王 瑜， 歐陽(yáng)菊艷， 李 輝， 尚 靜， 張向陽(yáng)

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院1干部病房?jī)?nèi)二科, 2老年病科, 3心臟中心, 烏魯木齊 830054)

三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子 A1(ABCA1)為利用 ATP 作為能量基礎(chǔ)，運(yùn)輸不同物質(zhì)到細(xì)胞內(nèi)外或不同的細(xì)胞器上高度保守的一組跨膜蛋白質(zhì)，在細(xì)胞間和細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)底物。膽固醇、磷脂從細(xì)胞內(nèi)流向細(xì)胞外是高密度脂蛋白(HDL-C) 參與膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)(RCT)的初始步驟。ABCA1基因R219K位點(diǎn)的多態(tài)性借助改變基因表達(dá)產(chǎn)物的結(jié)果，改變血脂水平或不同基因型個(gè)體對(duì)冠心病的敏感程度[1]。冠心病的發(fā)病考慮為遺傳因素和環(huán)境因素作用的結(jié)果[2]，遺傳因素的影響被認(rèn)為更有意義。許多研究均顯示ABCA1基因R219K多態(tài)性通過(guò)影響血脂水平發(fā)揮作用，但在不同飲食結(jié)構(gòu)的人群中的血脂水平有其獨(dú)特的特點(diǎn)，本研究以不同飲食結(jié)構(gòu)人群為研究對(duì)象，旨在了解ABCA1基因R219K多態(tài)性在不同飲食結(jié)構(gòu)人群中的分布及其與血脂水平的相關(guān)性，進(jìn)一步為與血脂相關(guān)性疾病的發(fā)生提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1臨床資料選擇在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院健康體檢中心健康體檢的，無(wú)明顯的飲食習(xí)慣限制，肉食以牛羊肉、豬肉為主人群(A組)243例，男性154例，女性89例，年齡(41.7±8.41)歲；選取飲食習(xí)慣統(tǒng)一、單一，肉食以牛、羊肉為主人群(B組)189例，男性128例，女性61例，年齡(41.23±9.12)歲，經(jīng)過(guò)內(nèi)科問(wèn)診、體檢、心電圖等檢查排除心血管疾病者，排除既往服用過(guò)降脂藥物者為觀察對(duì)象。A組與B組年齡、性別分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1 指標(biāo)采集 測(cè)定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、脂蛋白(a)[Lp(a)]。

1.2.2 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段多態(tài)性(PCR-RFLP) 將ABCA1基因用PCR方法擴(kuò)增為包含R219K位點(diǎn)的177 bp的片段，G變異成A時(shí)，K等位基因產(chǎn)生出被限制性內(nèi)切酶XagⅠ的酶切位點(diǎn)，用XagⅠ酶切PCR產(chǎn)物，KK基因型被酶切，電泳圖上呈現(xiàn)出107、70 bp 2條明顯的片段；RR基因型則不能被切開(kāi)，電泳圖上僅見(jiàn)1條177 bp的片段；RK基因型中，K等位基因被XagⅠ酶切，R等位基因不能被酶切，電泳圖上出現(xiàn)177、107、70 bp(圖1)3條片段。

M: 50 bp DNA Ladder; 1、2： KK基因型； 3、4: RK基因型; 5、6: RR基因型

圖1ABCA1基因R219K多態(tài)性3.0%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

2 結(jié)果

2.1A組與B組血脂的比較A組TG、TC高于B組，HDL-C低于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 A組與B組血脂的比較

注：與A組比較,*P<0.05。

2.2A組和B組ABCA1基因R219K基因型及等位基因頻率的分布A組和B組的基因型的分布進(jìn)行平衡檢驗(yàn)結(jié)果顯示，A組：χ2=0.212，P>0.05；B組：χ2=0.476，P>0.05，符合Hardy-Weinberg遺傳平衡，具有群體的代表性。A組與B組的ABCA1基因型分布及等位基因頻率對(duì)比顯示，A組與B組RR、RK、KK基因分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，R、K等位基因的頻率分布差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 A組與B組ABCA1基因及等位基因比較

2.3B組人群ABCA1不同基因型間血脂的比較各基因型間血脂比較提示,KK型的TC低于RR型，RK型、KK型的HDL-C高于RR型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 ABCA1基因型之間血脂和相關(guān)危險(xiǎn)因素比較

注：與RR型比較，*P<0.05。

3 討論

ABCA1基因多態(tài)性可導(dǎo)致丹吉爾病(TD)、家族性HDL缺乏[3]，已經(jīng)成為發(fā)病基礎(chǔ)的共識(shí)，基因突變通過(guò)改變血脂水平，影響動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的發(fā)病率[4]。ABCA1基因的R219K多態(tài)性在不同地域、不同個(gè)體差異均已被證實(shí)。ABCA1的作用涉及多種疾病，尤其是脂代謝相關(guān)性疾病，研究顯示ABCA1基因R219K位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)冠心病患者血漿脂質(zhì)水平有明顯的影響，對(duì)HDL-C和apo A-I的水平影響明顯[5]。ABCA1基因R219K多態(tài)性可以降低老年人心血管病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[6]，影響急性心肌梗死患者他汀藥物調(diào)脂作用[7]，對(duì)腦動(dòng)脈粥樣硬化血栓性疾病及男性肥胖的影響[8-9]，與冠心病的現(xiàn)患率有關(guān)，與腫瘤患病也有相關(guān)性，在亞洲人群中這種相關(guān)性更為明顯[10]。針對(duì)HDL-C危險(xiǎn)因素的Logistic回歸分析中得出ABCA1基因的多態(tài)性不是其獨(dú)立的影響因素[11]。諸多研究顯示ABCA1基因R219K多態(tài)性與多種疾病的發(fā)病相關(guān)，但研究結(jié)果各有不同。

本研究選取的B組人群是一個(gè)在生活方式、飲食結(jié)構(gòu)一致性較強(qiáng)的群體，在某種意義上，減弱了遺傳異質(zhì)性的影響，是與遺傳相關(guān)的疾病研究的較為理想的群體。該組人群的飲食結(jié)構(gòu)較為單一，血脂結(jié)構(gòu)可見(jiàn)相對(duì)于飲食結(jié)構(gòu)復(fù)雜的A組人群理想，HDL-C偏高，LDL-C偏低，為臨床獲益的血脂譜，可以減少心血管疾病的發(fā)生。臨床研究顯示血脂藥物與膽固醇吸收抑制劑的聯(lián)用更好地控制血脂水平[12]，使心血管疾病的患者更大的獲益。近年來(lái)，HDL-C水平的高低在動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的遠(yuǎn)期預(yù)后中無(wú)明顯差異的研究結(jié)果與以往的許多研究結(jié)果相悖，在此背景下，本研究中ABCA1基因R219K的多態(tài)性與血清HDL-C水平有關(guān)，HDL-C在KK基因型攜帶者中低于RR基因型，TC水平則高于RR基因型，K等位基因可能產(chǎn)生臨床獲益的血脂譜。但不同研究差異不除外與樣本的選擇、地域因素及其他因素互相影響所致，有待于進(jìn)一步研究。

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