尹情勝，任翠麗，俞敏，張勇強

（1.合肥工業(yè)大學控釋藥物研究室，安徽合肥 230009；2.合肥中人科技有限責任公司，安徽合肥 230038）

鹽酸多柔比星（DOX）是周期非特異性細胞毒類抗腫瘤藥物，作用于DNA分子結(jié)構(gòu)，具有較強的抗腫瘤活性，臨床上廣泛用于治療急性白血病、惡性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等［1-2］。鹽酸多柔比星植入劑是供體內(nèi)植入使用的長效低毒的新型緩釋制劑，現(xiàn)已進入臨床研究階段。該制劑由DOX和生物可降解高分子材料組成，DOX和本品輔料具有較強的引濕性［3］，本品在制備、存儲時易吸潮，影響高分子輔料的穩(wěn)定性，進而影響本品的質(zhì)量。故有必要建立水分測定方法，用于監(jiān)測本品中的水分。

藥品中水分測定大多采用卡爾-費休氏容量滴定法［4］。測定溶劑通常為甲醇，若樣品溶解于甲醇中，可直接加入滴定杯中滴定［5-8］。本品輔料不溶于甲醇，在優(yōu)選的混合溶劑中溶解也緩慢，因此，無法直接加樣滴定。通過查閱文獻［9-10］和試驗研究，本品用 N，N-二甲基甲酰胺（DMF）-甲醇混合溶解后轉(zhuǎn)移至滴定杯中測定，該方法的精密度和回收率均良好。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 梅特勒AE240電子天平；梅特勒ET08水分儀；XW-80漩渦混合器（海門其林貝爾有限公司）。

1.2 試藥 單組分卡爾-費休試劑（無吡啶型），無水甲醇（分析純），N，N-二甲基甲酰胺（色譜純），5A分子篩；鹽酸多柔比星植入劑（批號20160402、20160505、20160920、20161105、20161123）。

2 方法與結(jié)果

2.1 水-甲醇標準溶液（10 g水／L）配制方法［11］取干燥的100 mL量瓶，加入干燥的甲醇（取甲醇約500 mL，加入干燥的5A分子篩約50 g，具塞，靜置過夜，取上清液使用）約50 mL，精密加入純化水1 mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，密封，即得。

2.2 卡爾-費休氏試液標定 環(huán)境濕度小于60%。滴定杯中加入甲醇約30 mL，預滴定至終點，加入水-甲醇標準溶液約1 mL，精密稱定，滴定，連續(xù)標定3次，結(jié)果應在±1%以內(nèi)，計算費休氏試液的滴定度F，結(jié)果見表1。

表1 卡爾-費休氏試液標定結(jié)果

2.3 DMF-甲醇（4∶1）混合溶劑中水分的測定 移取混合溶劑約10 mL，精密稱定，以甲醇為溶劑，滴定。經(jīng)測定，混合溶劑水分（W0）為0.020 77%，RSD為0.08%（n＝3）。

2.4 供試品中水分測定方法

2.4.1 供試品溶液制備方法 稱取DOX植入劑約200 mg，精密稱定（M1），置于25 mL量瓶中，加入DMF約8 mL，精密稱定（M2），具塞密封，渦旋至植入劑粒子消失，再加入無水甲醇約2 mL，精密稱定（M3），具塞密封，渦旋至澄清，得供試品溶液，密封，備用。

2.4.2 測定方法 滴定杯中加入混合溶劑約30 mL，預滴定至終點，移入供試品溶液約10 mL，精密稱定（M4），滴定至終點，記錄消耗試液的體積（V）。按下式計算供試品中的含水量（Wt）：

式中，F(xiàn)1為供試品溶液中溶劑的質(zhì)量分數(shù)，F(xiàn)1＝（M2＋M3）／（M1＋M2＋M3）。

2.5 方法的準確度考察 取本品1批（批號：20160402），混合均勻后，稱取7份，每份取約200 mg，精密稱定；其中2份按2.4項測定植入劑水分；另外5份在制備供試品溶液時，稱量加入水-甲醇標準溶液約1 mL，搖勻后，轉(zhuǎn)移溶液，測定水分。

經(jīng)測定，供試樣品中含水量為1.122%，RSD為1.44%。加標回收試驗的測定結(jié)果見表2。

2.6 方法的重復性和中間精密度考察 取本品（批號：20160505），混合均勻后，稱取6份，每份約200 mg，精密稱定，按2.4項測定水分，得方法的重復性；隔日另取6份，同法測定，得方法的中間精密度。本方法的精密度和重復性考察結(jié)果見表3。

表3 方法的重復性與中間精密度考察結(jié)果

2.7 供試品水分測定 3批鹽酸多柔比星植入劑水分測定的結(jié)果見表4。

表2 方法的準確度（加標回收率）考察結(jié)果

表4 3批供試樣品水分測定結(jié)果

3 討論

3.1 樣品溶解溶劑的選擇 本品在甲醇中不溶解，在DMF中溶解不完全，呈渾濁狀。經(jīng)試驗，本品在DMF-甲醇混合溶劑中可完全溶解，但溶解速度較慢，在漩渦情況下需要20 min。本方法先用DMF溶解植入劑后，植入劑粒子很快分散消失，再加入少量甲醇后震搖后，即可得到澄清溶液。

3.2 溶解轉(zhuǎn)移法測定本品水分 本品在混合溶劑中溶解時間過長，直接加樣滴定時間較長，水分漂移嚴重，故不適合。本研究根據(jù)王晨等［9］報道的溶解轉(zhuǎn)移法，將供試品在量瓶中溶解溶液后定量轉(zhuǎn)移至反應杯中迅速滴定，可以有效地解決樣品溶解時間長和水分漂移問題。樣品在溶解過程中應具塞密封，防止溶劑的溢出損失。

3.3 卡爾-費休氏試液的稀釋 本品屬于貴重藥品，取樣量不宜太多。200 mg樣品含水約2～3 mg，因此，需低強度費休氏試液。本研究采用在費休氏試液中加入一定比例的無水甲醇，搖勻后使用，強度每毫升可降至1～2 mg水，滴定體積達到1～5 mL，減少系統(tǒng)誤差。

3.4 水-甲醇標準溶液標定費休氏試液強度 卡爾-費休氏試液的標定一般采用10μL進樣針加樣，連續(xù)3次標定結(jié)果應在±1%［11］。由于加樣量太少，精度差，因此難以達到要求，需連續(xù)多次標定。本文參照GB／T 6283-2008方法，稱取水-甲醇標液進行標定，精密度高，易達到規(guī)定要求。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典臨床用藥須知-化學藥和生物制品卷［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2011：874-876.

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［3］ 國家藥典委員會.中國藥典（二部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：955.

［4］ 國家藥典委員會.中國藥典（四部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：103-105.

［5］ 張捷，尹良軍，張書華，等.費休氏水分測定法測定小柴胡顆粒水分［J］.延安大學學報（醫(yī)學科學版），2015，13（3）：6-7.

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［7］ 王立萍，劉英，趙靜.利福霉素鈉及其制劑水分的研究［J］.中國藥品標準，2014，15（3）：187-189.

［8］ 查萍萍，鄒云，王玉芳.費休氏法測定羅紅霉素顆粒水分［J］.黑龍江醫(yī)藥，2012，25（4）：556-557.

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［11］李云龍.中國藥品檢驗標準操作規(guī)［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.