余子浩　艾曉杰

摘要：食蟹猴生物學(xué)特性與人類相似，是研究胚胎發(fā)育的優(yōu)質(zhì)動物模型，用其建立的胚胎模型能較好地類比人胚胎發(fā)育的過程。食蟹猴胚胎學(xué)研究將對人類醫(yī)學(xué)研究的進步起到重要的推動作用。

關(guān)鍵詞：食蟹猴；胚胎學(xué)

食蟹猴（Macaca fascicularis）為靈長目猴科。其毛色黃、灰、褐不等，常棲息于有紅樹的沼澤地，主產(chǎn)于東南亞諸國。因其生物學(xué)特性與人類相似，是研究胚胎發(fā)育的優(yōu)質(zhì)實驗動物模型。同時，食蟹猴體型較小，性情較溫和，便于人類馴化和實驗操作。

一、食蟹猴生殖細胞相關(guān)研究

精液保存是雄性食蟹猴胚胎學(xué)研究的首要難題之一。其精子凍融后活力和質(zhì)量是與個體、冷凍保護液成分、降升溫速度速度與精液凍前處理等因素密切相關(guān)，但目前在食蟹猴精液冷凍技術(shù)的研究很多還處于經(jīng)驗性試驗階段，對精液冷凍過程中的精子損傷機理、試驗過程中外部環(huán)境變化對精子的影響、造成不同個體的冷凍敏感性及遺傳因素對冷凍敏感性差異的機制等諸多方面尚不完全清楚。而利用計算機輔助精液分析技術(shù)對食蟹猴精子質(zhì)量的檢驗，并了解其精液的生物學(xué)特性，可以為判定食蟹猴繁殖能力、鑒定精液品質(zhì)提供重要的科研依據(jù)，對食蟹猴繁殖的生產(chǎn)實踐有著重要的指導(dǎo)意義。

黎宗強、曾素先研究了幾種保存液配方在不同溫度下食蟹猴精子的存活時間及存活指數(shù)，得出TRIS液添加20%蛋黃是食蟹猴精液低溫（0～5℃）保存液的最優(yōu)配方。盧晟盛，李林等研究了不同甘油濃度和平衡時間對食蟹猴精液冷凍效果的影響，以建立和優(yōu)化食蟹猴精液冷凍的程序，得出結(jié)論：在食蟹猴精液冷凍中，在改良TTE中加入3%～5%的甘油且平衡30min可以獲得較好效果，精子凍后活率和復(fù)蘇率達到了45%和62%。黎宗強使用了計算機輔助精液分析系統(tǒng)（CASA）對食蟹猴精液進行了分析，以揭示食蟹猴的精液生物學(xué)特性，該研究驗證了CASA系統(tǒng)操作簡便、快捷、直觀、實用、數(shù)據(jù)可靠，較傳統(tǒng)人工檢測方法有良好的相關(guān)性和準確性。李學(xué)家，張秀娟等通過分別采集性成熟前不同年齡食蟹猴睪丸，制作石蠟染色切片，分析食蟹猴生精細胞的發(fā)育進程，并對食蟹猴精原干細胞進行初步鑒定。此研究詳細闡述了性成熟前食蟹猴生精細胞隨年齡增長的漸次性發(fā)育模式，并建立了性成熟前食蟹猴精原干細胞原位鑒定的一種新方法，為其精原干細胞的其他相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。

雌性食蟹猴具有與人相似的月經(jīng)周期，且其食蟹猴胚胎發(fā)育與人類十分類似，且其生殖行為不受季節(jié)限制，食蟹猴胚胎還是研究藥物發(fā)育毒性的理想模型。而食蟹猴胚胎胎仔發(fā)育毒性評價模型通常是在懷孕中的的器官形成期給藥，并在懷孕終末解剖進行胎仔評價，在這期間對受孕猴進行血清激素水平的評價是評價受試物母體毒性的重要指標之

袁芳，李比海等通過研究食蟹猴妊娠早期生殖激素的變化，為進行食蟹猴胚胎.胎仔發(fā)育毒性試驗提供數(shù)據(jù)支持。結(jié)果表明食蟹猴妊娠早期主要生殖激素隨妊娠發(fā)展呈現(xiàn)動態(tài)變化，其中孕酮水平可作為早孕診斷的輔助參考。黎宗強通過用基礎(chǔ)體溫和基礎(chǔ)體重法測定食蟹猴排卵期，為人工養(yǎng)殖食蟹猴提供一套有效的確診雌性食蟹猴排卵期的方法。結(jié)果顯示：雌性食蟹猴黃體期基礎(chǔ)體溫比排卵日的基礎(chǔ)體溫稍高：雌性食蟹猴排卵日體重上升明顯。

二、食蟹猴胚胎細胞相關(guān)研究

異種核移植是建立治療性克隆非人靈長類動物模型和核質(zhì)互作關(guān)系研究動物模型的一種方法，可有效避免人類治療性克隆研究中倫理、法律和臨床上的試驗限制。而食蟹猴胚胎干細胞的成功建系還能能為靈長類胚胎干細胞的研究提供成熟、穩(wěn)定的細胞來源，對人類胚胎干細胞研究也具有重要的參考意義。同時，胚胎干細胞是一類來源于囊胚階段內(nèi)細胞團的全能細胞，具有體外高度增值和自我更新的能力，并可以被定向誘導(dǎo)分化成體內(nèi)各種細胞類型。因此，食蟹猴胚胎干細胞具有巨大的醫(yī)學(xué)應(yīng)用價值與應(yīng)用前景。

學(xué)者對食蟹猴豬異種核移植胚胎細胞的研究較多。梁明明，權(quán)利等通過探索食蟹猴一豬異種核移植胚胎的發(fā)育能力，為食蟹猴異種核移植胚胎干細胞的構(gòu)建奠定基礎(chǔ)。指出食蟹猴體細胞核能夠在豬MII期去核卵母細胞胞質(zhì)中發(fā)生核重塑，并發(fā)育到8一細胞階段。許常龍，秦祖興等通過探討Roscovitine同期化供核細胞對食蟹猴一豬異種體細胞核移植胚胎體外發(fā)育的影響，為提高靈長類的核移植效率奠定基礎(chǔ)。得出結(jié)論：Roscovitine可有效同期化食蟹猴耳成纖維細胞在G0/G1期，并最終提高食蟹猴一豬異種核移植重構(gòu)胚胎的囊胚形成率。秦祖興，黃高波等則驗證了TSA處理可以提高食蟹猴-豬iSCNT胚胎早期發(fā)育能力。朱宛宛，吳迪等成功建立了食蟹猴胚胎干細胞系體外培養(yǎng)體系，并誘導(dǎo)其向早期神經(jīng)細胞分化，為在體移植實驗奠定了基礎(chǔ)。

小結(jié)

綜上所述，食蟹猴在胚胎研究領(lǐng)域是一種非常重要的實驗動物，由于其在遺傳學(xué)、解剖學(xué)和生理學(xué)上與人類高度相似性，極大地擴展了其在胚胎學(xué)研究中的應(yīng)用范圍。

然而，由于目前國內(nèi)科研條件的制約，食蟹猴在胚胎學(xué)研究中的應(yīng)用并不是十分廣泛，相應(yīng)的科研數(shù)據(jù)也欠全面。隨著我國科學(xué)技術(shù)水平的不斷提高，食蟹猴還能為人類醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究、人類健康和疾病問題的研究和臨床前研究提供理想的模型動物，食蟹猴更多動物模型的開發(fā)和應(yīng)用也必將對人類醫(yī)學(xué)研究的進步起到重要的推動作用。