, ,, , ,莉莉,
(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,江蘇南京 210095)
蛋氨酸對(duì)宮內(nèi)發(fā)育遲緩斷奶仔豬血漿生化指標(biāo)和腸道消化吸收功能的影響
蘇偉鵬,張昊,應(yīng)志雄,李悅,周樂,張莉莉,王恬*
(南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,江蘇南京 210095)
目的:研究蛋氨酸對(duì)宮內(nèi)發(fā)育遲緩(IUGR)斷奶仔豬血漿生化指標(biāo)和腸道消化吸收功能的調(diào)節(jié)作用。方法:所有仔豬于21 d齡斷奶,30頭正常出生體重(NBW)斷奶仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧(NBW-CON組),60頭IUGR斷奶仔豬隨機(jī)分成兩個(gè)處理組,分別飼喂基礎(chǔ)日糧(IUGR-CON組)和添加0.12%蛋氨酸的實(shí)驗(yàn)日糧(IUGR-MET組),每個(gè)處理組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)5頭豬,實(shí)驗(yàn)期為28 d。結(jié)果:與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬血漿尿素氮含量顯著升高(p<0.05),血漿總蛋白和D-木糖含量顯著降低(p<0.05)。IUGR-CON斷奶仔豬粗蛋白和總能表觀消化率、空腸食糜胰蛋白酶活性、黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性均顯著降低(p<0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬血漿尿素氮含量顯著降低(p<0.05),血漿D-木糖含量顯著升高(p<0.05)。日糧添加0.12%蛋氨酸顯著緩解IUGR介導(dǎo)斷奶仔豬粗蛋白表觀消化率、空腸食糜胰蛋白酶活性和黏膜Na+-K+-ATP酶活性降低(p<0.05)。結(jié)論:日糧添加0.12%蛋氨酸可降低IUGR斷奶仔豬血漿尿素氮含量,并在一定程度上緩解了IUGR對(duì)斷奶仔豬腸道消化吸收功能的不良影響。
蛋氨酸,宮內(nèi)發(fā)育遲緩,斷奶仔豬,腸道,消化吸收功能
胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩(Intrauterine growth retardation,IUGR)是圍產(chǎn)期的常見并發(fā)癥之一,臨床表現(xiàn)為低出生體重或極低出生體重、各組織器官生長發(fā)育受阻、高發(fā)病率和死亡率等[1-2]。據(jù)統(tǒng)計(jì),全球每年約有5%~10%的IUGR新生兒,已經(jīng)成為困擾人類醫(yī)學(xué)的重大難題[3]。胎兒生長發(fā)育與機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收能力的高低密切相關(guān),而腸道則是機(jī)體最為重要的消化吸收器官[4]。諸多研究表明,IUGR會(huì)造成胎兒出生后腸道消化、吸收和代謝等功能的異常[5-6]。
近年來,膳食氨基酸在維持腸道健康和預(yù)防腸道疾病等領(lǐng)域的應(yīng)用受到廣泛關(guān)注[7]。蛋氨酸(Methionine,Met)屬于含硫氨基酸,是機(jī)體必需氨基酸之一[8]。研究表明,蛋氨酸在蛋白質(zhì)代謝、DNA甲基化以及抗氧化功能中具有重要作用[9]。同時(shí),含硫氨基酸在維持腸道消化、吸收和代謝功能中也發(fā)揮著積極作用[10]。Bauchart-Thevret 等[11]研究發(fā)現(xiàn),含硫氨基酸的缺乏會(huì)導(dǎo)致腸道絨毛萎縮,絨毛表面積減少,從而影響腸道對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。因此,蛋氨酸對(duì)于維持腸道正常功能具有重要意義。
但有關(guān)蛋氨酸緩解IUGR后代腸道消化吸收功能異常的報(bào)道較少,特別是在出生后早期這一關(guān)鍵階段。豬和人在腸道結(jié)構(gòu)、消化系統(tǒng)等方面均有較好的相似性,IUGR豬作為人類理想的動(dòng)物模型,對(duì)臨床治療IUGR新生兒腸道消化吸收功能紊亂具有重要的參考意義[12]。因此,本研究以IUGR斷奶仔豬為動(dòng)物模型,探討蛋氨酸對(duì)IUGR斷奶仔豬血漿生化指標(biāo)和腸道消化吸收功能的影響,為改善IUGR新生兒腸道功能損傷提供新的思路,同時(shí)為蛋氨酸在IUGR后代健康飲食中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。
1.1材料與儀器
L-蛋氨酸(純度99%) 韓國希杰有限公司;葡萄糖試劑盒、總膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒、總蛋白試劑盒、白蛋白試劑盒、尿素氮試劑盒 上??迫A生物工程股份有限公司;淀粉酶試劑盒、脂肪酶試劑盒、胰蛋白酶試劑盒、D-木糖試劑盒、堿性磷酸酶試劑盒、Na+-K+-ATP酶試劑盒、總蛋白定量測定(BCA法)試劑盒 南京建成生物工程研究所。
Selectra-E型全自動(dòng)生化分析儀 荷蘭威圖科學(xué)公司;BSA224S-CW型分析天平 德國Sartorius公司;KJELTEC 2300型全自動(dòng)凱氏定氮儀 瑞典FOSS分析儀器公司;TYHW-V型全自動(dòng)量熱儀 鶴壁市天宇儀器儀表制造有限公司;Bio-Gen Series PRO 200型勻漿機(jī) 美國PRO Scientific公司;5804R型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 德國Eppendorf公司;DK-S24型電熱恒溫水浴鍋 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;T-6m型紫外可見分光光度計(jì) 南京菲勒儀器有限公司;DW-25L262型醫(yī)用低溫保存箱 青島海爾特種電器有限公司;Multiskan Go型全波長酶標(biāo)儀,8925型-80 ℃超低溫冰箱 美國Thermo Fisher Scientific公司。
1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
在體況相似、胎次接近、品種相同的30頭母豬所產(chǎn)的新生仔豬中,每窩各挑選1頭正常出生體重(Normal birth weight,NBW)和2頭IUGR新生仔豬(以出生體重接近群體平均值且小于0.5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的仔豬為NBW仔豬,以出生體重低于群體平均值2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的仔豬為IUGR仔豬[13-14]),所用仔豬全部為母。所有仔豬于21 d齡斷奶,30頭NBW斷奶仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧(NBW-CON組),60頭IUGR斷奶仔豬隨機(jī)分成兩個(gè)處理組,分別飼喂基礎(chǔ)日糧(IUGR-CON組)和添加0.12%蛋氨酸的實(shí)驗(yàn)日糧(IUGR-MET組),每個(gè)處理組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)5頭豬,實(shí)驗(yàn)期為28 d。日糧配制參照NRC(2012)豬的營養(yǎng)需要[15],日糧配方和營養(yǎng)水平見表1。實(shí)驗(yàn)豬飼養(yǎng)管理嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫制度。
表1 日糧配方和營養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient levels of the diets
注*:預(yù)混料為每kg全價(jià)料提供:維生素A,8000 IU;維生素D3,3000 IU;維生素E,20 IU;維生素K3,3 mg;維生素B1,2 mg;維生素B2,5 mg;維生素B6,7 mg;維生素B12,0.02 mg;煙酸,30 mg;泛酸,15 mg;葉酸,0.3 mg;生物素,0.08 mg;氯化膽堿,500 mg;鐵,110 mg;銅,7 mg;錳,5 mg;鋅,110 mg;碘,0.3 mg;硒,0.3 mg。
表2 Met對(duì)IUGR斷奶仔豬血漿生化指標(biāo)的影響Table 2 Effects of Met on plasma biochemical parameters in IUGR weanling piglets
注:NBW-CON:NBW斷奶仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧;IUGR-CON:IUGR斷奶仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧;IUGR-MET:IUGR斷奶仔豬飼喂添加0.12%蛋氨酸的實(shí)驗(yàn)日糧;同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(p<0.05);含相同字母或無字母表示差異不顯著(p>0.05),表3~表5、圖1同。
1.3樣品采集與處理
49 d齡時(shí),對(duì)所有實(shí)驗(yàn)豬進(jìn)行稱重,每組每重復(fù)中挑選一頭體重適中的實(shí)驗(yàn)豬。按1 mL/kg體重的劑量給仔豬灌服10%的D-木糖溶液,1 h后于前腔靜脈采集血液5 mL,收集于肝素鈉抗凝管中,在4 ℃下2000×g離心10 min,收集上層血漿,保存于-80 ℃超低溫冰箱待測。在采集血液后,肌內(nèi)注射戊巴比妥鈉(50 mg/kg體重)麻醉處以安樂死。迅速剖開腹腔,分離出空腸和回腸。分別擠出每段腸道食糜用于腸道內(nèi)容物酶活性的測定,并用手術(shù)剪剪開腸道,刮取腸道黏膜并裝入凍存管中,液氮速凍后于-80 ℃超低溫冰箱保存待測。
于實(shí)驗(yàn)第26~28 d,以重復(fù)為單位,每天采集糞便樣本150 g,并將同一重復(fù)仔豬的糞便混勻,加入10%鹽酸進(jìn)行固氮,-20 ℃冰箱保存待測。同時(shí),參照張麗英[16]的方法,采用四分法收集飼料樣品各250 g,4 ℃冰箱保存待測。
1.4測定指標(biāo)及方法
1.4.1 血漿生化指標(biāo)測定 使用全自動(dòng)生化分析儀測定仔豬血漿葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、總蛋白、白蛋白和尿素氮的含量。血漿球蛋白含量為總蛋白和白蛋白的差值。
1.4.2 養(yǎng)分表觀消化率測定 使用鹽酸不溶灰分作為指示劑,測定方法參照GB/T23742-2009。飼料及糞便中的干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪、總能和粗灰分的測定參照張麗英[16]的方法。養(yǎng)分表觀消化率按照以下公式進(jìn)行計(jì)算:
養(yǎng)分表觀消化率(%)=100-100×[(飼料中酸不溶灰分含量/糞樣中酸不溶灰分含量)×(糞樣中養(yǎng)分含量/飼料中養(yǎng)分含量)]
1.4.3 食糜和腸道黏膜勻漿液制備與指標(biāo)測定 分別稱取0.2 g左右食糜和腸道黏膜組織,按照重量(g)∶體積(mL)=1∶4的比例加入預(yù)冷的0.9%生理鹽水,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,4 ℃下1000×g離心10 min,取上清即20%勻漿液,放置于-20 ℃冰箱保存待測。BCA法測定蛋白含量。測定食糜勻漿液中淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性及腸道黏膜勻漿液中堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性。以上指標(biāo)均嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作。
1.4.4D-木糖含量測定 血漿中D-木糖含量使用南京建成生物工程研究所試劑盒進(jìn)行測定,并嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行操作。
1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差分析進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn),并采用Tukey法進(jìn)行多重比較,以p<0.05作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。
2.1Met對(duì)IUGR斷奶仔豬血漿生化指標(biāo)的影響
由表2可知,與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬血漿總蛋白含量顯著降低(p<0.05),尿素氮含量顯著升高(p<0.05),葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、白蛋白和球蛋白含量無顯著差異(p>0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬血漿尿素氮含量顯著降低(p<0.05),葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、總蛋白、白蛋白和球蛋白含量無顯著差異(p>0.05)。與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬血漿葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯、總蛋白、白蛋白、球蛋白和尿素氮含量無顯著差異(p>0.05)。
血漿的化學(xué)成分主要來源于胃腸道所消化吸收的營養(yǎng)物質(zhì)以及機(jī)體的代謝產(chǎn)物,其含量的變化可反映機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率以及組織的代謝水平。血漿總蛋白含量可反映機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收能力及蛋白質(zhì)代謝情況[17]。而尿素氮?jiǎng)t是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的主要終產(chǎn)物,其含量常用來反映體內(nèi)蛋白質(zhì)利用效率[18]。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),IUGR導(dǎo)致斷奶仔豬血漿總蛋白含量減少,尿素氮含量升高,提示機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收能力降低,蛋白質(zhì)分解加強(qiáng)。王遠(yuǎn)孝[19]的研究結(jié)果顯示,28 d齡IUGR仔豬血清總蛋白含量顯著降低,尿素氮含量顯著升高,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。研究認(rèn)為,日糧中氨基酸水平的改變可引起血中尿素氮含量的變化,血漿尿素氮含量的下降,反映了較高的氮利用效率和較少的尿素合成[20]。本研究中,通過日糧添加蛋氨酸可顯著降低IUGR-MET斷奶仔豬血漿尿素氮含量,表明機(jī)體氮的吸收量增加,蛋白質(zhì)合成代謝增強(qiáng)。另外,Tian等[21]研究發(fā)現(xiàn),日糧添加0.12%蛋氨酸可顯著提高仔豬血清總蛋白含量,顯著降低尿素氮含量,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。
2.2Met對(duì)IUGR斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響
由表3可知,與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬粗蛋白和總能的表觀消化率顯著降低(p<0.05),干物質(zhì)、粗脂肪和粗灰分的表觀消化率無顯著差異(p>0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬粗蛋白的表觀消化率顯著升高(p<0.05),干物質(zhì)、粗脂肪、總能和粗灰分的表觀消化率無顯著差異(p>0.05)。與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪、總能和粗灰分的表觀消化率無顯著差異(p>0.05)。
表3 Met對(duì)IUGR斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化率的影響(%)Table 3 Effects of Met on apparent nutrientdigestibility in IUGR weanling piglets(%)
表4 Met對(duì)IUGR斷奶仔豬腸道食糜消化酶活性的影響Table 4 Effects of Met on digestive enzyme activities in the intestinal digesta of IUGR weanling piglets
養(yǎng)分表觀消化率是衡量機(jī)體消化能力的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)中,IUGR導(dǎo)致49 d齡斷奶仔豬粗蛋白和總能的表觀消化率顯著降低,提示IUGR仔豬對(duì)食物中營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率較低。Greenwood等[22]研究表明,與NBW羔羊相比,IUGR導(dǎo)致新生羔羊總能利用效率降低,從而影響機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)和脂肪的沉積。腸道是蛋氨酸代謝的重要場所,蛋氨酸在腸道中的代謝對(duì)于腸道黏膜生長和維持腸道正常功能具有積極作用[23-24]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,日糧添加蛋氨酸使IUGR斷奶仔豬粗蛋白的表觀消化率顯著提高。這可能是由于蛋氨酸水平的提高促進(jìn)了IUGR斷奶仔豬腸道黏膜生長,從而增強(qiáng)了機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率。陳穎等[25]研究表明,隨著蛋氨酸水平的提高(0.28%~0.37%),斷奶仔豬對(duì)干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率呈線性增加,與本文結(jié)果相似。
2.3Met對(duì)IUGR斷奶仔豬腸道食糜消化酶活性的影響
由表4可知,與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬空腸食糜胰蛋白酶活性顯著降低(p<0.05),淀粉酶和脂肪酶活性無顯著差異(p>0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬空腸食糜胰蛋白酶活性顯著升高(p<0.05),淀粉酶和脂肪酶活性無顯著差異(p>0.05)。與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬回腸食糜淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性無顯著差異(p>0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬回腸食糜淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性無顯著差異(p>0.05)。與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬空腸和回腸食糜淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性無顯著差異(p>0.05)。
消化酶活性直接影響腸道對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化能力。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),IUGR-CON斷奶仔豬空腸胰蛋白酶活性顯著降低。Dong等[6]研究表明,IUGR導(dǎo)致哺乳仔豬腸道絨毛萎縮,空腸和回腸胰蛋白酶活性顯著降低,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。上述結(jié)果提示,IUGR仔豬腸道生長發(fā)育受阻,可引起腸道消化酶活性異常,從而嚴(yán)重影響機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化。帥柯[26]研究表明,蛋氨酸顯著提高幼建鯉腸道脂肪酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),蛋氨酸顯著提高IUGR斷奶仔豬空腸胰蛋白酶活性,而對(duì)淀粉酶和脂肪酶活性無顯著影響。說明蛋氨酸對(duì)腸道消化酶活性的調(diào)節(jié)作用可能受物種、機(jī)體狀態(tài)以及飼喂方式等因素的影響。
2.4Met對(duì)IUGR斷奶仔豬血漿D-木糖含量的影響
由圖1可知,與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬血漿D-木糖含量顯著降低(p<0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬血漿D-木糖含量顯著升高(p<0.05)。與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬血漿D-木糖含量無顯著差異(p>0.05)。
圖1 Met對(duì)IUGR斷奶仔豬血漿D-木糖含量的影響Fig.1 Effects of Met on plasma D-xylose contentin IUGR weanling piglets
表5 Met對(duì)IUGR斷奶仔豬腸道黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性的影響Table 5 Effects of Met on activities of alkaline phosphatase and Na+-K+-ATPase in the intestine of IUGR weanling piglets
2.5Met對(duì)IUGR斷奶仔豬腸道黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性的影響
由表5可知,與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬空腸黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性顯著降低(p<0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬空腸黏膜Na+-K+-ATP酶活性顯著升高(p<0.05),堿性磷酸酶活性無顯著差異(p>0.05)。與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-CON斷奶仔豬回腸黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性無顯著差異(p>0.05)。與IUGR-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬回腸黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性無顯著差異(p>0.05)。與NBW-CON斷奶仔豬相比,IUGR-MET斷奶仔豬空腸和回腸黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性無顯著差異(p>0.05)。
D-木糖吸收實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)小腸吸收功能的一種重要方法[27]。血液中木糖濃度越高,表明小腸吸收功能越好。本研究結(jié)果顯示,IUGR斷奶仔豬血漿D-木糖含量顯著降低,與Zhang等[5]研究結(jié)果一致。腸型堿性磷酸酶分布于腸上皮刷狀緣細(xì)胞表面,與脂類、葡萄糖等多種營養(yǎng)物質(zhì)的吸收密切相關(guān)[28-29]。腸道中Na+-K+-ATP酶在電解質(zhì)、水、葡萄糖等物質(zhì)的吸收過程中發(fā)揮重要作用[30-31]。本實(shí)驗(yàn)中,IUGR顯著降低49 d齡斷奶仔豬空腸黏膜堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性,與黃強(qiáng)等[32]研究結(jié)果一致,提示IUGR仔豬腸道吸收功能較弱。本實(shí)驗(yàn)通過日糧添加蛋氨酸顯著提高IUGR-MET斷奶仔豬血漿D-木糖含量和空腸黏膜Na+-K+-ATP酶活性,提示蛋氨酸能提高IUGR斷奶仔豬腸道吸收功能,促進(jìn)機(jī)體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。另外,帥柯[26]發(fā)現(xiàn),不同形式蛋氨酸對(duì)幼建鯉腸道堿性磷酸酶和Na+-K+-ATP酶活性均有顯著提高作用,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),IUGR導(dǎo)致斷奶仔豬血漿尿素氮含量顯著升高,血漿總蛋白和D-木糖含量、養(yǎng)分表觀消化率和空腸消化吸收酶活性均顯著降低。日糧添加0.12%蛋氨酸顯著降低IUGR斷奶仔豬血漿尿素氮含量,顯著升高血漿D-木糖含量,并顯著緩解IUGR介導(dǎo)斷奶仔豬粗蛋白表觀消化率、空腸食糜胰蛋白酶活性和Na+-K+-ATP酶活性降低。上述結(jié)果提示,日糧添加蛋氨酸可在一定程度上緩解IUGR對(duì)斷奶仔豬腸道消化吸收功能的不良影響。本研究進(jìn)一步豐富了蛋氨酸在促進(jìn)腸道消化吸收功能的積極作用,也為建立IUGR后代營養(yǎng)干預(yù)方法提供新的思路和理論依據(jù)。
[1]Valsamakis G,Kanaka-Gantenbein C,Malamitsi-Puchner A,et al. Causes of intrauterine growth restriction and the postnatal development of the metabolic syndrome[J]. Annals of the New York Academy of Sciences,2006,1092:138-147.
[2]Mandruzzato G,Antsaklis A,Botet F,et al. Intrauterine restriction(IUGR)[J]. Journal of Perinatal Medicine,2008,36(4):277-281.
[3]Bamfo J E,Odibo A O. Diagnosis and management of fetal growth restriction[J]. Journal of pregnancy,2011,2011:640715.
[4]Wu G. Intestinal mucosal amino acid catabolism[J]. Journal of Nutrition,1998,128(8):1249-1252.
[5]Zhang L L,Zhang H,Li Y,et al. Effects of medium-chain triglycerides on intestinal morphology and energy metabolism of intrauterine growth retarded weanling piglets[J]. Archives of Animal Nutrition,2017,71(3):231-245.
[6]Dong L,Zhong X,He J T,et al. Supplementation of tributyrin improves the growth and intestinal digestive and barrier functions in intrauterine growth-restricted piglets[J]. Clinical Nutrition,2016,35(2):399-407.
[7]Wang W W,Qiao S Y,Li D F. Amino acids and gut function[J]. Amino Acids,2009,37(1):105-110.
[8]Mastrototaro L,Sponder G,Saremi B,et al. Gastrointestinal methionine shuttle:Priority handling of precious goods[J]. IUBMB Life,2016,68(12):924-934.
[9]Métayer S,Seiliez I,Collin A,et al. Mechanisms through which sulfur amino acids control protein metabolism and oxidative status[J]. Journal of Nutritional Biochemistry,2008,19(4):207-215.
[10]Fang Z F,Yao K,Zhang X L,et al. Nutrition and health relevant regulation of intestinal sulfur amino acid metabolism[J]. Amino Acids,2010,39(3):633-640.
[11]Bauchart-Thevret C,Stoll B,Chacko S,et al. Sulfur amino acid deficiency upregulates intestinal methionine cycle activity and suppresses epithelial growth in neonatal pigs[J]. American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism,2009,296(6):E1239-1250.
[12]Ferenc K,Pietrzak P,Godlewski M M,et al. Intrauterine growth retarded piglet as a model for humans-Studies on the perinatal development of the gut structure and function[J]. Reproductive Biology,2014,14(1):51-60.
[13]Wang T,Huo Y J,Shi F X,et al. Effects of intrauterine growth retardation on development of the gastrointestinal tract in neonatal pigs[J]. Biology of the Neonate,2005,88(1):66-72.
[14]D’Inca R,Kloareg M,Gras-Le Guen C,et al. Intrauterine growth restriction modifies the developmental pattern of intestinal structure,transcriptomic profile,and bacterial colonization in neonatal pigs[J]. Journal of Nutrition,2010,140(5):925-931.
[15]National Research Council. Nutrient requirements of swine. 11th ed[S]. Washington,DC.:National Academy Press,2012.
[16]張麗英. 飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)(第2版)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2003:13-94.
[17]范澤,李靜輝,王安琪,等. 飼料中木薯淀粉添加水平對(duì)鯉生長性能、消化能力及糖代謝的影響[J]. 動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(12):4044-4053.
[18]Coma J,Carrion D,Zimmerman D R. Use of plasma urea nitrogen as a rapid response criterion to determine the lysine requirement of pigs[J]. Journal of Animal Science,1995,73(2):472-481.
[19]王遠(yuǎn)孝. IUGR豬的生長與腸道發(fā)育及L-精氨酸和大豆卵磷脂的營養(yǎng)調(diào)控研究[D]. 南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2011:52-60.
[20]Brown J A,Cline T R. Urea excretion in the pig:an indicator of protein quality and amino acid requirements[J]. Journal of Nutrition,1974,104(5):542-545.
[21]Tian Q Y,Zeng Z K,Zhang Y X,et al. Effect of L-or DL-methionine supplementation on nitrogen retention,serum amino acid concentrations and blood metabolites profile in starter pigs[J]. Asian Australasian Journal of Animal Sciences,2016,29(5):689-694.
[22]Greenwood P L,Hunt A S,Hermanson J W,et al. Effects of birth weight and postnatal nutrition on neonatal sheep:I. Body growth and composition,and some aspects of energetic efficiency[J]. Journal of Animal Science,1998,76(9):2354-2367.
[23]Bauchart-Thevret C,Stoll B,Burrin D G. Intestinal metabolism of sulfur amino acids[J]. Nutrition Research Reviews,2009,22(2):175-187.
[24]Shoveller A K,Stoll B,Ball R O,et al. Nutritional and functional importance of intestinal sulfur amino acid metabolism[J]. Journal of Nutrition,2005,135(7):1609-1612.
[25]陳穎,樸香淑,趙泮峰,等. 評(píng)估L-蛋氨酸的有效性及標(biāo)準(zhǔn)回腸可消化蛋氨酸水平對(duì)斷奶仔豬生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及血漿參數(shù)的影響[J]. 動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(10):2430-2439.
[26]帥柯. 蛋氨酸對(duì)幼建鯉消化功能和免疫功能的影響[D]. 雅安:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2006:28-63.
[27]Haeney M R,Culank L S,Montgomery R D,et al. Evaluation of xylose absorption as measured in blood and urine:a one-hour blood xylose screening test in malabsorption[J]. Gastroenterology,1978,75(3):393-400.
[28]Malagelada J R,Linscheer W G,Fishman W H. The effect of fatty acid perfusion on intestinal alkaline phosphatase. II. Studies on the rat[J]. The American journal of digestive diseases,1977,22(6):516-523.
[29]Roubaty C,Portmann P. Relation between intestinal alkaline phosphatase activity and brush border membrane transport of inorganic phosphate,D-glucose,and D-glucose-6-phosphate[J].Pflügers Archiv:European Journal of Physiology,1988,412(5):482-490.
[30]Wild G E,Thompson J A,Searles L,et al. Small intestinal Na+,K+-adenosine triphosphatase activity and gene expression in experimental diabetes mellitus[J]. Digestive Diseases and Sciences,1999,44(2):407-414.
[31]Charney A N,Donowitz M. Functional significance of intestinal Na+-K+-ATPase:invivoouabain inhibition[J]. American Journal of Physiology,1978,234(6):E629-636.
[32]黃強(qiáng),白凱文,徐穩(wěn),等. 日糧添加亮氨酸對(duì)宮內(nèi)發(fā)育遲緩斷奶仔豬小腸葡萄糖吸收和能量代謝的影響[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2017,40(2):339-345.
Effectsofmethionineonplasmabiochemicalparametersandintestinaldigestiveandabsorptivefunctioninintrauterinegrowth-retardedweanlingpiglets
SUWei-peng,ZHANGHao,YINGZhi-xiong,LIYue,ZHOULe,ZHANGLi-li,WANGTian*
(College of Animal Science and Technology,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)
Objective:The aim of this study was to investigate the effects of methionine on plasma biochemical parameters and intestinal digestive and absorptive function in weanling piglets with intrauterine growth retardation(IUGR). Methods:After weaning(21 d of postnatal age),thirty female normal birth weight(NBW)piglets were assigned to receive the control diet(NBW-CON),and sixty same-sex IUGR piglets were randomly assigned to receive the control diet(IUGR-CON)or the control diet supplemented with 0.12% methionine(IUGR-MET)for 28 d,each group consisted of six replicates with five piglets per replicate. Results:Compared with NBW-CON piglets,the plasma urea nitrogen content of piglets in IUGR-CON group was increased,whereas the plasma total protein andD-xylose contents were significantly decreased(p<0.05). In addition,the apparent digestibility of crude protein and gross energy,the activity of trypsin in the jejunal digesta,and the activities of alkaline phosphatase and Na+-K+-ATPase in the jejunal mucosa of piglets in IUGR-CON group were also significantly decreased(p<0.05). Compared with piglets in IUGR-CON group,IUGR-MET piglets had decreased plasma urea nitrogen content,whereas increased plasmaD-xylose content(p<0.05). Dietary supplementation of 0.12% methionine significantly alleviated the decreased apparent digestibility of crude protein,the activity of trypsin in jejunal digesta,and the activity of Na+-K+-ATPase in jejunal mucosa(p<0.05). Conclusion:Dietary supplementation of 0.12% methionine significantly decreased plasma urea nitrogen content and partially improved digestive and absorptive function in the intestine of IUGR weanling piglets.
methionine;intrauterine growth retardation;weanling piglets;intestine;digestive and absorptive function
TS201.4
A
1002-0306(2017)19-0298-06
10.13386/j.issn1002-0306.2017.19.055
2017-05-08
蘇偉鵬(1993-),男,碩士研究生,研究方向:動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué),E-mail:weipengsu@126.com。
*通訊作者:王恬(1958-),男,博士,教授,研究方向:動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué),E-mail:twang18@163.com。
國家自然科學(xué)基金(31572418);江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程二期項(xiàng)目。