胡蝶

【摘要】 目的：探討中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、降鈣素原（PCT）和C-反應(yīng)蛋白（CRP）在血液細(xì)菌性感染疾病中的診斷價(jià)值。方法：選取2015年1月-2016年12月在本院進(jìn)行血培養(yǎng)的患者153例，根據(jù)血培養(yǎng)結(jié)果將其分為血培養(yǎng)陽性組78例和血培養(yǎng)陰性組75例，檢測研究對象CD64指數(shù)、PCT和CRP水平并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：血培養(yǎng)陽性組與血培養(yǎng)陰性組相比，CD64指數(shù)、PCT和CRP水平明顯升高（P<0.01）。CD64指數(shù)的ROC曲線下面積（AUC）為0.862，PCT的AUC為0.829，而CRP的AUC為0.724，其中CD64指數(shù)和PCT的AUC比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），CD64指數(shù)和PCT的AUC均明顯大于CRP（P<0.001）。CD64指數(shù)和PCT診斷血液細(xì)菌感染的敏感度、特異度均明顯高于CRP，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。相關(guān)性分析表明，血培養(yǎng)陽性組CD64指數(shù)、PCT和CRP水平之間均呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：CD64指數(shù)、PCT和CRP均可有效地預(yù)測血液細(xì)菌感染。

【關(guān)鍵詞】 中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)； 降鈣素原； C-反應(yīng)蛋白； 感染

【Abstract】 Objective：To explore the diagnostic value of Neutrophil CD64 index，procalcitonin（PCT） and C-reactive protein（CRP） in blood bacterial infection.Method：153 patients undergoing blood cultures in our hospital from January 2015 to December 2016 were selected as research objects，according to the results of blood culture can be divided into blood culture positive group of 78 cases and blood culture negative group of 75 cases，meanwhile CD64 Index，PCT and CRP were detected for statistical analysis.Result：The CD64 Index、PCT and CRP in blood culture positive group were higher than those of blood culture negative group（P<0.01）.The area under curve（AUC） of CD64 Index was 0.862，the AUC of PCT was 0.829，and the AUC of CRP was 0.724，the AUC of CD64 Index and PCT were compared，the differences was not statistically significant（P>0.05），the CD64 index and PCT of AUC were obviously larger than those of CRP（P<0.001）.The sensitivity and specificity in diagnosing blood bacterial infection of CD64 Index and PCT were higher than those of CRP，and the difference was statistically significant（P<0.05）.Correlation analysis showed that there were positive correlation between CD64 Index，PCT and CRP level in blood culture positive group（P<0.05）.Conclusion：CD64 Index，PCT and CRP can effectively predict blood bacterial infections.

【Key words】 Neutrophil CD64 index； PCT； CRP； Infection

First-authors address：Wujin Hospital Affiliated to Jiangsu University，Changzhou 213017，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.28.038

血液細(xì)菌感染患者發(fā)生率和死亡率較高，臨床表現(xiàn)缺乏特異性，與其他疾病鑒別診斷存在一定困難，而實(shí)驗(yàn)室診斷的依據(jù)主要依靠傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)，但由于血液細(xì)菌培養(yǎng)存在培養(yǎng)周期長、易污染、陽性率較低等缺點(diǎn)，而血液細(xì)菌感染病程進(jìn)展快，延誤診斷和治療可能導(dǎo)致循環(huán)衰竭、多器官功能衰竭甚至死亡[1]。因此，尋找一種快速、準(zhǔn)確檢測方法對于血液細(xì)菌感染患者早期診斷和治療具有重要意義。本研究通過選取確診為血液細(xì)菌感染者78例作為研究對象（血培養(yǎng)陽性組），同期血培養(yǎng)陰性的患者75例作為對照組，同時檢測中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、降鈣素原（PCT）和C-反應(yīng)蛋白（CRP）水平，評價(jià)各指標(biāo)對血液細(xì)菌性感染疾病的診斷價(jià)值?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月-2016年12月本院進(jìn)行血培養(yǎng)的患者153例，其中男87例，女66例，根據(jù)微生物培養(yǎng)結(jié)果，將其分為血培養(yǎng)陽性組78例和血培養(yǎng)陰性組75例。血培養(yǎng)陽性組中男45例，女33例；年齡15～84歲，平均66歲。血培養(yǎng)陰性組中男42例，女33例；年齡16～88歲，平均69歲。兩組間年齡和性別比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。endprint

1.2 儀器與試劑 法國梅里埃BacT-ALERT 3D全自動血液培養(yǎng)儀；VITEK 2Compact全自動微生物分析儀及配套鑒定卡；流式細(xì)胞儀BD FACS CANTOⅡ（美國）；德國羅氏Cobas E601全自動免疫分析儀；德國西門子BNPii全自動蛋白分析儀；均選用儀器配套試劑。

1.3 方法 患者均在入院24 h內(nèi)、使用抗菌藥物之前，無菌操作抽取靜脈血進(jìn)行需氧菌和厭氧菌培養(yǎng)，同時檢測中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、PCT、CRP水平。血培養(yǎng)陽性組均為不同部位兩次或者多次培養(yǎng)為同一種細(xì)菌感染者，排除污染。（1）中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)檢測：采集EDTA抗凝血上流式細(xì)胞儀檢測，在流式專用試管中依次加入研究對象全血50 μL，CD64-PE抗體10 μL以及CD45-PerCP抗體10 μL，混勻室溫避光放置15 min，再加入溶血素1 mL致紅細(xì)胞完全裂解后1500 rpm 10 min離心，細(xì)胞沉淀中加入200 μL PBS，上機(jī)檢測。設(shè)門分析淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞群，記錄各群CD64平均熒光強(qiáng)度（MFI），利用公式計(jì)算CD64指數(shù)=中性粒細(xì)胞MFI-淋巴細(xì)胞CD64 MFI/單核細(xì)胞MFI-中性粒細(xì)胞CD64 MFI。（2）PCT分離血清采用德國羅氏Cobas E601全自動免疫分析儀檢測。（3）CRP分離血清采用德國西門子BNPii全自動蛋白分析儀檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析，數(shù)據(jù)服從偏態(tài)分布以中位數(shù)（M）、四分位數(shù)間距（Q）形式表示，比較采用秩和檢驗(yàn)，采用Pearsons相關(guān)性分析。應(yīng)用MedCalc軟件繪制受試者工作特征（ROC）曲線，根據(jù)Cut-off值分析各指標(biāo)靈敏性、特異性，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者外周血中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、PCT、CRP檢測結(jié)果比較 血培養(yǎng)陽性組CD64指數(shù)、PCT和CRP水平與血培養(yǎng)陰性組相比均有顯著性升高，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），見表1。

2.2 CD64指數(shù)、PCT及CRP檢測在血液細(xì)菌感染的診斷價(jià)值 以血培養(yǎng)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，將血培養(yǎng)陽性與血培養(yǎng)陰性組數(shù)據(jù)繪制CD64指數(shù)、PCT和CRP的ROC曲線，可見CD64指數(shù)、PCT和CRP繪制的ROC曲線與參考線比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），均對血液細(xì)菌感染有一定的預(yù)測意義。其中CD64指數(shù)和PCT曲線下面積（AUC）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），CD64指數(shù)和PCT的AUC均明顯大于CRP（P<0.001）。見圖1。CD64指數(shù)AUC為0.862，當(dāng)最佳截?cái)嘀禐?.28時，其診斷血流細(xì)菌感染的靈敏度為76.9%，特異度為84.0%，95%CI（0.797，0.912）；PCT AUC為0.829，當(dāng)最佳截?cái)嘀禐?.95 ng/mL時，其診斷血流細(xì)菌感染的靈敏度為82.1%，特異度為75.0%，95%CI（0.760，0.885）；CRP AUC為0.724，當(dāng)最佳截?cái)嘀禐?8.6 mg/L時，其診斷血流細(xì)菌感染的靈敏度為66.7%，特異度為68.0%，95%CI（0.646，0.793）。CD64指數(shù)和PCT診斷血液細(xì)菌感染的敏感度、特異度均明顯高于CRP，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.3 中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、PCT和CRP水平的相關(guān)性分析 患者外周血中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、PCT和CRP水平之間均呈正相關(guān)（P<0.05），見表2。

3 討論

傳統(tǒng)的血液感染性疾病的炎性指標(biāo)主要依靠末梢血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞沉降率以及CRP等檢測，但較低的敏感性、特異性難以滿足臨床需要。近年來研究發(fā)現(xiàn)，敏感性、特異性較高的細(xì)菌感染相關(guān)性生物學(xué)標(biāo)志物，如中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、降鈣素原（PCT）、IL-6和髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體-1（TREM-1）等，這些指標(biāo)的檢測對細(xì)菌感染性疾病的早期診斷有臨床意義。

CD64是高親和性免疫球蛋白Fcγ段受體，在傳導(dǎo)活化信號發(fā)揮重要作用，主要表達(dá)于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞表面，靜息狀態(tài)的中性粒細(xì)胞表面幾乎不表達(dá)。當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌感染刺激時，中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)上調(diào)，在4～6 h內(nèi)即啟動免疫應(yīng)答，并逐級放大免疫效應(yīng)[2]。當(dāng)細(xì)菌感染刺激消失時，CD64在48 h內(nèi)急劇降低且在7 d內(nèi)恢復(fù)至正常水平[3]。Davis等[4]報(bào)道，檢測中性粒細(xì)胞CD64的表達(dá)能提高感染性疾病如敗血癥的診斷效能。CD64指數(shù)可能作為重癥監(jiān)護(hù)病房中預(yù)測感染的常規(guī)指標(biāo)，在抗生素應(yīng)用、減少抗生素濫用和降低死亡率方面有意義[5]。正常生理狀態(tài)下PCT含量較低，主要由甲狀腺C細(xì)胞分泌，當(dāng)細(xì)菌感染刺激時，PCT可由肝臟中巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞以及肺和腸上皮淋巴細(xì)胞等產(chǎn)生。PCT在細(xì)菌感染3～4 h即可升高，并且早于C-反應(yīng)蛋白（CRP）升高[6]，PCT可增加100～1000倍，在感染早期即能檢測到，體內(nèi)穩(wěn)定性好，半衰期長。PCT對早期血流感染診斷具有臨床價(jià)值，血培養(yǎng)陽性患者PCT水平顯著升高，其水平高低與菌血癥患者生存率有關(guān)[7-8]。CRP是一種由肝臟產(chǎn)生的急性時相反應(yīng)蛋白，在炎癥或者急性組織創(chuàng)傷時釋放到血液中，CRP在4～6 h內(nèi)迅速增加，2～3 d達(dá)峰值。

研究表明，CD64指數(shù)、PCT診斷感染相關(guān)性疾病ROC曲線下面積達(dá)到0.95和0.83[9]。Cardelli等[10]報(bào)道，CD64在診斷敗血癥的敏感性和特異性高于PCT。本研究結(jié)果顯示，CD64指數(shù)和PCT的ROC曲線下面積（AUC）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。取CRP最佳截?cái)嘀禐?8.6 mg/L時，CRP對于血流細(xì)菌感染性患者的敏感性和特異性分別是66.7%和68.0%，均低于PCT和CD64指數(shù)，CD64指數(shù)和PCT AUC均明顯大于CRP（P<0.01），CD64指數(shù)和PCT診斷效能高于CRP，與文獻(xiàn)[11-12]endprint

報(bào)道相一致。其原因可能是由于CRP相對特異性較差，不僅是在細(xì)菌感染情況下升高，當(dāng)病毒感染、心血管疾病以及應(yīng)激狀態(tài)下CRP都可能會升高。本研究相關(guān)性分析表明，CD64指數(shù)、PCT和CRP水平之間均呈正相關(guān)，CD64與急性時相反應(yīng)蛋白聯(lián)合檢測可以提高感染性疾病的早期診斷的準(zhǔn)確性[13]。血培養(yǎng)陽性組CD64指數(shù)、PCT和CRP水平與血培養(yǎng)陰性組相比明顯升高，與文獻(xiàn)[14-16]報(bào)道相一致。研究表明，血流感染患者CD64指數(shù)、PCT在不同類型的致病菌感染存在差異[17-19]，可能是由于G-細(xì)胞壁釋放內(nèi)毒素增加有關(guān)[20]，在本文仍需進(jìn)一步研究。

綜上所述，CD64指數(shù)、PCT、CRP三者水平可以作為早期診斷血液細(xì)菌性感染的預(yù)測指標(biāo)，有效彌補(bǔ)微生物血培養(yǎng)檢測時間長、陽性率低方面的不足，但不能完全替代，應(yīng)與微生物血培養(yǎng)相結(jié)合，提高細(xì)菌性血流感染患者的診斷效率，從而準(zhǔn)確指導(dǎo)臨床抗生素合理應(yīng)用，降低病死率。

參考文獻(xiàn)

[1] Warren H S.Strategies for the treatment of sepsis[J].N Engl J Med，1997，336（13）：952-953.

[2] Li S，Huang X，Chen Z，et al.Neutrophil CD64 expression as a biomarker in the early diagnosis of bacterial infection：a meta-analysis[J].Int J Infect Dis，2013，17（1）：e12-23.

[3] Davis B H.Improved diagnostic approaches to infection/sepsis detection[J].Expert Rev Mol Diagn，2005，5（2）：193-207.

[4] Davis B H，Bigelow N C.Comparison of neutrophil CD64 expression，manual myeloid immaturity counts，and automated hematology analyzer flags as indicators of infection or sepsis[J].Lab Hematol，2005，11（2）：137-147.

[5] Wang X，Li Z Y，L Zeng，et al.Neutrophil CD64 expression as a diagnostic marker for sepsis in adult patients：a meta-analysis[J].Critical Care，2015，19（1）：1-9.

[6] Zhydkov A，Christ-Crain M，Thomann R，et al.Utility of procalcitonin，C-reactive protein and white blood cells alone and in combination for the prediction of clinical outcomes in community-acquired pneumonia[J].Clin Chem Lab Med，2015，53（4）：559-566.

[7] Agarwal S，Akbas N Soundar E P，et al.Validation of the procalcitonin（PCT） assay：Experience in a pediatric hospital[J].Clin Biochem，2015，48（13-14）：886-890.

[8] Hattori T，Nishiyama H，Kato H，et al.Clinical value of procalcitonin for patients with suspected bloodstream infection infection[J].Am J Clin Pathlol，2014，141（1）：43-51.

[9] Xiong S D，Pu L F，Wang H P，et al.Neutrophil CD64 Index as a superior biomaker for early diagnosis of infection in febrile patients in the hematology department[J].Clin Chem Lab Med，2017，55（1）：82-90.

[10] Cardelli P，F(xiàn)erraironi M，Amodeo R，et al.Evaluation of neutrophil CD64 expression and procalcitonin as useful markers in early diagnosis of sepsis[J].Immunopathol Pharmacol，2008，21（1）：43-49.

[11]盧小嵐，蔡嘉鏡，蔡艷娟，等.外周血CD64 index對細(xì)菌感染性疾病的診斷價(jià)值[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，29（1）：65-68.

[12]鄭立明.CD64指數(shù)、PCT和WBC在臨床細(xì)菌感染疾病中的診斷價(jià)值[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（14）：2018-2019.

[13] Aydin M，Barut S，Akbulut H H，et al.Application of Flow Cytometry in the Early Diagnosis of Neonatal Sepsis[J].Ann Clin Lab Sci，2017，47（2）：184-190.

[14]李超，袁寶軍，張淑青，等.血液細(xì)菌感染患者中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、CRP及WBC水平變化[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2015，19（10）：1693-1696.

[15]王雪琴，楊朝榮，盛名.降鈣素原及C-反應(yīng)蛋白在細(xì)菌性血流感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（16）：2324-2325.

[16]溫偉洪，李介華，鐘國權(quán).血清降鈣素原定量在血流感染診斷中的臨床價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（7）：775-779.

[17]馮萍，虞培娟，朱雪明.細(xì)菌感染患者外周血中性粒細(xì)胞表面CD64指數(shù)的變化[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，25（2）：96-99.

[18]蔡鮮，胡志東，余倩，等.降鈣素原在區(qū)分不同病原體引起的血流感染的價(jià)值[J].天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，22（1）：37-40.

[19]周海琪，裴穎皓，陳明祺，等.多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測在膿毒癥患者革蘭陰性菌血流感染的臨床價(jià)值分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)，2016，26（24）：5557-5559.

[20] Riedel S.Procalcitomin and the role of biomarkersin the diagnosis and management of sepsis[J].Diagn miclobiol Infect Dis，2012，73（3）：221-227.endprint