邱 波, 王 艷, 英 永, 屈卉錦, 王鳳乾, 張海靜, 張 鑫, 胡建廷

(1. 山東省藥學(xué)科學(xué)院新藥評(píng)價(jià)中心, 濟(jì)南 250101; 2. 山東英才學(xué)院, 濟(jì)南 250104)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

1例自發(fā)性肝硬化新西蘭兔肝臟病理形態(tài)學(xué)觀察

邱 波1, 王 艷2, 英 永1, 屈卉錦1, 王鳳乾1, 張海靜1, 張 鑫1, 胡建廷1

(1. 山東省藥學(xué)科學(xué)院新藥評(píng)價(jià)中心, 濟(jì)南 250101; 2. 山東英才學(xué)院, 濟(jì)南 250104)

在試驗(yàn)周期為6個(gè)月，試驗(yàn)分5組，分別為低、中、高劑量、模型及空白對(duì)照組(每組為6只)的新西蘭兔膝關(guān)節(jié)刺激試驗(yàn)中，解剖偶然見空白對(duì)照組中出現(xiàn)一例肝硬化病變。肉眼觀察，該患病動(dòng)物消瘦、體質(zhì)量減輕、皮膚黏膜輕度黃染等體征。該患病動(dòng)物肝臟形狀不規(guī)則、質(zhì)地變硬，表面可見大小不一的顆粒狀結(jié)節(jié)突出于肝臟表面。隨即對(duì)肝臟進(jìn)行HE、Masson及網(wǎng)狀纖維染色。通過光學(xué)顯微鏡下觀察表明其符合肝硬化病理形態(tài)學(xué)特點(diǎn)。

新西蘭兔; 肝硬化; 病理形態(tài)學(xué)

肝硬化是嚴(yán)重威脅人類健康的常見疾病, 任何破壞肝臟內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的過程, 炎癥、毒性損害、肝血流改變、先天性代謝障礙、化學(xué)物質(zhì)和藥物毒性、肝內(nèi)循環(huán)紊亂和膽汁流動(dòng)阻塞等都可導(dǎo)致肝硬化[1]。新西蘭兔常用于小動(dòng)物肝硬化模型的制作,該模型可用于篩選抗肝硬化藥物研究、觀察外科手術(shù)治療的效果。常用的制作肝硬化模型的方法包括化學(xué)損傷方法(四氯化碳法、乙醇法、致癌物法、鐵代謝法及D-半乳糖胺法); 外科方法(膽管阻塞法、門靜脈縮窄法); 復(fù)合法及其他方法(免疫法、營(yíng)養(yǎng)法、血吸蟲法、病毒法)等[2-6], 但關(guān)于新西蘭兔自發(fā)性肝硬化的文獻(xiàn)未見相關(guān)報(bào)道。本文以空白對(duì)照組(試驗(yàn)周期為6個(gè)月)出現(xiàn)的1例肝硬化新西蘭兔為研究對(duì)象, 通過肉眼形態(tài)學(xué)及組織病理學(xué)觀察，對(duì)新西蘭兔肝臟的病理形態(tài)學(xué)進(jìn)行深入的探討。

1 患病動(dòng)物概況及剖檢

本試驗(yàn)為周期6個(gè)月的藥物對(duì)新西蘭兔膝關(guān)節(jié)的刺激試驗(yàn)，以期觀察該藥物對(duì)膝關(guān)節(jié)的損傷及修復(fù)情況。普通級(jí)新西蘭白兔30只, 2月齡體質(zhì)量約1.5～2.5 kg，購(gòu)自濟(jì)南西嶺角養(yǎng)殖繁育中心[SCXK(魯)2010-0005]，動(dòng)物飼養(yǎng)于本中心普通級(jí)設(shè)施[SYXK(魯)2010-0004]。試驗(yàn)分5 組, 每組6只, 分別為低、中、高、模型及空白對(duì)照組。試驗(yàn)結(jié)束, 肉眼觀察空白對(duì)照組中1例雌性動(dòng)物消瘦、體質(zhì)量減輕、皮膚黏膜有輕度黃染等體征。解剖觀察該患病動(dòng)物肝臟形狀不規(guī)則、質(zhì)地變硬, 表面可見大小不一的顆粒狀結(jié)節(jié)突出于肝臟表面(圖1A)，腹腔內(nèi)出現(xiàn)約10 mL淡黃色腹水，其它組織臟器均無明顯的肉眼形態(tài)學(xué)變化。

2 病理形態(tài)學(xué)檢查

對(duì)肝組織進(jìn)行常規(guī)取材、脫水、包埋、石蠟切片、HE染色，并根據(jù)說明書步驟進(jìn)行網(wǎng)狀纖維染色[7]和Masson 染色[8]，光學(xué)顯微鏡下觀察患病動(dòng)物肝臟病理形態(tài)學(xué)改變。HE染色顯示患病動(dòng)物肝臟肝細(xì)胞呈彌漫性變性、壞死伴結(jié)節(jié)狀再生; 再生的肝細(xì)胞排列紊亂, 形成數(shù)量不等的假小葉, 假小葉內(nèi)中央靜脈缺如或偏位 (圖1B、圖1C) 。Masson染色顯示藍(lán)染的增生的膠原纖維將肝組織分成數(shù)量不等的假小葉, 假小葉被藍(lán)染的增生的膠原纖維分割、包裹 (圖1D、圖1E)。網(wǎng)狀纖維染色顯示假小葉被棕黃色膠原纖維分割、包裹(圖1F、圖1G);肝組織及假小葉內(nèi)可見黑色的網(wǎng)狀纖維及棕黃色膠原纖維; 肝細(xì)胞壞死區(qū)域和假小葉周圍未見黑色網(wǎng)狀纖維塌陷或沉積, 僅見棕黃色膠原纖維增生(圖1H)。

圖 1 兔肝臟病理學(xué)觀察

3 討論

新西蘭兔是目前科學(xué)研究中常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一，廣泛用于藥物的各種刺激性實(shí)驗(yàn)(血管、肌肉、關(guān)節(jié)、皮下等)、各類生物制劑的熱原實(shí)驗(yàn)、生殖生理和胚胎學(xué)研究、避孕藥物的篩選及制備高效價(jià)和特異性強(qiáng)免疫血清等實(shí)驗(yàn)。為了對(duì)藥物相關(guān)性肝病和自發(fā)性病變進(jìn)行正確鑒別，需加強(qiáng)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)性肝臟病變的研究，以建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的背景資料。因此，本試驗(yàn)系統(tǒng)描述了1例自發(fā)性肝硬化新西蘭兔肝臟肉眼形態(tài)學(xué)、組織病理學(xué)變化特征。經(jīng)肉眼形態(tài)學(xué)觀察提示，該患病動(dòng)物出現(xiàn)的肝臟病變?yōu)榻Y(jié)節(jié)性肝硬化。為進(jìn)一步證實(shí)肝臟病變狀況的進(jìn)展，可通過網(wǎng)狀纖維染色與亞急性肝衰竭進(jìn)行鑒別診斷，因?yàn)閬喖毙愿嗡ソ邥r(shí)肝細(xì)胞壞死區(qū)域和假小葉周圍可見網(wǎng)狀纖維塌陷或沉積[12]。經(jīng)網(wǎng)狀纖維染色，肝細(xì)胞壞死區(qū)域和假小葉周圍未見黑色網(wǎng)狀纖維塌陷或沉積，僅見棕黃色膠原纖維增生，進(jìn)一步確診該肝臟病變?yōu)榻Y(jié)節(jié)性肝硬化。

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Detection of Blood Physiological Parameters in Albino Mutant Golden Hamster

CUI Xiao-xia1, SHANG Shi-chen1, MA Lan-zhi1, HUANG Bin1,SHANG Yu-pu1, WANG Dong-ping1, CHEN Zhen-wen2, WANG Quan-xin3

(1. Laboratory Animal Center, Military Medical Sciences, Military Academy, Beijing 100071, China;2. Department of Laboratory Animal Science, Capital Medical University, Beijing 100069, China;3. Liao Ning Chang Sheng Biotechnology Co., LTD, Benxi 117004, China)

ObjectiveTo detect the normal range of blood physiological parameters in albino mutant golden hamster and compared with wild type golden hamster.MethodsBlood samples were taken from orbital venous plexus of hamsters. A number of blood physiological parameters were measured using automatic blood cell analyzer and semi-automatic coagulometer. The data was analyzed with SPSS17.0.ResultsThe range of normal values of blood physiological data of albino mutant golden hamster and golden hamster were detected. There were significant differences between albino mutant golden hamster and golden hamster in some indexes.ConclusionThe albino mutant in golden hamster may be influence the normal values of some blood physiological indexes.

Albino mutant; Golden hamster; Blood physiological parameters

Q95-33

B

1674-5817(2017)06-0485-03

10.3969/j.issn.1674-5817.2017.06.013

2017-05-10

山東省科技廳山東省創(chuàng)新公共服務(wù)平臺(tái)專項(xiàng)(2014CXPT00001)

邱 波(1983-), 男, 碩士研究生, 主要從事藥物的毒性病理學(xué)研究。 E-mail: qiubo.1983@163.com

胡建廷(1979-), 男, 碩士, 副高, 主要從事藥物的毒性病理學(xué)研究。E-mail: jiantinghu@126.com