黃蘭淇，陳 秀，張正煒，占繡萍，馬 琳

?

噻嗪酮在稻米中殘留分析方法研究

黃蘭淇，陳 秀，張正煒，占繡萍，馬 琳

(上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心，上海 201103)

建立了稻米中噻嗪酮?dú)埩袅扛咝б合嗌V-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法。在樣品中加入乙腈，勻漿提取，經(jīng)改進(jìn)的QuEChERS方法凈化后過(guò)膜上機(jī)。以甲醇和水(含0.1%甲酸)為流動(dòng)相梯度洗脫，電噴霧正離子(ESI+)模式電離，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式檢測(cè)，外標(biāo)法定量。噻嗪酮在0.01~1.0 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)()≥0.999；糙米中噻嗪酮回收率為89.02%~94.85%，變異系數(shù)為4.43%~5.92%；谷殼中噻嗪酮回收率為87.02%~94.35%，變異系數(shù)為0.37%~4.16%。最小檢出量為2×10－11g，最小檢出濃度為0.01 mg/L。該方法操作簡(jiǎn)單，快速，準(zhǔn)確，滿足農(nóng)藥殘留分析要求。

噻嗪酮；稻米；殘留；LC-MS/MS

噻嗪酮是噻二嗪類昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，對(duì)飛虱、葉嬋有特效，具有高活性、高選擇性、長(zhǎng)殘效期的特點(diǎn)，在水稻種植過(guò)程中使用廣泛，主要防治水稻葉嬋、飛虱等害蟲(chóng)[1-2]。噻嗪酮的檢測(cè)方法主要有氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用和氣相色譜法[3-4]。國(guó)內(nèi)對(duì)于噻嗪酮的檢測(cè)已有報(bào)道，胡連英[5]等以丙酮為提取液，經(jīng)過(guò)濾、減壓、濃縮后正己烷萃取3次，氣相色譜儀測(cè)定大米中噻嗪酮?dú)埩袅?。劉檀[6]等以乙腈作為提取液，經(jīng)氨基固相萃取小柱凈化，以彈性石英玻璃毛細(xì)管柱為分離柱，用氣相色譜電子俘獲檢測(cè)器測(cè)定大米中噻嗪酮的殘留量。汪芙蓉等[7]采用氯仿/丙酮(體積比2︰1)超聲提取，丙酮定容后經(jīng)氣相色譜電子捕獲器檢測(cè)。張永忠等[8]以乙腈為提取液，氨基固相萃取小柱萃取凈化后經(jīng)氣相色譜電子捕獲器檢測(cè)。以上文獻(xiàn)方法存在提取、凈化步驟繁瑣，所用溶劑多，時(shí)間長(zhǎng)等問(wèn)題，因此本文旨在建立一種科學(xué)、快速、簡(jiǎn)便的，同時(shí)能達(dá)到定性和定量要求，滿足批量稻米中噻嗪酮快速檢測(cè)要求的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備與試劑

Agilent 6460 三重四級(jí)桿液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Aglient公司)；勻漿機(jī)IKA T25(德國(guó)IKA公司)；旋渦混合器TYXH-Ⅱ(上海比朗儀器有限公司)；離心機(jī)TDL-5-A(上海安亭科學(xué)儀器廠)；Milli-Q Advantage A10 (美國(guó)Millipore公司)。

噻蟲(chóng)嗪標(biāo)準(zhǔn)品(純度為98.6%，上海市農(nóng)藥研究所)；C18(博納艾杰爾公司)；PSA(美國(guó)Aglient公司)；硫酸鎂(德國(guó)CNW科技公司)；乙腈、甲醇均為色譜級(jí)(霍尼韋爾公司)

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 儀器條件

液相色譜條件：色譜柱：Poroshell 120 EC-C18(3.0 mm×100 mm，2.7 m)；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：2.0 μL；流動(dòng)相：A相為純水(含0.1%甲酸)；B相為甲醇；流速：0.4 mL/min；梯度洗脫程序：0~2.0 min，10%B~80%B；2~3 min，80%B~90%B；3~5 min，90%B~95%B；6 min，95%B。

質(zhì)譜條件：離子源：可加熱的ESI源；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；掃描模式：正離子掃描；進(jìn)樣體積：2 μL；干燥氣溫度：300℃；干燥氣流量：7 mL/min；霧化氣壓力：0.28 Mpa；鞘氣溫度：350 ℃；鞘氣流量：11 mL/min；其他質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

表1 質(zhì)譜采集離子信息

注：*該離子用于定量

1.2.2 樣品前處理

1.2.2.1 樣品提取

分別稱取10 g糙米/谷殼樣品至50 mL離心管中，加入40 mL乙腈，在勻漿機(jī)中高速勻漿1 min，再離心2 min后靜置，制成待測(cè)液。

1.2.2.2 樣品凈化

采用改進(jìn)的QuEChERS方法，取4 mL待測(cè)液加入到裝有300 mg MgSO4，100 mg PSA和100 mg C18的離心管中，渦旋1 min后離心，取3 mL濃縮至近干，用甲醇定容至750 μL，待測(cè)。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確稱取噻嗪酮標(biāo)準(zhǔn)品10 mg(精確至0.01 mg)，用甲醇溶解并定容至10 mL，配成質(zhì)量濃度1 000 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)母液。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：取適量的標(biāo)準(zhǔn)母液用甲醇稀釋成0.01~1.0 mg/L一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，上機(jī)檢測(cè)。以每個(gè)濃度測(cè)得的峰面積為縱坐標(biāo)，相對(duì)應(yīng)的噻嗪酮標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

在0.01~1.0 mg/L濃度時(shí)，噻嗪酮峰面積與濃度呈良好線性關(guān)系(圖1)，線性方程=1E+06+82 224，相關(guān)系數(shù)()≥0.999。最低檢測(cè)濃度為0.01 mg/L，該方法下噻嗪酮標(biāo)樣保留時(shí)間為4.90 min，色譜圖如圖2所示。

圖1 噻嗪酮標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 0.01 mg/L噻嗪酮標(biāo)樣

2.2 提取條件優(yōu)化

2.2.1 提取溶劑的選擇

參考現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道[6,9]，結(jié)合QuEChERS方法常用提取溶劑[10]，本文亦采用乙腈作為提取溶劑。

2.2.2 提取方法的選擇

對(duì)比文獻(xiàn)報(bào)道[6]，本文采用攪拌勻漿1 min提取方式。糙米和谷殼中添加0.1 mg/L噻嗪酮，由表4可以看出，回收率和變異系數(shù)都滿足試驗(yàn)要求，且提取時(shí)間更短。

2.3 凈化方法優(yōu)化

空白樣品中添加噻嗪酮濃度為1 mg/L，糙米和谷殼提取液分別采用改進(jìn)的QuEChERS(見(jiàn)1.2.2.2)和氨基固相萃取小柱2種凈化方法，對(duì)比添加回收率(表2、3)，結(jié)果表明在改進(jìn)的QuEChERS凈化方法下糙米和谷殼提取液回收率較好，且變異系數(shù)滿足試驗(yàn)要求，因此本文選擇改進(jìn)的QuEChERS方法凈化。

表2 不同凈化方法對(duì)糙米中噻嗪酮回收率影響

表3 不同凈化方法對(duì)谷殼中噻嗪酮回收率影響

2.4 添加回收率

采用空白樣品添加標(biāo)準(zhǔn)溶液方法，分別向糙米和谷殼中添加一定體積的噻嗪酮工作溶液，使其濃度為0.01、0.1、1.0 mg/L。采用優(yōu)化后建立的條件進(jìn)行提取、凈化、測(cè)定，結(jié)果為在添加濃度范圍內(nèi)，糙米中噻嗪酮回收率為89.02%~ 94.85%，變異系數(shù)為4.43%~5.92%；谷殼中噻嗪酮回收率為87.02%~94.35%，變異系數(shù)為0.37%~4.16%(表4)。這表明該方法可以達(dá)到農(nóng)藥殘留分析要求。圖3為糙米和谷殼中噻嗪酮添加濃度為0.01 mg/L回收樣品色譜圖。

表4 糙米和谷殼樣品中噻嗪酮添加回收結(jié)果

圖3 谷殼(A)、糙米(B)中噻嗪酮0.01 mg/L添加回收譜圖

3 結(jié) 論

本文建立了稻米中噻嗪酮?dú)埩袅靠焖俑咝б合嗌V-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法。以乙腈作為提取溶劑，采用攪拌勻漿1 min的提取方式，經(jīng)改進(jìn)的QuEChERS方法凈化后過(guò)膜上機(jī)，糙米和谷殼中噻嗪酮回收率和變異系數(shù)均符合試驗(yàn)要求。本方法具有操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確，分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，滿足快速檢測(cè)稻米中噻嗪酮?dú)埩舴治鲆蟆?/p>

[1] 化工部農(nóng)藥信息總站．國(guó)外農(nóng)藥品種手冊(cè)[M]. 沈陽(yáng): 化工出版社, 1996.

[2] 韓熹萊．中國(guó)農(nóng)業(yè)百科全書(shū): 農(nóng)藥卷[M]. 北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 1993.

[3] NISHIZAWA H,SHIGEMURA M,SUZUKI T,. Simple cleanup procedure for analysis of buprofezin residues and its metabolite in crops by gas chromatography[J]. Journal of AOAC International, 1994, 77: 1631－1633.

[4] SANTOS TF,AQUINO A,DOREA HS,. MSPD procedure for determining buprofezin,tetradifon, vinclozolin and bifenthrin residues in propolis by gas chromatography mass－spectrometry[J]. An-alytical and Bioanalytical Chemistry, 2008, 390: 1425－1430.

[5] 胡蓮英. 氣相色譜法測(cè)定噻嗪酮在水稻中的殘留量[J]. 農(nóng)藥, 1988, 31(1): 43.

[6] 劉檀, 任紅波, 陳國(guó)峰, 等. 大米中吡蟲(chóng)啉和噻嗪酮?dú)埩舴治龇椒╗J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào), 2012, 27(2): 118－121, 128.

[7] 汪芙蓉, 張家俊, 吳萍, 等. 噻嗪酮—烯啶蟲(chóng)胺在水稻田樣品中的殘留檢測(cè)方法[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 36(6): 128－134.

[8] 張永忠, 劉檀, 任紅波, 等. 16%吡蟲(chóng)啉·噻嗪酮可濕性粉劑在水稻田中的殘留動(dòng)態(tài)研究[J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 44(4): 88－93.

[9] ANASTASSIADES M, LEHOTAY S J, STAJNBAHER D,Fast and easy multiresidue methodemploy-ing acetonitrile extraction/ partitioning and "dispersivesolid-phase extraction" for the determination of pesticide residues in produce[J]. Journal of Aoac International, 2003, 86(2): 412－431.

[10] 高陽(yáng), 徐應(yīng)明, 孫揚(yáng), 等. QuEChERS提取法在農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境學(xué)報(bào), 2014, 31(2): 110－117.

The Analytical Method Study of Buprofezin Residues in Rice

HUANG Lanqi, CHEN Xiu, ZHANG Zhengwei，ZHAN Xiuping, MA Lin

(Shanghai Agriculture Technology Extension & Service Center, Shanghai 2017, China )

A method was established for the residue determination of buprofezin in rice by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS).Buprofezin was extracted by acetonitrile with homogenizedmixing, purified with improved QuEChERS method, filtered through 0.22 μm of organic membrane and injected into LC-MS/MS. The analyte was separated with the mobile phases of water and methanol (containing 0.1% formic acid), detected by MS/MS with positive electrospray ionization (ESI+) in multiple reaction monitoring (MRM) mode, and quantified by external standard method. The correlation coefficient () of buprofezin was not lower than 0.999 in the concentration of 0.01~1.0 mg/L. The average recoveries and coefficient of variations were 89.02%~94.85%, 4.43%~5.92% forrice, and 87.02%~94.35%, 0.37%~4.16% for husk of rice. The minimum detectable amount and concentration was 2×10－11g and 0.01 mg/L. The method is easy, fast and accurate, and meets the requirements of residue analysis of pesticide.

buprofezin; rice; residue; LC-MS/MS

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.05.10

TQ450.7

A

1009-6485(2017)05-0050-04

黃蘭淇(1987—)，女，黑龍江人，農(nóng)藝師，碩士，主要從事農(nóng)藥殘留分析。E-mail: huanglanqi0208@126.com。

2017-06-02。