盧俏麗，李 晨△，賈志榮

(1.天津市第五中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,天津 300450；2.北京大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，北京 100034)

論著·臨床研究

炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9水平與腦微出血的相關(guān)性研究*

盧俏麗1，李 晨1△，賈志榮2

(1.天津市第五中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,天津 300450；2.北京大學(xué)第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，北京 100034)

目的探討炎癥介質(zhì)高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、白細(xì)胞介素6(IL-6)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)水平與腦微出血(CMB)的關(guān)系。方法收集非急性缺血性腦血管病患者201例，均行頭磁共振成像(MRI)+磁敏感加權(quán)成像(SWI)檢查，根據(jù)SWI結(jié)果分為CMB組49例和非CMB組152例，記錄兩組患者臨床資料，檢測(cè)炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6及 MMP-9的水平。采用Logistic回歸分析hs-CRP、IL-6和MMP-9水平與CMB的關(guān)系。結(jié)果CMB組患者炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9水平均明顯高于非CMB組(P<0.05)。Logistic多元回歸分析顯示調(diào)整了年齡、性別及傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素的影響，炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9[OR值(95%CI)分別為1.745(1.342～2.270),1.223(1.018～1.533),1.284(1.082～1.423),P<0.05)]同樣是CMB發(fā)生的危險(xiǎn)因素。結(jié)論炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9水平與CMB密切相關(guān)，參與了CMB的發(fā)生。

腦出血；C反應(yīng)蛋白質(zhì)；白細(xì)胞介素6；基質(zhì)金屬蛋白酶9；腦微出血；危險(xiǎn)因素；炎癥介質(zhì)

腦微出血(cerebral microbleeding,CMB)是腦內(nèi)微小血管病變所致的，以含鐵血黃素沉積為主要特征的一種腦實(shí)質(zhì)亞臨床損傷[1]。以往的報(bào)道認(rèn)為，高血壓血管病變、腦淀粉樣血管病、既往缺血性腦損傷等造成的腦內(nèi)微小血管病變是CMB形成的主要原因[2]。高血壓血管病變導(dǎo)致的CMB多發(fā)生在基底節(jié)區(qū)，腦葉CMB多與腦淀粉樣血管病變有關(guān)[1]。研究顯示，合并CMB的卒中患者卒中復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)顯著增高[2]。有研究認(rèn)為CMB灶數(shù)量較多時(shí)，在運(yùn)用抗凝、抗血小板、溶栓治療時(shí)自發(fā)性出血的風(fēng)險(xiǎn)較高[3]。近一些研究顯示炎性反應(yīng)是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化最重要的機(jī)制，且與腔隙性腦梗死及腦白質(zhì)疏松密切相關(guān)，參與了小血管病變的過(guò)程[4]。目前炎癥過(guò)程與微出血的關(guān)系研究尚少。本研究旨在分析CMB的相關(guān)危險(xiǎn)因素，為以后卒中的預(yù)防及治療提供臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年6月至2015年12月天津市第五中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的非急性缺血性腦血管病患者201例。根據(jù)磁敏感加權(quán)成像(SWI)結(jié)果分為兩組，CMB組49例，平均年齡(68.6±7.8)歲；無(wú)CMB 組152例，平均年齡(61.8±11.1)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有患者均符合中華神經(jīng)科學(xué)會(huì)2010年制訂的缺血性腦血管病診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)經(jīng)頭顱磁共振成像(MRI)證實(shí)，且彌散加權(quán)成像(DWI)排除新發(fā)腦梗死；(3)年齡在45歲以上；(4)簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)[5]：(1)伴有嚴(yán)重意識(shí)障礙、失語(yǔ)的腦梗死后遺癥患者；(2)顱腦創(chuàng)傷史；(3)既往腦出血病史；(4)惡性腫瘤;(5)風(fēng)濕及膠原病；(6)嚴(yán)重內(nèi)科疾病(臟器功能衰竭)；(7)感染性疾病或服用抗炎藥物；(8)高敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)>8 mg/L；(9)不同意參加。

1.2方法

1.2.1臨床資料收集 記錄年齡、性別、體質(zhì)量、身高、血壓、血糖、血脂及有無(wú)吸煙史、飲酒史、心臟病史等資料。收縮壓大于140 mm Hg或舒張壓大于90 mm Hg，或既往有高血壓史或正在服用抗高血壓藥物即診斷為高血壓。吸煙史、飲酒史包括過(guò)去曾經(jīng)吸煙、飲酒已戒除或未戒除者。高脂血癥：三酰甘油(TG)≥1.7 mmol/L；低度脂蛋白膽固醇(LDL-C)≥3.64 mmol/L；總膽固醇(TC)≥5.7 mmol/L?？崭寡撬酱笥诨虻扔?.0 mol/L和(或)餐后血糖大于或等于11.1 mol/L診斷為糖尿??；抗血栓藥物包括抗血小板藥物及抗凝藥物。

1.2.2SWI檢查及CMB診斷 采用Philips Achieva 3.0T超導(dǎo)型MRI掃描儀，頭顱8通道矩陣線圈,SWI主要參數(shù):三維梯度回波(3DFFE)序列，重復(fù)時(shí)間(Act TR) 17 ms,回波時(shí)間(TE) 24 ms,翻轉(zhuǎn)角5°,視野183 mm×230 mm，矩陣256×203，激勵(lì)次數(shù)1，層厚1 mm，層數(shù)100,敏感性因子1.5，掃描時(shí)間114 s。SWI圖像重建:原始圖像層厚1 mm，實(shí)時(shí)在線技術(shù)自動(dòng)最小密度投影(mIP)重建。重建層厚5 mm，常規(guī)掃描直接顯示圖像，所有圖像在工作站上進(jìn)行對(duì)比分析。采用隨機(jī)雙盲法由經(jīng)驗(yàn)豐富的影像科及神經(jīng)科醫(yī)師同時(shí)閱片，并參考微出血解剖評(píng)定量表(MARS)對(duì)微出血進(jìn)行評(píng)價(jià)，取得一致意見(jiàn)后記錄[6]。CMB的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：SWI及梯度回波加權(quán)成像(GRE-T2WI)序列上表現(xiàn)為1～10 mm低信號(hào)，形狀為圓形或卵圓形，排除鐵、鈣沉積，骨影，血管流空信號(hào)。腔隙性腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn):FLAIR序列3～15 mm邊界清楚的低密度影像，而T2序列表現(xiàn)為高信號(hào)影像，T1序列表現(xiàn)為低信號(hào)影像。腦白質(zhì)病變?cè)\斷標(biāo)準(zhǔn)：參照Wahlund 評(píng)分分級(jí)方法,每側(cè)大腦半球均被劃分為5個(gè)區(qū)域，即額葉、頂枕葉、顳葉、幕下區(qū)域(包括小腦和腦干)、基底節(jié)區(qū)(包括紋狀體、蒼白球、丘腦、內(nèi)囊、外囊、島葉)，每個(gè)區(qū)域單獨(dú)評(píng)分(0～3分，4個(gè)等級(jí))，基底節(jié)區(qū)域0分為無(wú)損傷，1分為1個(gè)局限性損傷，2分為多于1個(gè)局限性損傷，3分為融合損傷，最終得分為雙側(cè)大腦半球各區(qū)域評(píng)分的總和。

1.2.3炎性標(biāo)志物檢測(cè) (1)hs-CRP水平測(cè)定：采用乳酸比濁免疫法檢測(cè)，于患者入院24 h內(nèi)取空腹肘靜脈血3 mL,注入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管中，室溫下靜置0.5～1.0 h后以3 000 r/min離心15 min，離心半徑10 cm，分離血清，-20 ℃冰箱保存，定期分批檢測(cè)。(2)白細(xì)胞介素6(IL-6)水平測(cè)定：采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測(cè)，于患者入院后24 h內(nèi)取空腹肘靜脈血2 mL，凝固后分離血清，于20 ℃保存待測(cè)，將血清于測(cè)定前置冷水中復(fù)融混勻，4 ℃時(shí)予3 000 r/min離心15 min，離心半徑10 cm，分離血清，-20 ℃冰箱保存，定期分批檢測(cè)。(3)基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)水平測(cè)定：采用Quantikine試劑盒，ELISA方法檢測(cè)，于患者入院后24 h內(nèi)取空腹肘靜脈血3 mL,盡快分離血清，低溫保存，檢測(cè)前復(fù)融。為保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，每次檢測(cè)均由檢驗(yàn)科同一醫(yī)師操作，每次檢測(cè)前同一質(zhì)控物矯正儀器。

2 結(jié) 果

2.1兩組臨床資料比較 CMB組患者年齡、高血壓患病率、收縮壓水平、冠心病患病率、腔隙性腦梗死發(fā)生率、抗血栓藥物使用率及腦白質(zhì)疏松評(píng)分均高于非CMB組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.2兩組炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9水平比較 CMB組患者炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9水平均明顯高于非CMB組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組炎癥介質(zhì)水平比較[M(Q1，Q3)]

2.3CMB與炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6、MMP-9水平關(guān)系的Logistic回歸分析 以有無(wú)CMB為因變量，將炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6、MMP-9水平為自變量進(jìn)行Logistic多元回歸分析，結(jié)果顯示，調(diào)整了年齡和性別的影響，炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6、MMP-9是CMB發(fā)生的危險(xiǎn)因素。調(diào)整了年齡、性別及傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素BMI、吸煙、飲酒、高血壓、收縮壓及舒張壓水平、糖尿病、高脂血癥、冠心病、腔隙性腦梗死、抗血栓藥物的使用及腦白質(zhì)疏松評(píng)分的影響，炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6、MMP-9仍是CMB發(fā)生的危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表3。

表3 Logistic回歸分析

CMB1：調(diào)整了年齡與性別；CMB2：調(diào)整了年齡、性別及傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素

3 討 論

CMB不僅常見(jiàn)于缺血性、出血性卒中患者，而且見(jiàn)于正常老年人群，更為重要的是，CMB可以預(yù)測(cè)未來(lái)缺血性卒中的再發(fā)及抗栓患者的出血性卒中的發(fā)生[8],因此探尋其發(fā)病機(jī)制已成為研究熱點(diǎn)。既往研究證實(shí)炎性反應(yīng)與腦微血管病變、腔隙性腦梗死和腦白質(zhì)病變密切相關(guān)。本研究進(jìn)一步明確炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和 MMP-9與CMB的關(guān)系。

既往研究顯示炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6、IL-18在CMB患者中明顯高于非CMB患者，與CMB的位置無(wú)關(guān)，與小血管病變的嚴(yán)重程度相關(guān)，提示炎性反應(yīng)是微出血的重要的發(fā)病機(jī)制[5]。有研究發(fā)現(xiàn)血清MMP-9水平升高與CMB 密切相關(guān)，并且血清MMP-9水平與CMB 呈正相關(guān)[9]。又有研究顯示卒中患者中hs-CRP、MMP-9與CMB密切相關(guān)，同時(shí)MMP-9是神經(jīng)損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[10]。本研究結(jié)果顯示調(diào)整了年齡、性別及傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素的影響，炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9仍是CMB發(fā)生的危險(xiǎn)因素，與上述結(jié)果一致。大量研究證實(shí)內(nèi)皮功能障礙和血腦屏障(BBB)的破壞是腦小血管病的主要起始病理表現(xiàn)。IL-6是一種在炎性反應(yīng)中起重要作用的細(xì)胞活素，與腦微出血及腦小血管病密切相關(guān)[11]。有研究發(fā)現(xiàn)老年人的含鐵血黃素沉積于毛細(xì)血管周?chē)?，外滲的含鐵血黃素經(jīng)擴(kuò)大的血管間隙遷移，促進(jìn)炎性反應(yīng)，導(dǎo)致腔隙梗死的形成，這些發(fā)現(xiàn)在某種程度上支持炎性過(guò)程，反映了炎性機(jī)制導(dǎo)致小血管病和CMB的發(fā)生[12]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，MMP-9表達(dá)增加與慢性血腦屏障損傷關(guān)系最為密切[13]。腦缺血再灌注后，MMP表達(dá)增加，尤其是MMP-9增加更為顯著，MMP-9通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)，使血腦屏障破壞，血腦屏障通透性增加[14]。上述研究均支持炎性反應(yīng)參與內(nèi)皮功能障礙和血腦屏障破壞，導(dǎo)致CMB的發(fā)生。

綜上所述，炎癥介質(zhì)hs-CRP、IL-6和MMP-9水平升高與CMB密切相關(guān)，同時(shí)炎性反應(yīng)參與了CMB的發(fā)生。CMB與缺血性卒中及出血性卒中密切相關(guān)，CMB病灶越多，患者腦卒中復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)越高。考慮使用抗血小板聚集、抗凝治療或溶栓治療時(shí)，最好行常規(guī)頭MRI+SWI及血炎性標(biāo)志物檢測(cè)，判斷有無(wú)CMB及CMB的嚴(yán)重性，用以指導(dǎo)臨床用藥及評(píng)估出血轉(zhuǎn)化的風(fēng)險(xiǎn)。

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Studyoncorrelationbetweenlevelsofhs-CRP,IL-6andMMP-9withcerebralmicrobleeding*

LuQiaoli1,LiChen1△,JiaZhirong2

(1.DepartmentofNeurology,TianjinFifthCentralHospital,Tianjin300450,China；2.DepartmentofNeurology,FirstHospital,PekingUniversity,Beijing100034,China)

ObjectiveTo discuss the correlation between levels of hs-CRP,IL-6 and MMP-9 with cerebral microbleeding(CMB).MethodsA total of 201 of non-acute ischemic cerebrovascular were collected and performed heal MRI+susceptibility-weighted imaging(SWI).The patients were divided into the CMB group(49 cases) and non-CMB group(152 cases) according to the SWI examination results.The clinical data were recorded in the two groups.The levels of inflammatory mediators high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP),interleukin-6 (IL-6) and matrix metalloproteinase-9(MMP-9) were tested.The Logistic regression analysis was used to analyze the relation between the levels of hs-CRP,IL-6 and MMP-9 with cerebral microbleeding.ResultsThe levels of inflammatory mediators hs-CRP,IL-6 and MMP-9 in the CMB group were significantly higher than those in the non-CMB group (P<0.05).The logisticMultivariate logistic regression analysis showed that the levels of hs-CRP,IL-6 and MMP-9[ORvalue(95%CI):1.745(1.342-2.270),1.223(1.018-1.533),1.284(1.082-1.423),P<0.05)] were the risk factors of CMB after adjusting the influence of age,sex and traditional risk factors.ConclusionThe levels of inflammatory mediators hs-CRP,IL-6 and MMP-9 are closely associated with CMB,which participate in CMB occurrence.

cerebral hemorrhage；C-reactive protein；interleukin-6；matrix metalloproteinase 9；cerebral microbleeding;risk factor;inflammatory mediator

R741

A

1671-8348(2017)26-3629-03

2017-02-18

2017-06-13)

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.26.010

天津市衛(wèi)生局科技基金(2013KZ021)；天津市濱海區(qū)衛(wèi)生局科技項(xiàng)目(2013BWKY025)。

盧俏麗(1983-)，住院醫(yī)師，碩士，主要從事腦血管病及神經(jīng)免疫方面研究。△

，E-mail：lichenokk@163.com。