鏡拍照記錄。

1.4.2 光學(xué)顯微鏡觀察 處于生長(zhǎng)周期的藻細(xì)胞，用倒置顯微鏡觀察并拍照。

1.4.3 掃描電鏡觀察 采用Hohn等[14]的方法，收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的藻細(xì)胞，用10 000 r/min離心10 min，棄上清液，加入PBS緩沖液清洗2遍，4%的戊二醛固定，依次用50%，70%，80%，90%，100%叔丁醇逐級(jí)脫水，采用冷凍干燥儀干燥5 min，真空噴金，掃描電鏡下拍照觀察。

1.4.4 藻株生長(zhǎng)曲線的繪制 取5 mL處于指數(shù)生長(zhǎng)期的藻液，置于盛有200 mL滅菌BG-11培養(yǎng)基的三角瓶中，在溫度為30 ℃，光照強(qiáng)度 2 500 Lx，光暗比為14∶10，光照培養(yǎng)設(shè)置為兩個(gè)工作段：6:00～20:00，光強(qiáng) 2 500 Lx；20:00～6:00，光強(qiáng) 0 Lx，培養(yǎng)1個(gè)月，做3個(gè)重復(fù)，且每2 d于680 nm[15]下測(cè)定吸光度。

1.4.5 pH對(duì)沙漠藻生長(zhǎng)的影響 取5 mL處于指數(shù)生長(zhǎng)期的藻液，加入pH值為 6.0，7.0，8.0(用0.1 mol/L HCl 和0.1 mol/L NaOH 調(diào)節(jié))的BG-11液體培養(yǎng)基中，原培養(yǎng)基(pH為自然)為對(duì)照組，培養(yǎng)2周，做3個(gè)重復(fù)，且每24 h于680 nm下測(cè)定吸光度值。每天早晚將培養(yǎng)瓶振動(dòng)一次，防止藻細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。

1.4.6 基因組DNA的提取 用天根植物基因組DNA提取試劑盒提取DNA。

1.4.7 PCR擴(kuò)增 用于真核綠藻18SrRNA基因的上游引物MA1(5`-CGGGATCCGTAGTCATATGCTTGTCTC-3`)和下游引物MA2(5`-CGGAATTCCTTCTGCAGGTTCACC-3`)[16]，由上海生工生物技術(shù)有限公司進(jìn)行合成；PCR反應(yīng)體系為25 μL，dd H2O 8.5 μL，上下引物各0.5 μL，DNA模板3 μL，2×TAP PCR Master Mix (TIANGEN) 12.5 μL。PCR反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性5 min；95 ℃變性1 min，56 ℃退火1 min，72 ℃延伸2 min，30個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。PCR產(chǎn)物經(jīng)1%(1×TAE)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后，觀察并成像[17]。擴(kuò)增產(chǎn)物由上海生工生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。

1.4.8 系統(tǒng)發(fā)育樹分析 測(cè)序結(jié)果與NCBI已知的數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比較，并用Genetyx軟件進(jìn)行多重序列對(duì)齊排列比較，通過MEGA 7.0軟件鄰接(NJ)法繪制系統(tǒng)發(fā)育樹，基于Kimura2-Prameter方法計(jì)算遺傳距離值，計(jì)算Bootstrap值，重復(fù)1 000次[18]。

2 結(jié)果與分析

2.1 4組沙漠藻的光學(xué)顯微鏡觀察結(jié)果

按顏色、形狀、大小將分離純化的藻類分為a、b、c、d 4個(gè)組，其形態(tài)結(jié)構(gòu)見圖1。其中a組的細(xì)胞形態(tài)為綠色、黏稠、油性、細(xì)胞呈橢圓形、細(xì)胞比較??；b組的黃色、干燥、難挑取、細(xì)胞呈球狀、細(xì)胞偏大；c組的綠色，油性，細(xì)胞形態(tài)為球狀；d組的偏黃色、干燥、難挑取、細(xì)胞接近球狀。

2.2 4組沙漠藻的掃描電鏡觀察

由圖2可知，a和c組是正處于分裂期的藻細(xì)胞，a組為橢圓形藻；b組為球狀藻，表面光滑；c組為球狀藻，表面粗糙；d組的形狀接近球狀。

通過光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡觀察結(jié)果表明4組沙漠藻的形態(tài)結(jié)構(gòu)與李芳芳等[19]和龔春霞等[20]從古爾班通古特沙漠和塔克拉瑪干沙漠分離純化和分子鑒定的藻種形態(tài)不一致，說明因地理位置的差異也能導(dǎo)致藻類形態(tài)的多樣性。對(duì)比徐娜等[21]分離純化的海洋微藻有很大的區(qū)別，應(yīng)該是新疆塔克拉瑪干沙漠氣候干旱、降水量少、溫度高、蒸發(fā)量高等原因形成的特殊形態(tài)結(jié)構(gòu)。

圖1 4組沙漠藻細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡觀察照片

Figure 1 Morphological observations of four groups Desert algae cells under optical microscope (×40)

圖2 4組沙漠藻細(xì)胞的掃描電鏡照片

Figure 2 Morphological observations of four groups Desert algae cells under electron microscope

2.3 4組沙漠藻的生長(zhǎng)曲線

在培養(yǎng)初期藻體數(shù)量隨時(shí)間變化不大；進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后，生長(zhǎng)速率迅速增加[22]，藻液也由淺綠色變?yōu)榘稻G色；進(jìn)入衰亡期后，藻體逐漸死亡并下沉，藻液顏色開始變黃，最后至無色、腐爛。

由圖3可知，a組藻類的適應(yīng)期較短，第3天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，第25天進(jìn)入穩(wěn)定期；b組前3 d是適應(yīng)期，第4天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，第21天進(jìn)入穩(wěn)定期；c組的適應(yīng)期也短，第3天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，第23天進(jìn)入穩(wěn)定期；d組的適應(yīng)期最短，第2天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，第25天進(jìn)入穩(wěn)定期。比較4組藻的生長(zhǎng)情況均表現(xiàn)出較長(zhǎng)的生長(zhǎng)周期，1個(gè)月內(nèi)均沒有進(jìn)入衰亡期，a和c組生長(zhǎng)最好，b組生長(zhǎng)不好；d組的適應(yīng)期最短，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期最長(zhǎng)。

通過生長(zhǎng)曲線結(jié)果可知，4組沙漠藻培養(yǎng)期間表現(xiàn)出對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期長(zhǎng)，不易發(fā)生腐爛等特性，因此藻種在塔克拉瑪干沙漠長(zhǎng)期得以生存下來。

2.4 pH對(duì)4組沙漠藻生長(zhǎng)的影響

由圖4可知，a組藻類前8 d在pH 8.0的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較好，從第9天開始pH 6.0和pH 7.0的生長(zhǎng)明顯優(yōu)于對(duì)照組，14 d開始pH 6.0的生長(zhǎng)占優(yōu)勢(shì)，表明沙漠藻a組的適應(yīng)pH為6.0～7.0。比較生長(zhǎng)速率表明pH 6.0>對(duì)照組>pH 7.0>pH 8.0，得出a組藻類最適生長(zhǎng)pH為6.0，說明a組沙漠藻適合生長(zhǎng)在酸性環(huán)境。

圖3 4組沙漠藻的生長(zhǎng)曲線Figure 3 Growth curve of four groups Desert algae

圖4 pH對(duì)a組沙漠藻生長(zhǎng)的影響Figure 4 Effects of pH on the growth of group a

由圖5可知，前9 d藻細(xì)胞在3種培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)與對(duì)照組沒有明顯的差異，但從第10天開始藻在pH值為8.0培養(yǎng)基上生長(zhǎng)速度大于其它pH水平。比較生長(zhǎng)速率表明pH 8.0>pH 6.0>對(duì)照組>pH 7.0，可知b組藻類最適生長(zhǎng)pH為8.0，說明b組沙漠藻適合生長(zhǎng)在堿性環(huán)境。

圖5 pH對(duì)b組沙漠藻生長(zhǎng)的影響Figure 5 Effects of pH on the growth of group b

由圖6可知，第10天pH 7.0和pH 8.0的藻細(xì)胞的生長(zhǎng)與對(duì)照組接近；第12天后pH 8.0的生長(zhǎng)開始變緩，pH 6.0和pH 7.0的生長(zhǎng)開始增長(zhǎng)但生長(zhǎng)速率小于對(duì)照組。比較生長(zhǎng)速率表明對(duì)照組>pH 6.0>pH 7.0>pH 8.0，可知c組藻類最適生長(zhǎng)pH為原培養(yǎng)基(pH 為自然)，說明c組沙漠藻適合生長(zhǎng)在酸性環(huán)境。

由圖7可知，第6天藻細(xì)胞在3種pH值的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況沒有明顯的差異，第8天開始pH 8.0和pH 6.0培養(yǎng)基的生長(zhǎng)明顯增長(zhǎng)，但藻細(xì)胞在pH 6.0培養(yǎng)基的生長(zhǎng)小于pH 8.0，比較生長(zhǎng)速率表明pH 8.0>pH 6.0>對(duì)照組>pH 7.0，可知d組沙漠藻類最適生長(zhǎng)pH為8.0，說明d組沙漠藻適合堿性環(huán)境。

圖6 pH對(duì)c組沙漠藻生長(zhǎng)的影響Figure 6 Effects of pH on the growth of group c

圖7 pH對(duì)d組沙漠藻生長(zhǎng)的影響Figure 7 Effects of pH on the growth of group d

培養(yǎng)基的 pH是直接影響藻類生長(zhǎng)代謝等許多生理過程的重要因子，會(huì)影響藻類光合作用和呼吸作用，并影響培養(yǎng)基中藻細(xì)胞對(duì)離子的吸收和利用以及對(duì)代謝產(chǎn)物的利用[23]，每一種藻類都有它自身適合的pH范圍，改變pH值會(huì)影響藻類的生長(zhǎng)和光合作用[24]，沙漠藻a和c組在pH 5.0～6.0條件下生長(zhǎng)最好，說明具有較好耐酸能力。b和d組在pH 8.0環(huán)境下生長(zhǎng)最好，具有耐堿能力，可能是與培養(yǎng)液中鹽類有關(guān)，這些鹽類能使沙漠藻生長(zhǎng)所需的pH 環(huán)境維持時(shí)間延長(zhǎng)，利于細(xì)胞維持較好的分裂速度。袁麗娜等[25]研究表明：低pH值不利于藻生長(zhǎng)，而在一定范圍內(nèi)，較高的pH值仍能促進(jìn)藻細(xì)胞增殖；趙娜等[26-27]研究結(jié)果表明：小球藻的最適生長(zhǎng)pH 為7.0，而斜生柵藻的最適生長(zhǎng)pH值為 9.0。可知藻類生長(zhǎng)環(huán)境酸性或堿性太強(qiáng)都會(huì)對(duì)藻細(xì)胞生長(zhǎng)有傷害，只有在適宜的酸堿度范圍內(nèi)，才能正常生長(zhǎng)繁殖。

2.5 4株沙漠藻的18S rDNA序列分析

對(duì)具代表性的4株沙漠藻3YS16①(a組)、KXII(2)(b組)、3YS21-1(c組)和YS2-3(d組)進(jìn)行18S rDNA序列分析，擴(kuò)增出長(zhǎng)度分別為1 726，1 712，1 708，1 723 bp(圖8)的基因片段。

1. 3YS16①(a組) 2. KXII(2)(b組) 3. 3YS21-1(c組) 4. YS2-3(d組)

圖8 4株代表性沙漠藻的18S rDNA PCR電泳圖

Figure 8 Electrophoresis of PCR products 18S rDNA four Representative strains of Desert algae

NCBI中BLAST結(jié)果表明，3YS16①和3YS21-1的序列與GenBank上的Chlamydomonasincerta(KR349061.1)的同源性高，相似率達(dá)99%，比對(duì)序列中有2個(gè)堿基不同。由圖9可以看出3YS16①和3YS21-1跟衣藻屬聚簇成一支，跟Chlamydomonasincerta(KR349061.1)的節(jié)點(diǎn)支持率為95，遺傳距離值為0.00，說明3YS16①和3YS21-1與Chlamydomonasincerta(KR349061.1)親緣關(guān)系很近。擴(kuò)增得到的YS2-3的序列與GenBank上的Chlorosarcinopsiscommunis(AB218705.1)同源性高，相似率為97%，比對(duì)序列中有50個(gè)堿基不同，YS2-3與Chlorosarcinopsis聚簇成一支，與Chlorosarcinopsiscommunis(AB218705.1)的節(jié)點(diǎn)支持率為100，遺傳距離為0.00，說明YS2-3與Chlorosarcinopsiscommunis(AB218705.1)的親緣關(guān)系很近。擴(kuò)增得到的KXII(2)的序列與GenBank上屬于綠囊藻目的Chlorosarcinopsisbastropiensis(AB218703.1)同源性高，相似率達(dá)99%，比對(duì)序列中有14個(gè)堿基不同，KXII(2)與Chlorosarcinopsis聚簇成一支，與Chlorosarcinopsisbastropiensis(AB218703.1)的節(jié)點(diǎn)支持率為100，遺傳距離值為0.00，說明親緣關(guān)系很近，沙漠藻KXII(2)屬于Chlorosarcinopsisbastropiensis。

圖9 4株代表性沙漠綠藻的18S rDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Figure 9 Phylogenetic Tree based on 18S rDNA Sequencing of Four Representative Desert Algae

鑒定藻的傳統(tǒng)方法是通過觀察藻細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行鑒定，但由于藻類的生長(zhǎng)范圍廣，且生活史復(fù)雜導(dǎo)致相同的藻細(xì)胞形態(tài)不一樣，所以鑒定誤差較大?；?18S rRNA基因序列進(jìn)行藻類鑒定已經(jīng)有廣泛的報(bào)道[28-31]。李芳芳[17]、龔春霞[19]等應(yīng)用18S rRNA基因分子鑒定和形態(tài)學(xué)結(jié)合進(jìn)行鑒定。研究結(jié)果表明：a組的3YS16①和c組的3YS21-1屬于衣藻。這個(gè)跟龔春霞等[32]從塔克拉瑪干沙漠分離鑒定出來的結(jié)果一致。b組的KXII(2)和d組的YS2-3屬于綠囊藻目的Chlorosarcinopsisbastropiensis和Chlorosarcinopsiscommunis。本試驗(yàn)結(jié)果與Lewis等[33]報(bào)道沙漠中的綠藻主要包含3大類群，綠藻綱、共球藻綱和輪藻綱吻合。

3 結(jié)論

目前中國(guó)對(duì)沙漠藻類的研究，主要以形態(tài)觀察為主，此方法需要豐富的分類經(jīng)驗(yàn)，對(duì)有些形態(tài)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、外部形態(tài)特征不明顯的種類鑒定困難。本試驗(yàn)利用分子生物學(xué)鑒定及生物學(xué)特性研究4組沙漠綠藻。結(jié)果表明，4組沙漠藻屬于衣藻和綠囊藻，具有較好的耐酸、耐堿、耐高溫、生長(zhǎng)周期長(zhǎng)且不容易腐爛等生物學(xué)特性。這些生物學(xué)特性將賜予這些藻類在沙漠干旱環(huán)境中能生存的能力。為了將沙漠藻應(yīng)用于生物結(jié)皮和食品方面，其光強(qiáng)度和溫度對(duì)藻類生長(zhǎng)的影響和藻類食品安全方面需要進(jìn)一步研究。

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Morphological and molecular identification of four groups desert green algae

QELBINUREyit1,2

AISHANJIANG1,2

NURGULRahman1,2

(1.SchoolofLifeScience,XinjiangNormalUniversity,Urumqi,Xinjiang830054,China;2.XinjiangKeyLaboratoryofSpecialSpeciesConservationandRegulatoryBiology,Urumqi,Xinjiang830054,China)

Four groups of algas, isolated from the Taklimakan desert, were identified by morphological characters in this study. The pH effect of the growth of algae is analyzed according to the growth curve, and the phylogenetic tree was pictured. It shows that the group a belongs to the oval algae, and group b, c and d belong to the spherical algae. The optimum suitable pH values for the group a desert algae was 6.0, 8.0 for the group b and d; the same value of original BG-11 for the group c. Four representative strains of desert algae gene sequences were identified by using the 18S rDNA sequence analysis method. It shows that the strain of 3YS16① (group a) and the strain of 3YS21-1 (group c) have close genetic relationship with theChlamydomonasincerta; the strain of KXII(2) (group b) has close genetic relationship with theChlorosarcinopsisbastropiensi; the Strain of YS2-3 (group d) has close genetic relationship withChlorosarcinopsiscommunis. This study determined the classification status of four groups of algae and the optimal pH growth conditions, and provided theoretical basis to the molecular biology studies of desert algae and applications in food industry.

Desert algae; 18S rDNA; Morphological Characteristics

國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào)：31460448，31160333)

卡麗比努爾·艾依提，女，新疆師范大學(xué)在讀碩士研究生。

努爾古麗·熱合曼(1972—)，女，新疆師范大學(xué)副教授，博士。E-mail：nurgulum@163.com

2017—04—03

10.13652/j.issn.1003-5788.2017.05.005