劉振庫張雪張浩*

（1.長春市種子管理站吉林·長春1300332.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院吉林·長春130118）

氰霜唑和咯菌腈在番茄上降解規(guī)律研究

劉振庫1張雪2張浩2*

（1.長春市種子管理站吉林·長春1300332.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院吉林·長春130118）

采用液相色譜法，研究了氰霜唑和咯菌腈在番茄的降解規(guī)律。結(jié)果表明氰霜唑在番茄上的平均回收率為84.42%～96.44，變異系數(shù)為5.78%～6.82%；咯菌腈在番茄上的平均回收率為81.85%～92.43%，變異系數(shù)為3.68%～7.90%。符合農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。氰霜唑和咯菌腈在番茄上施藥7天后，其殘留量分別為0.39mg/kg和0.26mg/kg，小于歐盟最新食品農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)0.5mg/kg。

氰霜唑；咯菌腈；番茄；降解動(dòng)態(tài)

氰霜唑（cyazofamid），化學(xué)名稱：4-氯-2-氰-N，N-二甲基-5-p-甲苯基咪唑-1-磺胺、4-氯-2-氰-N，N-二甲基-5-（4-甲基苯基）-1H-咪唑-1-磺胺，中文商品名為科佳，是一種氰基咪唑類高效保護(hù)性殺菌劑，對(duì)霜霉病、疫霉病等卵菌綱病害有很好的防治效果.還可以用于水果采后處理，防治貯藏期病害。它具有很好的保護(hù)作用和一定的內(nèi)吸治療活性，持效期長，耐雨水沖刷，使用安全、方便[1-2]。

咯菌腈（Fludioxonil），化學(xué)名稱：2-[4-(二氟甲氧基)苯基]-3-甲基丁酸-氰基-(3-苯氧基苯基)甲基酯，中文商品名：適樂時(shí)，為吡咯類殺菌劑,用量少，效果好，低殘留。通過抑制葡萄糖磷酰化有關(guān)的轉(zhuǎn)移，來抑制病原菌絲體生長，最終導(dǎo)致病菌的死亡[3]。本實(shí)驗(yàn)建立氰霜唑和咯菌腈在番茄的殘留檢測(cè)方法，對(duì)氰霜唑和咯菌腈在番茄上降解規(guī)律進(jìn)行研究,對(duì)保證蔬菜安全具有重要的意義[3]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

番茄品種為東農(nóng)704；40%氰霜唑·咯菌腈WP（吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥實(shí)驗(yàn)室提供）。

95%氰霜唑TC（諾農(nóng)（北京）國際生物技術(shù)公司）；97%咯菌睛原藥（河北冠龍農(nóng)化有限公司）；色譜級(jí)甲醇（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；分析級(jí)乙腈、二氯乙烷、乙酸乙酯、氯化鈉、無水硫酸鈉等（北京化工廠）；弗羅里硅土（P.R.DIKMAPURE.USA）。

1.2 儀器與設(shè)備

安捷倫1260高效液相色譜儀（美國安捷倫公司），DS-1型高速組織搗碎機(jī)（上海標(biāo)本模型廠），SHA-C水浴恒溫振蕩器（常州市華普達(dá)教學(xué)儀器有限公司），SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵（上海亞榮生化儀器廠），RE-2000A真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生儀器廠），ME104E型電子天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司），UV-2450型紫外可見光光度計(jì)（日本島津公司）等。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取0.1053g氰霜唑標(biāo)準(zhǔn)品和0.1031g咯菌腈標(biāo)準(zhǔn)品將其配置成1000mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)甲醇逐級(jí)稀釋，配置成質(zhì)量濃度分別為0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2、5mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.3.2 氰霜唑和咯菌腈在番茄上消解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)

試驗(yàn)在吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)科學(xué)試驗(yàn)站溫室進(jìn)行，40%氰霜唑·咯菌腈WP150g.a.i/hm2，當(dāng)番茄長至整體一半時(shí)施藥，共施藥3次，施藥間隔期為7d，對(duì)照空白區(qū)，每個(gè)區(qū)3次重復(fù)，試驗(yàn)面積大約為15m2。在施藥2h之內(nèi)、1、3、5、7、14d采集番茄樣品。同時(shí)采集空白樣品，樣品的采集(在小區(qū)內(nèi)按隨機(jī)方法按上、下、左、右不同部位采集，取樣無病蟲害的番茄，充分混勻后將500g裝入密封袋內(nèi)，貼上標(biāo)簽，放到－20℃冰箱中待測(cè)[4-5]。

1.3.3 試樣分析

樣品提取：準(zhǔn)確稱取番茄樣品20g（±0.01g）放到250mL燒杯內(nèi)，倒入80mL乙腈，經(jīng)組織搗碎勻漿2min，倒入布氏漏斗內(nèi)抽濾，濾液轉(zhuǎn)入放有8～10g氯化鈉的具塞量筒中，上下震蕩150次，靜止1min后，再搖100次，靜止120min以上，待乙腈和水完全分離，取上層40mL至40℃水浴上旋轉(zhuǎn)濃縮近干，氮吹吹干，備凈化用[6-7]。

樣品的凈化：在玻璃層析柱內(nèi)由下至上加入2cm厚的無水Na2SO4，5g中性Al2O3，2cm厚的無水Na2SO4，用20mL石油醚淋洗凈化柱子后倒入上述樣品濃縮液，再用3mL×3次石油醚淋洗凈化柱中進(jìn)，最后用20mL石油醚/二氯甲烷（V1∶V2=3∶2）淋洗凈化柱中，收集全部淋洗液至40℃水浴上旋轉(zhuǎn)濃縮近干，氮吹吹干，用2mL甲醇定容，待測(cè)[8-9]。

檢測(cè)條件：

流動(dòng)相：乙腈體積：0.1%甲酸水溶液體積=70∶30（V、V）；流速：0.5mL/min；檢測(cè)波長：215nm；進(jìn)樣量：10μL；檢測(cè)器：VWD；色譜柱：SB-C18柱（4.6×150mm，5μm）。柱溫：30℃。

2 結(jié)果與討論

2.1 分析方法的線性相關(guān)測(cè)定

在上述確定的色譜條件下，由氰霜唑和咯菌腈標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液用甲醇稀釋成0.01、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2、5mg/kg的混合標(biāo)樣溶液，進(jìn)樣10μL，測(cè)得的峰面積與對(duì)應(yīng)的氰霜唑和咯菌腈標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，氰霜唑和咯菌腈在進(jìn)樣濃度0.01～5mg/kg范圍內(nèi)和峰面積之間呈良好的線性關(guān)系，直線回歸方程分別為y=106.44x-5.5875，R=0.9986；y=118.12x-2.2042，R=0.9998，最低檢測(cè)限均為0.002mg/kg。

2.2 方法的準(zhǔn)確度、精密度及回收率

在空白樣中添加已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品，在上述的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，在空白番茄添加0.05、0.5、1.00mg/kg氰霜標(biāo)準(zhǔn)品和0.02、0.05、0.1mg/kg的咯菌腈標(biāo)準(zhǔn)品，結(jié)果表明（見表1）氰霜唑在番茄中的平均回收率為84.42%～96.44%，變異系數(shù)為5.78%～6.82%；咯菌腈在番茄中的平均回收率為81.85%～92.43%，變異系數(shù)為3.68%～7.90%。本方法對(duì)番茄中氰霜唑和咯菌腈農(nóng)藥殘留的測(cè)定靈敏度高、操作簡單、方法的準(zhǔn)確度符合農(nóng)藥殘留要求[10]。

表1 氰霜唑和咯菌腈在番茄中的添加回收率Tab.1Recovery of cyazofamidand and fludioxonil in tomato

2.3 氰霜唑和咯菌腈在番茄中的消解動(dòng)態(tài)

氰霜唑和咯菌腈在番茄中殘留檢測(cè)結(jié)果見表2，從表2可以看出可，氰霜唑在番茄中的原始沉積量為2.12mg/kg，7天后其殘留量為0.39mg/kg，咯菌腈在番茄中的原始沉積量為1.37mg/kg，7天后其殘留量為0.26mg/kg，而氰霜唑和咯菌腈在歐盟最新食品農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)為0.5mg/kg，說明氰霜唑和咯菌腈在番茄上是可以安全使用的。

表2 氰霜唑和咯菌腈在番茄中的監(jiān)測(cè)殘留結(jié)果Tab.2The residues monitoring ofcyazofamidandfludioxonil in tomato

3 結(jié)論與討論

40%氰霜唑·咯菌腈WP是新型復(fù)合殺菌劑，主要防治晚疫病、白粉病、灰霉病等，并且高效低毒，適合實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用。本文建立了檢測(cè)氰霜唑和咯菌腈混劑的殘留分析方法，結(jié)果表明，氰霜唑在番茄中的平均回收率為84.42%～96.44%；咯菌腈在番茄中的平均回收率為81.85%～92.43%。該方法的，精密度、準(zhǔn)確度等均符合農(nóng)藥殘留分析要求。

殘留檢測(cè)結(jié)果表明，40%氰霜唑·咯菌腈在番茄中的殘留原始沉積量分別為2.12和1.37mg/kg，七天后氰霜唑和咯菌腈在番茄中的殘留量分別達(dá)到0.39、0.26mg/kg，我國尚未對(duì)番茄中氰霜唑和咯菌腈最大殘留量進(jìn)行規(guī)定，依照歐盟殘留標(biāo)準(zhǔn)氰霜唑和咯菌腈的最大殘留量均為0.5mg/kg，均小于歐盟規(guī)定最大殘留量（0.5mg/kg），說明40%氰霜唑·咯菌腈新型復(fù)配殺菌劑在高劑量150g.a.i/hm2下使用，七天后番茄可采摘食用，按照推薦施藥量使用不會(huì)對(duì)人類健康有危害，更不會(huì)對(duì)自然環(huán)境存在威脅。本試驗(yàn)的研究對(duì)該農(nóng)藥混劑的使用提供了有利的理論依據(jù)。

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Degradation Kinetics of The cyazofamid and fludioxonil in Tomato Liu Zhenku1，Liu Dan2，Zhang Hao2*

（1.Changchun seed management station，Changchun 130033 Jilin，China 2.College of Resource and Environment，Jilin Agricultural University，Changchun130118，Jilin，China）

A newmethod was developed to detect cyazofamid andfludioxonilresidues in tomato using HPLC with ultraviolet detector. Tomatosampleswereextractedwithacetonitrile,cleanedupbyglasschromatography columnanddetectedbyHighPerformance LiquidChromatography-UltravioletDetector.Therecoveriesof cyazofamidintomatowas84.42%～96.44%，the RSD was 5.78%～6.82%；Therecoveriesoffludioxonilintomatowas81.85%～92.43%，theRSDwas3.68%～7.90%.The methodischaracterizedbyhigh sensitivity，accuracyandexcellentreproducibility.At7days，thefinalresidueamount of TomatowaslowerthanthatoftheMRL inthetomato.

CyazofamidFludioxonilTomatoDegradationkinetics

劉振庫，（1962-），男（漢），主要從事農(nóng)作物品種抗逆性研究與管理

張浩，（1964-），女（漢），教授，博士，主要從事農(nóng)藥環(huán)境毒理研究。

通信地址：（130118）吉林省長春市南關(guān)區(qū)新城大街2888號(hào)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院農(nóng)藥室

長春市國際科技合作計(jì)劃項(xiàng)目(13GH06)（13GH06）。