張 靖

（廣西壯族自治區(qū)玉林市中心血站成分科，廣西 玉林 537000）

冷沉淀技術(shù)是指在2～6℃的封閉狀態(tài)下將處在保存期的新鮮冰凍血漿融化，并將血漿中的沉淀物分離，而這些沉淀物中包含的凝血Ⅷ因子與纖維蛋白原對諸如術(shù)后大出血等癥狀的治療中有良好的代替作用[1]。400毫升的全血通過冷沉淀制備可得出大約40～50毫升的冷沉淀，將其放置在低于-18℃的環(huán)境中可保存一年，若將冷沉淀融化后保存在2～6℃條件下，需要在24小時以內(nèi)輸注，且滴速應(yīng)保持在每小時200毫升以上。在冷沉淀制備時，全血采集后制備成新鮮冰凍血漿的時間長短可能會影響血液中物質(zhì)的活性，因此，本文將針對我站近期采集的部分血樣進行冷沉淀制備，觀察分別在采血后4/6/8小時的血樣制備冷沉淀對凝血Ⅷ因子與纖維蛋白原的影響，現(xiàn)將研究結(jié)果作如下報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本組研究所涉及的血液樣本是選取自2016年1月～2017年4月期間采集99份獻血者的全血樣本，每份樣本均為400毫升，且均無色澤異常，溶血，凝塊，氣泡及重度乳糜等現(xiàn)象，且血液采集均未超過13分鐘。

1.2 制備方法

血樣制備的儀器與試劑：由德國美創(chuàng)公司生產(chǎn)，型號為Contron1800的全自動血凝儀以及由盧森堡公司生產(chǎn)，型號為MBF-21的速凍機；德國賽默飛公司生產(chǎn)，型號為6000i的離心機；美國科瑞特公司生產(chǎn)，型號為CT-4T-6C的低溫融化箱以及Beckman公司的檢測試劑。

制備方法：使用離心機以每分鐘4000 r的轉(zhuǎn)速對全血進行離心操作10分鐘，將新鮮血漿從全血中分離出來，放置于速凍機中進行速凍。隨后轉(zhuǎn)入-18℃以下的低溫冰箱中保存，99份新鮮冰凍血漿分為3組，分別在采血后4/6/8小時將各組血漿樣本進行冷沉淀制備；冷沉淀制備的方法使用的是虹吸法，其具體步驟為：將新鮮冰凍血漿（A袋）置于4℃水浴箱中，另一空袋（B袋）懸于水浴箱外，位置低于血漿袋，兩袋之間形成一定的高度差。血漿融化后，隨時被虹吸到B袋中，當融化至剩下40～50 mL血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子（A袋）。將A袋和B袋（冰凍血漿）熱合斷離。隨后將冷沉淀速凍后保存保存在－18℃以下的低溫冰箱中。

1.3 指標的觀察

對在不同時間點采集的血液制備的冷沉淀樣本進行水浴箱融化，水溫設(shè)置為37℃，對冷沉淀物質(zhì)使用試劑盒實施測定其中的凝血Ⅷ因子及纖維蛋白原含量。

1.4 統(tǒng)計學方法

本組研究采用的是SPSS 20.0統(tǒng)計軟件實施數(shù)據(jù)的分析，計數(shù)信息運用x2檢驗，計量數(shù)據(jù)則用t檢驗，組間的對比組以P＜0.05視為具有統(tǒng)計意義。

2 結(jié) 果

2.1 凝血Ⅷ因子以及纖維蛋白原的含量以及回收率

經(jīng)觀察3組血樣的凝血Ⅷ因子的含量無明顯差異，P＞0.05。纖維蛋白原的含量組間差異較為明顯，P＜0.05；兩組的回收率對比均有明顯差異，P＜0.05。見表1。

表1 凝血Ⅷ因子以及纖維蛋白原的含量以及回收率（±s）

表1 凝血Ⅷ因子以及纖維蛋白原的含量以及回收率（±s）

組別凝血因子含量回收率纖維蛋白原含量回收率4小時113.58±31.7280.47±15.18228.03±12.5279.30±15.456小時112.14±29.6865.67±14.97219.24±12.4660.66±15.048小時115.35±31.4859.40±15.31211.96±11.7859.73±15.29

3 討 論

現(xiàn)階段的醫(yī)療技術(shù)日漸發(fā)達，以致于冷沉淀技術(shù)在臨床上獲得廣泛的應(yīng)用。在治療先天性或是獲得性凝血因子Ⅷ缺失以及纖維蛋白原的缺乏等癥狀中呈現(xiàn)出了良好療效，冷沉淀在臨床上的需求量不斷增加，為避免醫(yī)療事故的發(fā)生，其制備的要求也越發(fā)嚴格。由于凝血Ⅷ因子在冷沉淀的制備過程中呈現(xiàn)出較短的半衰期[2]，在脫離人體之后比較容易失活，因此需要嚴格控制冷沉淀的制備過程，以保證其質(zhì)量。相關(guān)文件規(guī)定冷沉淀的原材料必須是采血后8小時內(nèi)制備成新鮮冰凍血漿，否則凝血因子等的活性會相應(yīng)降低[3]。本組結(jié)果顯示：在3個不同時間點（4/6/8小時）采集的血液進行冷沉淀制備的凝血VIII因子及纖維蛋白原含量并無明顯差異，所以在8小時之內(nèi)進行血樣的冷沉淀制備并不會對臨床治療效果造成較大影響，綜上，8小時內(nèi)，不同時間點采集的新鮮冰凍血漿制備冷沉淀并不能對凝血VIII因子以及纖維蛋白原含量造成較大影響，但會影響其中的回收率。

[1] 肖樂宇,肖聲宇,岐紅陽,等.探討手工制備血小板后的血漿再制備冷沉淀的可行性[J].醫(yī)藥論壇雜志,2017,38(04):81-82.

[2] 畢承恩,楊 婷,馬佩琴,等.冷沉淀凝血因子制備技術(shù)的應(yīng)用研究[J].臨床醫(yī)藥文獻電子雜志,2017,4(01):27-29+32.

[3] 肖樂宇.冷沉淀凝血因子制備儀制備冷沉淀的質(zhì)量評價[J].中國輸血雜志,2016,29(01):96-97.