宋曉輝 王 麗

·臨床經(jīng)驗(yàn)·

精子庫(kù)1例B3亞型血捐精志愿者報(bào)告及建議

宋曉輝 王 麗*

山東大學(xué)生殖醫(yī)學(xué)研究中心；國(guó)家輔助生殖與優(yōu)生工程技術(shù)研究中心；生殖內(nèi)分泌教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（山東濟(jì)南 250001）

ABO血型系統(tǒng)是人類血型系統(tǒng)中抗原免疫原性最強(qiáng)的一個(gè)血型系統(tǒng)，根據(jù)紅細(xì)胞上是否存在A、B抗原和血清中是否存在抗A抗B抗體，ABO血型表現(xiàn)型分為A、B、O、AB血型。亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結(jié)構(gòu)或抗原位點(diǎn)數(shù)有一定差異，ABO血型系統(tǒng)最常見的亞型出現(xiàn)在含A抗原的人群中，B亞型相對(duì)較少。雖然B亞型抗原性較弱，但在臨床上也有一定的意義。其中B3亞型通常是由ABO位點(diǎn)上的稀有等位基因所致[1]。B3亞型紅細(xì)胞最主要的特征是在顯微鏡下能與相應(yīng)的抗體出現(xiàn)混合視野外觀[2]。血型是人類精子庫(kù)捐精志愿者體檢中的一個(gè)項(xiàng)目，它在志愿者檔案分類管理、精液標(biāo)本的發(fā)送及臨床使用中起到重要的作用。本文對(duì)山東人類精子庫(kù)一例B3亞型血捐精志愿者作一報(bào)道，并對(duì)精子庫(kù)的管理提出一些相關(guān)建議。

臨床資料

患者 男性，31歲大學(xué)?？茖W(xué)歷，五官端正，到山東人類精子庫(kù)做捐精志愿者，對(duì)該男子進(jìn)行宣教后雙方簽訂了知情同意書，該男子符合《人類精子庫(kù)基本標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的供精者篩查程序及健康檢查標(biāo)準(zhǔn)[3]。人類精子庫(kù)輔助實(shí)驗(yàn)室對(duì)其血型進(jìn)行檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)正反定型不一致現(xiàn)象。該志愿者自述無(wú)輸血史，無(wú)疾病史，無(wú)家族遺傳病史，立即送本院輸血科進(jìn)行復(fù)查懷疑為亞型血。后經(jīng)山東省血液中心檢測(cè)報(bào)告為B3亞型。

結(jié) 果

一、人類精子庫(kù)輔助實(shí)驗(yàn)室微柱凝膠法檢測(cè)

本實(shí)驗(yàn)室所用血型檢測(cè)卡為中山市生科試劑儀器有限公司生產(chǎn)的微柱凝膠正反定型檢測(cè)卡，離心機(jī)為TD-2Y醫(yī)用多功能離心機(jī)。該志愿者紅細(xì)胞與抗A反應(yīng)均沉積于凝膠管底部，與抗B反應(yīng)大部分紅細(xì)胞沉積于底部，極少量紅細(xì)胞懸于凝膠上層，呈現(xiàn)混合凝集（mf），與抗D反應(yīng)紅細(xì)胞全部懸于上層，Control管紅細(xì)胞全部沉積于底部；該志愿者血漿與A1細(xì)胞反應(yīng)呈現(xiàn)3+的凝集，與B、O及自身細(xì)胞均不凝集，結(jié)果見表1。

表1 微柱凝膠凝集法血型初步鑒定

二、本院輸血科試管法復(fù)查結(jié)果

使用試劑為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)的抗A、抗B、抗AB、抗A1及抗H試劑，中山市生科試劑儀器有限公司生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)A細(xì)胞、B細(xì)胞、O細(xì)胞。分別再4℃、室溫及37℃放置30min進(jìn)行正反定型試驗(yàn)，提示患者紅細(xì)胞上有弱B抗原存在，結(jié)果見表2。

表2 試管法ABO血型復(fù)查

三、山東省血液中心檢測(cè)結(jié)果

不規(guī)則抗體篩選陰性，直接抗人球蛋白試驗(yàn)陰性。唾液血型物質(zhì)檢測(cè)到B、H物質(zhì)，綜合鹽水試管法正反定型和吸收放散試驗(yàn)結(jié)果，該捐精志愿者符合B3亞型血清學(xué)特征。

討 論

ABO亞型是由于紅細(xì)胞所攜帶的A或B抗原數(shù)量很少與標(biāo)準(zhǔn)的抗A或抗B血清反應(yīng)較弱，容易造成血型鑒定錯(cuò)誤。本實(shí)驗(yàn)室用微柱凝膠法檢測(cè)血型，因其穩(wěn)定靈敏度高，能檢測(cè)到十分微弱的抗原抗體反應(yīng)和不完全抗體等優(yōu)點(diǎn)已作為臨床血型鑒定常規(guī)方法[4]。對(duì)該捐精志愿者的血用微柱凝膠法進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)了正反定型不一致現(xiàn)象，其紅細(xì)胞與抗B血清混合在微柱凝膠中出現(xiàn)混合視野，該志愿者自述無(wú)家族遺傳史和疾病史等，所以排除了生理因素和疾病因素造成的正反不一致現(xiàn)象。然后送本院輸血科用試管法進(jìn)行了復(fù)查，在4℃、室溫及37℃孵育30min后經(jīng)顯微鏡觀察證實(shí)了弱凝集的存在。該志愿者紅細(xì)胞與抗B血清混合在顯微鏡下觀察可見弱凝集，與抗AB反應(yīng)也呈弱凝集，其紅細(xì)胞與抗H反應(yīng)凝集比O細(xì)胞與抗H凝集強(qiáng)度弱，從而說(shuō)明紅細(xì)胞上的B抗原很弱，H抗原較強(qiáng)，試管法初步判斷該志愿者紅細(xì)胞有弱B抗原存在。山東省血液中心結(jié)合鹽水試管法和吸收放散實(shí)驗(yàn)最后確定為B3亞型。

B3亞型的紅細(xì)胞與抗B血清呈弱凝集或混合外觀凝集，從而極易誤定為O（或A）型血。人類精子庫(kù)按照捐精志愿者的四種血型對(duì)其精液進(jìn)行分類編號(hào)，從而為不育患者提供與男方血型一致的精液。所以血型檢測(cè)正確性尤為重要。有研究指出[5]由亞型造成血型定型錯(cuò)誤占到了16%。建議人類精子庫(kù)對(duì)志愿者的血型檢測(cè)時(shí)嚴(yán)格按照正反定型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，當(dāng)出現(xiàn)正反定型不一致的情況時(shí)及時(shí)找出原因，對(duì)于不明原因的應(yīng)向當(dāng)?shù)匮褐行乃蜋z。有報(bào)道指出[6,7]亞型無(wú)論從家系調(diào)查分析還是從分子生物學(xué)鑒定都具有遺傳性，如果后代為B3亞型有輸血需求時(shí)理論上只能輸B3亞型，但實(shí)際上很難找到，故只能用洗滌后的O型紅細(xì)胞配合輸注[8]。在血站一般也不接收亞型的獻(xiàn)血者，因?yàn)榕R床很難碰到相同亞型的患者，血液保質(zhì)期一到就報(bào)廢了。假如亞型血志愿者的精液用于臨床，亞型血的這種遺傳性不孕夫婦應(yīng)有完全知情權(quán)和標(biāo)本的選擇權(quán)，而且只有在知情的前提下才能行使選擇權(quán)。亞型所產(chǎn)生的問題同時(shí)也是個(gè)醫(yī)學(xué)倫理問題。目前為止合格捐精者的血型亞型問題人類精子庫(kù)和臨床供精還沒有具體的規(guī)定和措施，亞型的志愿者能否捐精或捐精后精液能否用于臨床是一個(gè)需要討論的問題。

2003年衛(wèi)生部組織有關(guān)專家結(jié)合我國(guó)實(shí)際情況重新修訂了《人類輔助生殖技術(shù)與人類精子庫(kù)倫理原則》，倫理原則中包含了有利于供受者、保護(hù)后代、保密、社會(huì)公益、知情同意等倫理原則，這些原則對(duì)于輔助生殖技術(shù)的發(fā)展發(fā)揮了重要作用。雖然人類精子庫(kù)的出現(xiàn)對(duì)男性不孕夫婦帶來(lái)了福音，但是供精人工授精的廣泛使用必然會(huì)產(chǎn)生一系列新的倫理和社會(huì)的等諸方面的問題。人類精子庫(kù)之間應(yīng)加強(qiáng)聯(lián)系和溝通，對(duì)出現(xiàn)的新問題應(yīng)多組織討論，爭(zhēng)取形成專家共識(shí)，以指導(dǎo)實(shí)際工作，使精子庫(kù)和輔助生殖技術(shù)朝著逐步完善的方向發(fā)展。為患者提供最佳的醫(yī)療服務(wù)。

小 結(jié)

到目前為止我國(guó)已經(jīng)建立了23家人類精子庫(kù)，但是我國(guó)人類精子庫(kù)初期建立階段處于一種無(wú)序狀態(tài)，雖然2001年2月和2003年10月我國(guó)衛(wèi)生部先后頒發(fā)了2個(gè)相關(guān)的管理辦法及其修訂版，精子庫(kù)運(yùn)行過程至今仍面臨種種問題[9]，尤其在精子庫(kù)倫理原則上，各人類精子庫(kù)在運(yùn)行時(shí)仍然不同程度的存在一些倫理問題，且未引起高度重視。所以衛(wèi)生部主管部門應(yīng)加強(qiáng)對(duì)精子庫(kù)工作的監(jiān)督管理，將人類精子庫(kù)的倫理原則體現(xiàn)在精子庫(kù)技術(shù)的每一環(huán)節(jié)中，如謹(jǐn)慎的工作態(tài)度，對(duì)志愿者血型檢查時(shí)務(wù)必堅(jiān)持做正反定型；充分考慮到供受者的利益，不盲目剝奪供精者供精的權(quán)利，也要尊重受精者知情同意的權(quán)利。

鑒于此種情況我們對(duì)此志愿者按B型血進(jìn)行分類編號(hào)，檔案做特殊標(biāo)記，假如染色體正常我們將對(duì)該志愿者供精結(jié)束6個(gè)月后復(fù)查HIV，對(duì)其所供精液進(jìn)行儲(chǔ)存，供后期科學(xué)研究和臨床上特殊用精使用。同時(shí)，考慮到該志愿者的精液在臨床使用會(huì)比較少，所以也控制其捐獻(xiàn)的次數(shù)。但該志愿者查體后并未前來(lái)捐獻(xiàn)，40d后染色體核型結(jié)果為chi 46,XX[32]/46,XY[68]，即具有XX和XY細(xì)胞系的異源嵌合體。我們通知本人并終止其捐獻(xiàn)過程，對(duì)其檔案按異常進(jìn)行管理。

血型抗原; 精子庫(kù); 捐精

1 李勇, 馬學(xué)嚴(yán). 實(shí)用血液免疫學(xué): 血型理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù).北京: 科學(xué)技術(shù)出版社, 2006: 243-245

2 杰夫?丹尼爾. 人類血型. 朱自嚴(yán), 譯. 北京: 科學(xué)出版社, 2007: 41-42

3 衛(wèi)生部科教司. 衛(wèi)生部關(guān)于修訂人類輔助生殖技術(shù)與人類精子庫(kù)相關(guān)技術(shù)規(guī)范、基本標(biāo)準(zhǔn)和倫理原則的通知, 2003

4 楊慧敏, 陳欽宏, 謝作聽. 微柱凝集法檢出B亞型血型及鑒定. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志 2010; 20(12): 3348-3349

5 吳敏慧, 劉毅, 劉洪莉, 等. ABO血型正反定型不符確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)查分析. 臨床輸血與檢驗(yàn) 2005; 7(3): 198-199

6 劉啟明, 尹新燕, 閻澤君, 等. B3亞型1例及家系調(diào)查. 中國(guó)誤診學(xué)雜志 2008; 8(19): 4785

7 張韋, 欒希英. 1例B3亞型的分子機(jī)制及家系調(diào)查. 臨床輸血與檢驗(yàn) 2016; 18(4): 319-322

8 王燕菊, 蔣學(xué)兵, 李文靜, 等. B3亞型1例報(bào)告. 北京醫(yī)學(xué)2012; 34(2): 143

9 盧文紅, 陳振文. 中、外精子庫(kù)的發(fā)展和管理比較. 生殖與避孕 2014; 34(2): 102-107

（2017-05-27收稿）

10.3969/j.issn.1008-0848.2017.04.012

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＊通訊作者，E-mail: wangli_0531@163.com