劉萍 周淑美 江蘇省揚(yáng)州市口腔醫(yī)院 （江蘇 揚(yáng)州 225002）

血細(xì)胞形態(tài)學(xué)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的建立與應(yīng)用

劉萍 周淑美 江蘇省揚(yáng)州市口腔醫(yī)院 （江蘇 揚(yáng)州 225002）

目的：探討臨床樣本檢驗(yàn)過程中血細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡檢標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)立。方法：對(duì)本院2016年經(jīng)血液分析儀檢測(cè)中存在問題的臨床標(biāo)本進(jìn)行涂片鏡檢后原因統(tǒng)計(jì)和分析。結(jié)果：白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)異常的占42.5%，血紅蛋白＜70g/L的占15.3%，血小板異常的占7.7%等。結(jié)論：當(dāng)血液分析儀檢測(cè)結(jié)果白細(xì)胞總數(shù)高于20×109/L或低于4×109/L、血紅蛋白＜70g/L、血小板＞600×9/L或＜80×109/L時(shí)必須及時(shí)鏡檢，這樣才會(huì)使儀器檢測(cè)與傳統(tǒng)鏡檢完美結(jié)合，提高臨床應(yīng)用價(jià)值。

血細(xì)胞分析 復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)

隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的深入研究和高新技術(shù)的應(yīng)用，血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)水平進(jìn)入了新的階段，新的檢驗(yàn)參數(shù)為臨床提供了更多的診斷指標(biāo)，促進(jìn)了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展[1]，實(shí)現(xiàn)了真正意義上的全自動(dòng)分析。

中華檢驗(yàn)學(xué)會(huì)制訂復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的原則，在保證篩選質(zhì)量的基礎(chǔ)上，盡量使復(fù)檢率降低[2]，本研究對(duì)本院經(jīng)血液分析儀檢測(cè)的大批量臨床檢驗(yàn)標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、篩查分析，探討臨床樣本檢驗(yàn)過程中血細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡檢標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)立，找到儀器高效性與鏡檢準(zhǔn)確性的最佳結(jié)合點(diǎn)；通過儀器檢驗(yàn)與鏡檢的比對(duì)，提高幼稚細(xì)胞、有核紅細(xì)胞等異常細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢出率，增強(qiáng)臨床應(yīng)用價(jià)值。

1.材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本。2013年1月～2016年12月經(jīng)血液分析儀檢測(cè)的10950次門診和住院患者，其中男5823人次，女5127人次。

1.1.2 儀器和試劑。光電MEK-7300P血細(xì)胞分析儀及其原裝配套試劑，奧林巴斯CX21顯微鏡。

1.2 方法

鏡檢時(shí)血涂片制備[3]采用手工推片法，盡量使用新鮮血液，若無新鮮血液則用混勻的抗凝血。在清潔干燥無塵無油脂的載玻片進(jìn)1/3處，加一滴新鮮血液，用推片以30～45度角推出數(shù)張厚薄適宜，頭尾明顯，細(xì)胞分布均勻的合格涂片。采用瑞氏吉姆薩復(fù)合染色法后用普通光學(xué)顯微鏡人工分類200個(gè)有核細(xì)胞，并計(jì)算各類有核細(xì)胞所占百分率。相關(guān)操作參考《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行。

2.結(jié)果

對(duì)2016年日本光電MEK-7300P血液分析儀檢測(cè)的10950份臨床標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，其中儀器結(jié)果正常不需要復(fù)檢的標(biāo)本數(shù)量為8160份，占檢測(cè)總數(shù)的74.4%，存在相關(guān)問題需要鏡檢標(biāo)本為2790份，鏡檢率為25.5%。

2.1 根據(jù)國(guó)際血涂片復(fù)審準(zhǔn)則[4-6]制定適合本院的鏡檢復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)，見表1。

2.2 血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果異常需顯微鏡人工復(fù)檢標(biāo)本的組成與例數(shù)，見表2。

2.3 經(jīng)顯微鏡鏡檢后存在的細(xì)胞學(xué)形態(tài)改變參考相關(guān)陽(yáng)性圖片判斷標(biāo)準(zhǔn)[7]?？煞譃橐韵聨追N：

2.3.1 白細(xì)胞異常：細(xì)胞數(shù)量和比例改變，常見的包括中毒顆粒、空泡變性粒細(xì)胞可提示感染，見到原始細(xì)胞、及各幼稚階段細(xì)胞均提示白血病等惡性系統(tǒng)血液病。

2.3.2 紅細(xì)胞異常：成熟紅細(xì)胞明顯大小不一中央蒼白區(qū)擴(kuò)大，提示缺鐵性貧血，可反過來對(duì)比儀器細(xì)胞直方圖分布，并檢查其與血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性。

2.3.3 血小板異常：數(shù)量過多或過少均有臨床意義。對(duì)于儀器檢測(cè)血小板數(shù)量過少的標(biāo)本，有部分病例在血片鏡檢中可見到5～7個(gè)血小板成簇可見的情況，若血片見到成簇血小板提示其數(shù)量不少，可能儀器在檢測(cè)體積偏小的血小板時(shí)由于光電的敏感性而導(dǎo)致遺漏。

3.討論

3.1 血細(xì)胞鏡檢標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)立

在2790份臨床標(biāo)本中，由于白細(xì)胞總數(shù)及分類異常復(fù)檢的標(biāo)本量最多，占總復(fù)查樣本例數(shù)的47%。在出現(xiàn)報(bào)警中的白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比、幼稚粒細(xì)胞百分比、幼稚粒細(xì)胞的患者中，白細(xì)胞顯著增高，未分類等[8]。我們?cè)O(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)為白細(xì)胞總數(shù)＞20×109/L，白細(xì)胞總數(shù)＜4×109/L，當(dāng)儀器顯示白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)無分類結(jié)果或伴有異常提示時(shí)，即使是白細(xì)胞數(shù)量在正常參考范圍內(nèi)，也是強(qiáng)制鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)之一。

血紅蛋白＜70g/L需要鏡檢，往往與白細(xì)胞總數(shù)、血小板總數(shù)檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性，此時(shí)必須復(fù)檢以防止再生障礙行貧血、免疫性溶血性貧血、白血病的存在，并對(duì)所有檢測(cè)數(shù)據(jù)比對(duì)評(píng)估方可發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告。

當(dāng)血小板數(shù)量＞600×9/L或血小板數(shù)量＜80×109/L，要及時(shí)鏡檢。由于血小板體積偏小，儀器的光電敏感性存在誤差，特別容易漏檢。復(fù)檢血片中血小板的形態(tài)非常重要，同時(shí)可以篩檢出血小板增多癥、免疫性血小板減少癥等特殊病例，大血小板增多，血小板凝集，血凝塊形成可使血小板假性減低[9]。

3.2 需要顯微鏡鏡檢2790份標(biāo)本的異常血細(xì)胞形態(tài)特征分析

血涂片鏡檢是判斷血細(xì)胞形態(tài)病理變化的金標(biāo)準(zhǔn)，質(zhì)量高的鏡檢[10]包括觀察炎癥引起的白細(xì)胞“毒性”變化、白血病病理變化、貧血紅細(xì)胞形態(tài)變化、血小板形態(tài)特點(diǎn)，以及血液內(nèi)寄生蟲檢查，這些是任何血細(xì)胞分析儀不可取代的。有資料顯示[11]，國(guó)內(nèi)各醫(yī)院血細(xì)胞分析儀實(shí)際鏡檢率在0～15%，大部分＜5%。本組對(duì)所有鏡檢標(biāo)本的異常情況做如下分析：

白細(xì)胞異常：白細(xì)胞總數(shù)＞20×109/L的64例中大多數(shù)因?yàn)榧毙愿腥竞突撔匝装Y引起，涂片鏡檢可見核左移，桿狀核增多，伴少數(shù)晚幼粒、中幼粒細(xì)胞，有時(shí)可見中毒顆粒、空泡變性、核變性等質(zhì)的改變。白細(xì)胞總數(shù)＜4×109/L的76例中的涂片中常見核右移，分葉核增多，5葉核以上的細(xì)胞＞3%；淋巴細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變，其中有21例異常淋巴細(xì)胞均大于0.13，最多為0.56，且以不規(guī)則異常淋巴細(xì)胞為主，原始細(xì)胞、各幼稚階段細(xì)胞的存在均提示白血病等惡性系統(tǒng)血液病。

紅細(xì)胞異常：血紅蛋白＜70g/L的428例中最多見的是小細(xì)胞低色素性貧血，涂片中多為低色素小細(xì)胞，也可見淚滴狀、口形、棘形、球形、靶形、嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞等。

表1 . 血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果異常需顯微鏡人工復(fù)檢的標(biāo)準(zhǔn)

表2 . 血細(xì)胞顯微鏡復(fù)檢原因分類

血小板異常：在217例血小板異常中多數(shù)為數(shù)量的改變，血小板形態(tài)正常，也有部分形態(tài)上有異常改變，巨大、退變及不典型畸形血小板。

3.3 通過本組大樣本臨床檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)和比對(duì)，我們初步從白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板等方面設(shè)立了血細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)，找到了儀器高效性與鏡檢準(zhǔn)確性的最佳結(jié)合點(diǎn)，并對(duì)鏡檢過程中經(jīng)常出現(xiàn)的異常形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行了細(xì)致的分類分析，增加了儀器檢驗(yàn)與手工檢驗(yàn)的吻合度，標(biāo)準(zhǔn)制定的規(guī)則有效的[12]提高了血細(xì)胞檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用價(jià)值。由于儀器設(shè)備的配置不同，以及顯微鏡鏡檢的經(jīng)驗(yàn)差異，在實(shí)際工作中我們還需根據(jù)具體情況，及時(shí)溝通臨床，以期得到更客觀更準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。

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Establishment and Application of Blood Cell Morphological Re - examination Standard

LIU Ping ZHOU Shu-mei Yangzhou Stomatological Hospital of Jiangsu Province (Jiangsu Yangzhou 225002)

Objective: To investigate the standard establishment of the microscopic examination of the blood cell morphology in the process of testing for clinical samples. Methods: The cause analysis and census of a smear of the clinical samples which have problems detected by the blood analyzer in our hospital in 2016. Results: Among those samples, abnormal WBC differential count accounted for 42.5%, hemoglobin＜70 g/L accounted for 15.3%, platelet abnormalities accounted for 7.7%, etc. Conclusion: When the detection results of blood analyzer in WBC amount more than 20×109/L or less than 4×109/L, hemoglobin＜70g/ L, platelet＞600×109/L or＜80×109/L, they must be timely microscopic examined, that will combine the instrument detection with traditional microscopic examination perfectly, and improve the clinical application value. Key words: blood cell analysis, criteria of reexamination

1006-6586(2017)16-0010-03

R446.1

A

2017-06-23

劉萍，副主任檢驗(yàn)師。