徐福平+張棟武+羅家怡+陳惠敏

【摘要】 目的：探討中醫(yī)治療對弱精癥患者精子活動力及精子DNA碎片率的影響。方法：選擇弱精癥患者120例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，對照組單純采用中醫(yī)治療，試驗組在對照組治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合臍療施治。治療前和治療1、2個療程后均檢測前向運動精子率（PR）、精液濃度、精子活率、DNA碎片率（DFI）以及精漿生化中的α-糖苷酶、果糖、精漿鋅（Zn）、精漿酸性磷酸酶（ACP）等指標(biāo)。結(jié)果：治療后，兩組患者精漿生化指標(biāo)較治療前均有顯著改善（P<0.01），其中試驗組與對照組比較改善更明顯（P<0.05）。治療2個療程后，兩組患者PR、精液濃度、精子活率、DFI方面均改善顯著（P<0.01），其中試驗組在治療1個療程后PR和精子活率均有顯著改善（P<0.01），而對照組需要延續(xù)到2個療程后才能看到精子情況的改善，并且改善程度不如同樣是治療2個療程的試驗組。結(jié)論：增嗣衍宗丸膠囊能有效治療弱精癥，但在聯(lián)合臍療施治的情況下對改善弱精癥患者精子活動力效果更顯著。

【關(guān)鍵詞】 中醫(yī)； 臍療； 弱精癥； 精子活動力； DNA碎片

【Abstract】 Objective：To explore the effect of traditional Chinese Medicine on sperm motility and the rate of DNA fragmentation in the patients with asthenospermia.Method：A total of 120 patients were selected and randomly divided into two groups，the control group was treated only with traditional Chinese Medicine，on the base of the control group the experimental group was given navel therapy.Before and after the treatment of 1，2 courses were detected before and after treatment，the rate of forward motile sperm（PR），sperm concentration，sperm motility，DNA fragmentation rate（DFI） and seminal plasma biochemistry of alpha glucosidase，fructose，Zn，ACP and other indicators.Result：After treatment，seminal plasma biochemical indicators of two groups were significantly improved than those of before treatment（P<0.01），the experimental group and the control group were significantly improved （P<0.05）.After 2 courses of treatment，PR，sperm concentration，sperm viability，DFI of two groups were improved significantly（P<0.01），the experimental group after 1 course of forward movement of sperm rate and sperm motility were significantly improved（P<0.01），while the control group need to continue after 2 courses to see the improvement in sperm and improve degree.As the same as the experimental group 2 cycles of treatment.Conclusion：Navel therapy can effectively treat asthenospermia，but in the case of combined abdominal acupuncture treatment to improve weak sperm activity in patients with stress effect is more significant.

【Key words】 Traditional Chinese Medicine； Navel therapy； Asthenospermia； Sperm motility； DFI

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.20.022

男性生殖環(huán)節(jié)主要包括男性生殖系統(tǒng)的神經(jīng)內(nèi)分泌條件、睪丸內(nèi)精子的產(chǎn)生、精子在附睪內(nèi)成熟、精子在排出過程中與精囊及前列腺分泌的精漿混合成精液、精子從男性生殖道排出體外并輸送到女性生殖道內(nèi)、精子在女性輸卵管內(nèi)與卵子受精等，該過程環(huán)節(jié)受到損害均可導(dǎo)致男性不育。而治療男性不育又是一個漫長而持久的過程，由于導(dǎo)致男性不育因素復(fù)雜多樣，治療方式千差萬別，還未能形成一套行之有效且為行內(nèi)公認(rèn)的診療常規(guī)。同時，由于治療時間偏長，患者對臨床醫(yī)生的依從性也均影響治療效果，為此依據(jù)中醫(yī)診療男性不育的傳統(tǒng)經(jīng)驗，探索采用“內(nèi)服外灸”相結(jié)合的中醫(yī)療法治療男性弱精癥患者的新方法，以期為該類患者治療帶來幫助。中醫(yī)藥對男性不育癥的治療有較好的臨床療效，顯示出它的優(yōu)勢。中藥的調(diào)節(jié)是一種整體調(diào)節(jié)，療效確切，一般無毒副作用。近年來男性不育的實驗研究也取得了很大進(jìn)展，對闡明不育機(jī)制、探討中醫(yī)藥治療不育機(jī)制具有重要意義。本課題采用前瞻性研究和對照試驗，將治療男性不育患者內(nèi)外機(jī)制聯(lián)合研究，它作為一種研究男性不育癥試探性方法，在國內(nèi)逐步被注意并與現(xiàn)代中醫(yī)理論接軌，其結(jié)果為循證醫(yī)學(xué)提供了有力的證據(jù)，解決了傳統(tǒng)療效標(biāo)準(zhǔn)隨意性較大，不同學(xué)者報道的療效缺乏可比性，尚不能完全反映出臨床的實際情況的缺陷。男性生殖健康的形勢越來越嚴(yán)重，不育癥已經(jīng)成為男科學(xué)家經(jīng)常面臨的臨床問題，患者生活環(huán)境的危險因素中EDS類物質(zhì)如殺蟲劑、重金屬、有機(jī)溶劑和輻射等，對男性生殖細(xì)胞均有直接的細(xì)胞毒作用。研究認(rèn)為：正常育齡夫婦12個月無保護(hù)性交而未能受孕定義為不孕不育癥[1-4]。據(jù)報道，世界范圍內(nèi)有（6000～8000）萬對育齡夫婦患有各種原因引起的不育癥，其中30%～40%是由男性因素所致[2]，而男性不育中精子活動力異常比率占75.4%[3]。我國男性的精液質(zhì)量同樣呈下降趨勢，育齡夫婦不孕不育的發(fā)生率已達(dá)到10%～15%，其中男性因素占55%[4]。而祖國醫(yī)學(xué)對男性不育癥的認(rèn)識己有數(shù)千年的歷史，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為“腎藏精，主生殖”[5-8]。本研究打破傳統(tǒng)單一的治療方法，不僅可作為男性不育患者的診斷和治療依據(jù)，也是生殖生理、男性計劃生育研究的重要課題之一。中醫(yī)研究認(rèn)為：神闕用藥既可激發(fā)經(jīng)絡(luò)之氣，又可通過藥物在局部的吸收，發(fā)揮明顯的藥理作用。聯(lián)合辨證施治，療效顯著。本研究打破傳統(tǒng)單一的治療方法，不僅可作為男性不育患者的診斷和治療依據(jù)，以精液常規(guī)參數(shù)以及DNA碎片率（DFI）為檢測指標(biāo)，并比較患者治療前后精漿中常規(guī)生化變化情況，探討中醫(yī)對弱精癥患者的治療效果，旨在為解決男性弱精問題提高精子活動力的治療途徑，現(xiàn)報道如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為2015年1-12月來本院不育?？凭驮\弱精癥患者120例作為研究對象，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組，每組60例。年齡22～40歲，平均（31.2±3.54）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：夫妻性生活正常、未采取避孕措施且兩年未孕者；死精、少精、弱精等情況導(dǎo)致的不育；每次射精量不少于1 mL不大于6 mL者；各種免疫性不育者。排除標(biāo)準(zhǔn)：先天不育者，包括先天性無精者；后天因生殖系統(tǒng)疾病如結(jié)核等因素導(dǎo)致的不育者；生殖系統(tǒng)畸形者；女方原因?qū)е虏辉姓?；依從性不佳者；或其他原因不能接受正?guī)治療者；生殖道感染、精索靜脈曲張患者。倫理道德要求：所有受試對象均經(jīng)本人同意并簽署知情同意書，經(jīng)過醫(yī)學(xué)倫理道德委員會評定符合要求。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 試劑與儀器 每位受試者于治療前禁欲3～7 d，手淫法采集精液，置于無菌寬口徑杯內(nèi)，以37 ℃水浴孵育，觀察記錄液化時間。液化后采用西班牙SCA計算機(jī)輔助精子質(zhì)量分析系統(tǒng)檢測受試者精液常規(guī)相關(guān)參數(shù)；精子DFI檢測：采用精子核染色質(zhì)擴(kuò)散實驗檢測精子DNA完整性。用精子DNA碎片檢測試劑盒（深圳華康生物醫(yī)學(xué)工程有限公司）對精子染色質(zhì)染色，在相差顯微鏡下計數(shù)400條精子，記錄退化、無暈環(huán)、小暈環(huán)的異常精子數(shù)，算出精子DFI；精漿生化測定：精漿果糖活性測定采用苯二酚法，參考值為0.87～3.95 g/L[9]。α-糖苷酶測定采用葡萄糖氧化酶法，參考值為35.1～87.7 U/mL[10]。精漿鋅（Zn）測定用一種由Johnson和Eliasson的方法改良而成的比色分析法，參考值為0.8～2.5 mmol/L[11]。精漿酸性磷酸酶（ACP）檢測采用常規(guī)磷酸苯二鈉法，參考值為48.8～208.6 U/mL[12]。所有試劑均采購自南京欣迪生物工程公司。

1.3 治療方法 中藥治療處方：采用我國傳統(tǒng)瑰寶處方—“增嗣衍宗丸”以我國傳統(tǒng)重要藥方—被譽為“古今種子第一方”的五子衍宗丸為基礎(chǔ)藥，在此基礎(chǔ)上，增加了可以補腎健脾的枸杞子、人參、淫陽藿、枸杞子、仙靈脾、首烏、黃芪、虎杖、當(dāng)歸、生甘草等幾種名貴中藥組成了增嗣衍宗丸再輔以傳統(tǒng)的臍療，從腎、肝、脾、心、肝，對人體主要臟器進(jìn)行全方位調(diào)理，達(dá)到固腎、強肝、健脾潤肺、去肝氣等作用；臍療能夠讓患者任脈通精氣溢等功效[13]。兩者聯(lián)合治療，能夠讓患者“二八腎氣盛，天癸至，精氣益瀉，陰陽和”，達(dá)到治愈之目的。試驗組采用“增嗣衍宗丸”聯(lián)合臍療辨證施治，對照組單純采用中藥增嗣衍宗丸[14]。對照組按說明書要求服用，1個月為一療程，共2個療程。試驗組采用增嗣衍宗丸聯(lián)合臍療施治，增嗣衍宗丸治療方法同對照組，臍療法采用人參30 g，淫陽藿30 g，菟絲子30 g，陳皮30 g，半夏30 g，云苓30 g，枳實30 g，車前子20 g，麝香1 g，生姜片10～20片，艾炷42壯，如黃豆大，食鹽及麥面粉適量。先將食鹽、麝香分別研細(xì)末分放待用，次將其余諸藥混合，研成細(xì)末，另瓶裝備用。囑患者仰臥床上，首先以溫開水調(diào)麥面粉成面條，將面條繞臍周圍一圈（內(nèi)徑1.2～2寸），然后將食鹽填滿患者臍窩略高1～2 cm，接著取艾炷放于鹽上點燃灸之，連續(xù)灸7壯之后，將臍中食鹽去掉，再取麝香末0.1 g納入患者臍中，再取上藥末填滿臍孔，上鋪生姜，姜片上放艾炷點燃，頻灸14壯，將姜片去掉，外蓋紗布，膠布固定，3 d臍療一次，10次為一療程，聯(lián)合用藥10個療程后統(tǒng)計療效。神闕穴與全身經(jīng)絡(luò)相通，與臟腑相連，神闕用藥既可激發(fā)經(jīng)絡(luò)之氣，又可通過藥物在局部的吸收，發(fā)揮明顯的藥理作用。每組受試者在治療前及每個療程后均檢測前向運動精子率（PR）、精液濃度、精子活率、DNA碎片率（DFI）以及精漿生化中的α-糖苷酶、果糖、Zn、ACP等指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 19.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗。相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后精漿生化指標(biāo)變化 兩組患者治療后與治療前比較，果糖、α-糖苷酶、Zn、ACP等精漿生化指標(biāo)均有顯著改善（P<0.01），其中治療后試驗組與對照組比較，各項指標(biāo)改善更明顯（P<0.05），見表1。

2.2 PR與DFI相關(guān)性分析 弱精癥患者精子DFI與PR百分率成負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為r=-0.546，P<0.01。

2.3 兩組患者治療前及治療1、2個療程后DFI指數(shù)、精液濃度、前向運動精子率以及精子活率的變化情況 治療前兩組各指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。經(jīng)過2個療程治療后，各項指標(biāo)均顯著改善（P<0.01），其中在前向運動精子率指標(biāo)中，試驗組1個療程后就有顯著改善，而對照組2個療程后才能達(dá)到試驗組1個療程的效果。與對照組各項指標(biāo)比較，試驗組的治療對弱精的效果更顯著，而對照組需要更長的治療時間才能達(dá)到試驗組的效果，提示患者對醫(yī)生治療方法的依從性之重要性。見表2。

3 討論

男性不育是一種多因素引起的疾病，其中精子生成與成熟受阻是主要因素，男性不育癥約85%屬于精子生成障礙，表現(xiàn)為精液質(zhì)量異常，精子發(fā)生低下，表現(xiàn)為精子質(zhì)量降低、活力下降、DNA碎片增多，畸形升高等形態(tài)學(xué)改變，其中精漿生化指標(biāo)改變?nèi)绻?、?糖苷酶、ACP等指標(biāo)也都相應(yīng)發(fā)生改變。秦桂娥等[15]研究發(fā)現(xiàn)：精漿果糖與精子活力有幫助，本研究結(jié)果顯示，弱精患者治療前后果糖比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），提示果糖作為精子供能物資對精子質(zhì)量亦存在直接關(guān)聯(lián)，這一結(jié)果與楊險峰等[16]研究之精漿果糖濃度與精子質(zhì)量無直接關(guān)聯(lián)之結(jié)論相左，此爭議點需要行內(nèi)學(xué)者進(jìn)行大數(shù)據(jù)前瞻性實驗來證實。精漿α-葡萄糖苷酶是一種蛋白酶，它能水解卵透明帶糖蛋白，精子由此獲能并穿過卵丘再穿過透明帶，達(dá)到精子與卵子融合，它還能促使生殖道中激肽釋放[17-20]，從而增強精子的活力和促進(jìn)精子的運動，弱精患者α-葡萄糖苷酶經(jīng)過中醫(yī)聯(lián)合治療后，較治療前明顯改善，患者精子活力明顯增強，提示增嗣衍宗丸膠囊聯(lián)合臍療，對弱精患者有明顯幫助，而試驗組較對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），顯示聯(lián)合治療較單純治療效果更加明顯；前列腺酸性磷酸酶（ACP）是一種前列腺外分泌物中能水解磷酸酯的糖蛋白，是前列腺的特征性酶，較其他組織內(nèi)高出甚多，其作用是在酸性環(huán)境下可水解許多磷酸單脂，并將磷酸轉(zhuǎn)移到葡萄糖與果糖上進(jìn)而為精子供能，故此酶與精子能量代謝和運動有關(guān)[20-21]。舒勁松等[23]研究發(fā)現(xiàn)：ACP對雌性鼠妊娠有顯著影響，ACP與精子質(zhì)量關(guān)系密切。本研究顯示，弱精患者治療前后ACP比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），而聯(lián)合治療較單純治療比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），顯示中醫(yī)聯(lián)合臍療較單純中醫(yī)療法更能改善前列腺功能，進(jìn)而對患者精子活力產(chǎn)生積極影響。endprint

精漿鋅含量與精子質(zhì)量關(guān)系研究存在爭議，樊友平[24]報道，男性不育癥患者口服葡萄糖酸鋅片3～6個月后，可在一定程度上提高精子的數(shù)量，但張東梅等[25]分析精漿中鋅含量與精子密度呈正相關(guān)，與精子活力無顯著相關(guān)性，本研究結(jié)論與張東梅的結(jié)論相近但與樊友平的研究結(jié)論相悖，提示精漿鋅對患者精子質(zhì)量影響存在爭議，有待同行做進(jìn)一步大范圍前瞻性研究。

男性生殖健康的形勢越來越嚴(yán)重，不育癥已經(jīng)成為男科學(xué)家經(jīng)常面臨的臨床問題，且近半個世紀(jì)以來，由于環(huán)境、心理、社會等因素的影響，男性精子的數(shù)量和質(zhì)量出現(xiàn)了明顯下降的趨勢，男性生殖健康正受到嚴(yán)重威脅。長期緊張、壓力過大、情感壓抑以及環(huán)境污染、性病蔓延、吸毒、酗酒、過度吸煙等物理和化學(xué)因素造成男性生殖器官睪丸損害，生精功能障礙是導(dǎo)致男性不育的最常見原因。近年來，對弱精癥患者精子DNA損傷率的研究成為男性不育癥的熱點，發(fā)生機(jī)制可能與精子細(xì)胞發(fā)生過程中的凋亡異常、染色質(zhì)組裝異?；蜓趸瘧?yīng)激有關(guān)[16-19]。有學(xué)者研究表明，精子的活動率、前向運動精子率與精子DFI呈顯著的負(fù)相關(guān)（P<0.01）[5-7]。本研究發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)聯(lián)合臍療治療弱精患者較單純中藥治療效果更明顯，尤其是對精子DNA碎片率（DFI）治療效果更佳顯著，顯示中醫(yī)聯(lián)合臍療對弱精患者精子DNA有修復(fù)作用，而DFI的改善提示精子完整性因聯(lián)合治療而得到幫助，這一結(jié)果與前述結(jié)論相近。具體原因可能是精子的運動與精子頭部運動速度相關(guān)，精子的運動方式則主要受尾部擺動方式影響，形成曲線或直線運動，而精子的線粒體是精子運動的主要細(xì)胞器，當(dāng)精子DNA損傷時，可導(dǎo)致精子線粒體在數(shù)量、結(jié)構(gòu)及功能上產(chǎn)生異常。所以DFI作為一項新的評價精子運動能力的指標(biāo)，已經(jīng)逐漸應(yīng)用于弱精癥的診療和研究中，是弱精癥中精子前向運動百分率外一個重要補充參數(shù)。

本研究采用的中藥增嗣衍宗丸膠囊由28味中藥組成，能固腎補氣，強身補腦，增進(jìn)食欲，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為具有溫腎助陽、大補真元的功效[11-14]，多用于治療命門火衰、腎精不足及氣血虧損引起的陽痿及遺精[15-17]。它能加強下丘腦-垂體-性腺軸及腎上腺皮質(zhì)軸等相關(guān)內(nèi)分泌系統(tǒng)的分泌功能，同時能促進(jìn)精子的各項運動參數(shù)指標(biāo)，拮抗活性氧導(dǎo)致的精子損傷。有研究表明，增嗣衍宗丸膠囊能有效改善精子尾線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）和線粒體膜電位（MMP）的正常率，使正常精子數(shù)上升，精子活力也隨著上升[18]。而線粒體的功能與精子的運動能力密切相關(guān)，因為整個精子代謝所需的能量大部分都是由線粒體提供，也就是說，增嗣衍宗丸改善精子尾線粒體功能的同時，也改善了精子的前向運動能力，這與本研究結(jié)論相近。有研究顯示采用臍療治療良性前列腺增生癥30例，有效率達(dá)87%，優(yōu)于對照組的63%（P<0.05）[19]，本研究結(jié)果也顯示，臍療療法能有效改善精子活動力，是一種有效的輔助治療弱精癥患者的療法。

綜上，在增嗣衍宗丸膠囊治療弱精癥的基礎(chǔ)上聯(lián)合臍療施治，相較于單一用增嗣衍宗丸膠囊治療，更能提高弱精患者精漿中果糖、α-糖苷酶、Zn、ACP的水平，改善前列腺、附睪、精囊腺等功能，增加患者精液濃度、精子活率、前向運動精子率以及降低DFI指數(shù)，提高精子活動力。同時對機(jī)體的其他功能調(diào)節(jié)也有積極作用，為臨床上弱精癥的治療提供了新思路。

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