孫 明 ， 劉巧榮 ， 喬明明 ， 張 謙 ， 陳西釗,2

(1.北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司 ， 北京 海淀 100094 ； 2. 中國動物疫病預(yù)防控制中心 ， 北京 朝陽 100125)

寵物犬感染布魯菌的診斷報告

孫 明1， 劉巧榮1， 喬明明1， 張 謙1， 陳西釗1,2

(1.北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司 ， 北京 海淀 100094 ； 2. 中國動物疫病預(yù)防控制中心 ， 北京 朝陽 100125)

布魯菌病是由布魯菌引起的一種人獸共患傳染病，以侵害生殖系統(tǒng)為主要特征的傳染性疾病。主要表現(xiàn)為睪丸炎、附睪炎、流產(chǎn)、不育等特征。犬種布魯菌屬于粗造型菌株，主要引起犬類發(fā)病，導(dǎo)致母犬流產(chǎn)、公犬睪丸炎等。流產(chǎn)后的母犬常表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜炎，出現(xiàn)屢配不孕。公犬感染后，以睪丸炎、附睪炎、前列腺炎、包皮炎等。潛伏期一般為兩周至半年?，F(xiàn)將1例寵物犬感染布魯菌病的診斷情況報告如下。

1 基本情況

1.1 患犬資料 來自東北某種犬養(yǎng)殖場，犬年齡2歲，性別：公，品種：巨型貴婦犬。

1.2 發(fā)病情況 公犬患病前身體健康，無不良病史。突患睪丸炎。簡單治療后沒有治愈。后與同養(yǎng)殖場一經(jīng)產(chǎn)母犬(之前生產(chǎn)正常)交配，母犬未懷孕。后來母犬又與同場別的公種犬(交配前身體健康)和外借種公犬交配，母犬亦沒懷孕，且兩只公犬亦發(fā)生睪丸炎。半年內(nèi)養(yǎng)殖場大多數(shù)公犬出現(xiàn)睪丸炎癥狀：睪丸紅腫，體積明顯增大，局部增溫、疼痛。陰囊皮膚緊張、發(fā)亮；母犬則發(fā)生不孕。巨型貴婦犬主人懷疑自家犬感染布魯菌，取血送檢，檢測結(jié)果顯示布魯菌抗體陽性。

1.3 病史調(diào)查 養(yǎng)殖場為半封閉性場地，第1只公犬患睪丸炎2月前曾與場外1母犬交配，后期調(diào)查發(fā)現(xiàn)該母犬曾有不孕史，后診斷為布魯菌感染。

2 診斷

2.1 實驗室診斷 采集巨型貴婦犬精液、唾液、血、尿液和陰莖分泌物用北京世紀元亨動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的布魯菌快速熒光試劑盒進行抗原檢測。檢測結(jié)果顯示：唾液和精液為陽性(見圖1)。種型鑒定結(jié)果顯示，此犬感染布魯菌為犬種布魯菌(見圖2)。

2.2 序列測定分析 設(shè)計引物，從精液DNA中擴增OMP25(626 bp)基因和16S rRNA(1 368 bp)基因(擴增結(jié)果見圖3)，連接載體，將鑒定陽性菌送上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司進行測序。測序和同源進化分析結(jié)果顯示，擴增序列是犬種布魯菌序列，并與犬布魯菌xue1(中國)分離株、2010009751(美國)分離株和A52141(韓國)分離株親緣關(guān)系最為接近。

3 討論

當寵物犬公犬患睪丸炎、母犬出現(xiàn)流產(chǎn)、不孕時，一般可以考慮布魯菌感染。布魯菌潛伏期為2周至半年。布魯菌病患犬的排泄物和流產(chǎn)物中可攜帶大量病原菌，成為傳染源[1-2]。另外交配也可以傳染病布魯菌，該報告就是一例由交配傳播引起的案例。

該案例養(yǎng)殖場，最初出現(xiàn)一例布魯菌感染犬，后來出現(xiàn)養(yǎng)殖場內(nèi)大范圍暴發(fā)。究其原因，主要由于與外來布魯菌病感染犬交配引起。起初公犬出現(xiàn)睪丸炎，母犬出現(xiàn)不孕，沒有引起足夠重視，沒有及時隔離發(fā)病犬和健康犬，而是繼續(xù)把發(fā)病犬當作種犬使用，從而導(dǎo)致小范圍內(nèi)暴發(fā)流行。該種犬場在首個公犬出現(xiàn)睪丸炎到全養(yǎng)殖場60%以上的種犬感染布魯菌病僅半年時間，且極可能感染了場外的犬只。故在寵物犬養(yǎng)殖過程中，特別是養(yǎng)犬場，一旦發(fā)現(xiàn)公犬睪丸炎，母犬流產(chǎn)、屢配不孕等癥狀時，應(yīng)及時隔離病犬和與其接觸犬，并采集樣品進行布魯菌檢測，確診后，立刻上報動物檢疫部門，并對患犬進行無公害化處理，同時對污染場地徹底消毒處理[3-4]。以盡可能的減少傳播，以及由此帶來的經(jīng)濟損失。

圖1 布魯菌快速熒光PCR檢測

1：陽對； 2：精液； 3:唾液； 4:血； 5:尿液； 6：陰莖分泌物； 7：陰性對照

圖2 犬布魯菌種型鑒定

1：陽對； 2：精液； 3：唾液； 4：陰對

圖3 從精液中擴增OMP25和16S rRNA 基因1：OMP25基因； 2：16S rRNA 基因； M：DNA Marker

4 小結(jié)

本文用布魯菌快速熒光試劑盒對一例患睪丸炎犬進行了布魯菌初步檢測，并進一步通過序列測定對其進行確診。序列同源進化分析顯示，該株犬布魯菌與中國的犬布魯菌xue1分離株、美國的犬布魯菌2010009751分離株和韓國的犬布魯菌A52141分離株親緣關(guān)系最為接近。

犬只可以通過交配傳播布魯菌病，管理不當會引起布魯菌病的暴發(fā)流行。故養(yǎng)殖場，特別是種犬場一定要加強安全防范管理。

[1] 王寧，韓吉壽，呂艷麗，等.北京地區(qū)寵物犬布魯氏菌的分離與鑒定[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2014，36(6)：490-492.

[2] 王傳清，李星.布魯氏菌病的流行和研究現(xiàn)狀及防控策略[J].中國動物檢疫，2009，26(6)：63-65.

[3] 殷文武，孫輝.中國布魯氏菌病疫情形勢及對策建議[J].疾病監(jiān)測，2009，24(7)：475-477

[4] 鄭連湖.布氏桿菌病的檢疫及處理辦法[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2014，30(6)：99.

S858.292

B

0529-6005(2017)09-0048-02

2017-07-10

“十三五”國家重點研究計劃(2016YFD0501006)

孫明(1963-)，男，博士，主要從事分子病毒診斷技術(shù)研究，E-mail: sunming@anheal.com

陳西釗，E-mail: chenxizhao@anheal.com