胡潔玲 張?zhí)祆` 吳帆 鄭曉鑫 繆建春

中藥水煎劑與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物聯(lián)合使用對(duì)常見(jiàn)致病菌的抗菌作用研究

胡潔玲 張?zhí)祆` 吳帆 鄭曉鑫 繆建春

目的觀察中藥水煎劑與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物聯(lián)合使用對(duì)常見(jiàn)致病菌的抗菌作用.方法30株首次臨床分離株, 其中金黃色葡萄球菌 (Sa)、肺炎鏈球菌(Sp)、大腸埃希菌(E. coli)、銅綠假單胞菌(Pa)、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)分離株各6株, 使用紙片擴(kuò)散法分別對(duì)使用含苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛或頭孢他啶等β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的紙片, 以及使用中藥水煎劑(連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草)分別合用苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛和頭孢他啶等β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的紙片測(cè)量抑菌環(huán)直徑.結(jié)果單用苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛或頭孢他啶等β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的抑菌環(huán)平均直徑分別為23.8、24.2、25.4、27.8 mm, 中藥水煎劑分別合用苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛和頭孢他啶等β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的抑菌環(huán)平均直徑分別為42.4、42.0、45.8、52.2 mm, 分別增加18.6 、17.8 、20.4、24.4 mm.結(jié)論中藥水煎劑與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物聯(lián)合使用可增強(qiáng)對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等常見(jiàn)致病菌的抗菌作用.

中藥水煎劑;β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物;常見(jiàn)致病菌;抗菌作用

中藥在臨床應(yīng)用中常相互配伍使用.本實(shí)驗(yàn)選用連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草共四種中藥, 均為臨床常用的清熱解毒類藥物, 藥理上均具有較強(qiáng)的抗菌、抗病原微生物、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬能力等作用.β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物為臨床廣泛使用的抗感染藥物, 在治療感染性疾病中具有起效快、針對(duì)性強(qiáng)等特點(diǎn).本實(shí)驗(yàn)選用具有代表性意義的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物, 分別為青霉素類:苯唑西林;第一代頭孢菌素:頭孢唑啉;第二代頭孢菌素:頭孢呋辛;第三代頭孢菌素:頭孢他啶.根據(jù)中西藥的特點(diǎn), 聯(lián)合使用時(shí)能加強(qiáng)抗菌作用和增強(qiáng)耐藥性[1].本文探討連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草四種中藥混合的水煎劑分別與苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛和頭孢他啶聯(lián)合使用的體外抗菌作用, 為臨床中西藥結(jié)合治療感染性疾病, 有效緩解日趨嚴(yán)重的細(xì)菌耐藥問(wèn)題, 為合理用藥提供依據(jù).現(xiàn)報(bào)告如下.

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)菌株 由本院2016年12月～2017年3月患者首次臨床分離的臨床分離株30株.金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus, Sa)、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae, Sp)、大腸埃希菌(Escherichia coli, E. coli)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aerugi-nosa, Pa)、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicillinresistant Staphylococcus aureus, MRSA)分離株各6株, 分別來(lái)自痰、血、尿及分泌物標(biāo)本.排除同一患者同一部位的重復(fù)菌株.

1.2 培養(yǎng)基 Mueller-Hinton瓊脂原料、含5%脫纖維羊血的Mueller-Hinton瓊脂原料.

1.3 實(shí)驗(yàn)器材 電熱恒溫營(yíng)養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器、電子顯微鏡、電冰箱、玻璃器皿、微量加樣槍、游標(biāo)卡尺、酒精燈、接種環(huán).

1.4 紙片 抗菌藥物紙片采用英國(guó)的OXOID藥敏紙片.中藥水煎劑紙片(自制):將連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草各5 g(均購(gòu)自國(guó)藥控股深圳藥材有限公司), 分別略粉碎后混合,加水150 ml常溫浸泡30 min, 大火加熱至沸騰轉(zhuǎn)為小火保持微沸30 min, 每隔10 min攪拌1次, 然后將藥液過(guò)濾收集.藥渣繼續(xù)加水100 ml, 同法再煎20 min過(guò)濾收集煎液, 兩次煎液混合濃縮至20 ml, 藥物濃度相當(dāng)于1 g/ml, 裝于試管中至高壓蒸汽滅菌15 min, 取出后置4℃冰箱存放備用[2].

1.5 菌株培養(yǎng) 取金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等菌株少許接種于Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)基中, 36℃培養(yǎng)24 h;取肺炎鏈球菌菌株少許接種于含5%脫纖維羊血的Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)基中, 36℃培養(yǎng)24 h.

1. 6 方法 選用紙片擴(kuò)散法測(cè)定瓊脂平板中苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛、頭孢他啶等β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物單獨(dú)或與中藥水煎劑聯(lián)用的情況下, 各藥敏紙片對(duì)各受試菌的抑菌變化.

2 結(jié)果

單用苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛或頭孢他啶等β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的抑菌環(huán)平均直徑分別為23.8、24.2、25.4、27.8 mm, 中藥水煎劑(連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草)分別合用苯唑西林、頭孢唑啉、頭孢呋辛和頭孢他啶等β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的抑菌環(huán)平均直徑分別為42.4、42.0、45.8、52.2 mm, 分別增加 18.6 、17.8 、20.4、24.4 mm.見(jiàn)表 1.

表1 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物單用或與中藥水煎劑聯(lián)用抑菌環(huán)直徑(mm)

3 討論

金黃色葡萄球菌是革蘭陽(yáng)性球菌, 易引起皮膚和各種器官的化膿性感染, 當(dāng)機(jī)體免疫力降低時(shí)也可引起敗血癥和膿毒血癥.肺炎鏈球菌在自然界中分布廣泛, 可引起細(xì)菌性肺炎、腦膜炎、支氣管炎等疾病.大腸埃希菌在自然界廣泛存在,是機(jī)會(huì)致病菌, 常引起泌尿系統(tǒng)感染、腹膜炎及腹瀉等, 當(dāng)機(jī)體免疫功能受損或抵抗力下降時(shí)易引起敗血癥, 易對(duì)抗菌藥物產(chǎn)生耐藥.銅綠假單胞菌為臨床上常見(jiàn)的條件致病菌之一, 細(xì)菌侵襲力弱但抗藥性強(qiáng), 可引起皮膚和皮下組織感染、中耳炎、呼吸系統(tǒng)及泌尿系統(tǒng)感染、敗血癥等.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌是對(duì)異惡唑青霉素耐藥的金黃色葡萄球菌,是引起醫(yī)院相關(guān)性和社區(qū)相關(guān)性感染的主要病原體之一, 可引起皮膚及軟組織化膿性感染、骨髓炎、肺炎、泌尿及中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、菌血癥和心內(nèi)膜炎等, 以產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶,分解藥物而對(duì)抗菌藥物產(chǎn)生高度耐藥.抗菌藥物在細(xì)菌性感染疾病的治療中發(fā)揮著巨大作用, 使細(xì)菌感染性疾病得到有效控制.青霉素對(duì)革蘭陽(yáng)性菌敏感, 對(duì)革蘭陰性菌殺菌作用較弱.頭孢他啶等第三代頭孢類抗菌藥物對(duì)革蘭陽(yáng)性菌的抗菌作用不如頭孢唑啉和頭孢呋辛等第一、二代頭孢類抗菌藥物, 但對(duì)革蘭陽(yáng)性菌作用增強(qiáng), 對(duì)銅綠假單胞菌有效.二代頭孢類對(duì)革蘭陽(yáng)性菌抗菌效果較一代差, 對(duì)革蘭陰性菌作用優(yōu)于一代, 一、二代頭孢類抗菌藥物對(duì)銅綠假單胞菌均不明感.由于長(zhǎng)期大量和不合理使用抗菌藥物, 也導(dǎo)致細(xì)菌耐藥、菌群失調(diào)、耐藥菌增多、繼發(fā)感染、病程延長(zhǎng)、治療無(wú)效等一系列嚴(yán)重問(wèn)題, 常見(jiàn)致病菌威脅人類的健康已成為全球醫(yī)療衛(wèi)生界面臨的難題.

傳統(tǒng)中藥作為中華民族寶貴的文化遺產(chǎn), 在治療感染性疾病中, 其藥理作用具有抗菌譜廣、毒副作用小等優(yōu)勢(shì), 越來(lái)越多的在預(yù)防和控制細(xì)菌性感染疾病方面產(chǎn)生廣泛而積極的影響[3], 中藥制劑聯(lián)合抗菌藥物進(jìn)行常見(jiàn)致病菌感染治療的研究逐漸受到重視.多數(shù)中藥具有顯著而廣譜的抗菌活性, 比如本實(shí)驗(yàn)所選的中藥連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草等,均具有較強(qiáng)的抗菌、抗病原微生物、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力, 對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌等多種菌有抑制作用[4].其中藥功能和藥理作用分別為:連翹苦寒, 清熱解毒、消腫散結(jié)、疏散風(fēng)熱, 具有抗病原生物(如金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌等)、抗炎、解熱、影響免疫功能、保肝作用等;金銀花甘寒質(zhì)輕, 清熱解毒、疏散風(fēng)熱, 具有抗炎解熱、抗菌、抗病毒、抗過(guò)敏、促進(jìn)免疫功能、促進(jìn)白細(xì)胞吞噬、雙向調(diào)節(jié)免疫、降低膽固醇、抗腫瘤等作用, 連翹和金銀花配伍后對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌等呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、皮膚膿液中的常見(jiàn)致病菌均有不同程度的抑菌和殺菌作用[5];黃芩苦寒, 清熱燥濕、瀉火解毒, 有抗炎解熱、抗菌、抗病毒、抗過(guò)敏、抗氧化及抗腫瘤、促進(jìn)細(xì)胞免疫、增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫功能等作用.研究證明, 黃芩及其主要組份不僅對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等有較強(qiáng)的抑菌作用, 且與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物可發(fā)揮協(xié)同效應(yīng), 顯著降低抗菌藥物的 最低抑菌濃度(MIC), 增加細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感性[6];魚(yú)腥草辛寒質(zhì)輕,清熱解毒、消癰排膿、利尿通淋, 具有抗菌、抗病毒、抗炎、利尿、促進(jìn)免疫功能及鎮(zhèn)靜作用, 魚(yú)腥草素對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌有明顯的抑制作用, 對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有直接殺滅作用, 在治療呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、外科、五官科、婦科等感染性疾病方面臨床療效肯定, 具有明顯的抗病毒與抗菌作用[7].另外, 金銀花、黃芩、魚(yú)腥草均具有抗過(guò)敏作用, 可拮抗抗菌藥物的過(guò)敏反應(yīng);金銀花、連翹、黃芩均具有保肝作用, 可很好地對(duì)抗抗菌藥物常見(jiàn)的肝損害.在本研究中, 與單用β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物相比, 連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草配伍的中藥水煎劑與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物聯(lián)合使用, 抑菌環(huán)的直徑明顯增加, 表明中西藥合用,通過(guò)不同的作用途徑, 抗菌活性更強(qiáng), 藥物動(dòng)力學(xué)更好, 細(xì)菌耐藥性更好, 明顯優(yōu)于單獨(dú)使用西藥或中藥.

連翹、金銀花、黃芩、魚(yú)腥草等傳統(tǒng)抗菌中藥通過(guò)清熱、燥濕、解毒、疏散風(fēng)熱等作用達(dá)到調(diào)節(jié)人體自身免疫功能,增強(qiáng)機(jī)體防御和抗感染能力, 與β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物聯(lián)用可逆轉(zhuǎn)細(xì)菌耐藥性[8].因此, 探討中藥的抑菌作用, 中西藥結(jié)合, 相互取長(zhǎng)補(bǔ)短, 指導(dǎo)臨床合理使用中藥協(xié)同抗菌藥物治療常見(jiàn)致病菌感染, 對(duì)有效的緩解細(xì)菌耐藥日趨嚴(yán)峻的問(wèn)題, 達(dá)到合理用藥的目的有著積極的意義.

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.22.107

2016年度深圳市龍崗區(qū)醫(yī)療衛(wèi)生項(xiàng)目立項(xiàng)課題(項(xiàng)目編號(hào):2016060316592349)

518000 深圳市龍崗區(qū)第六人民醫(yī)院藥劑科(胡潔玲張?zhí)祆` 繆建春);深圳市龍崗中心醫(yī)院藥劑科(吳帆);深圳市龍崗區(qū)第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科(鄭曉鑫)

2017-10-12]