三種補(bǔ)腎中藥有效成分對(duì)皮質(zhì)酮致骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞基因表達(dá)譜的作用

卞琴，黃建華，楊鑄，等

摘要：目的：觀察3種補(bǔ)腎中藥淫羊藿、補(bǔ)骨脂和女貞子各自的有效成分淫羊藿苷、補(bǔ)骨脂素和齊墩果酸對(duì)皮質(zhì)酮大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow stromal cell，BMSC）的調(diào)控作用。方法：50只Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、皮質(zhì)酮造模組（模型組）、皮質(zhì)酮加淫羊藿苷治療組（淫羊藿苷組）、皮質(zhì)酮加補(bǔ)骨脂素治療組（補(bǔ)骨脂素組）、皮質(zhì)酮加齊墩果酸治療組（齊墩果酸組）（后3組合稱治療組）。模型組和治療組予皮質(zhì)酮皮下注射，每日1次，連續(xù)14 d。正常對(duì)照組予等劑量橄欖油皮下注射。治療組皮質(zhì)酮注射前5 d開始按20 mg/kg給予對(duì)應(yīng)藥物每日1次灌胃，連續(xù)19 d。分別于造模第1、4、7、11和14 d稱量體質(zhì)量，大鼠處死后取第4腰椎進(jìn)行Micro-CT掃描，評(píng)價(jià)骨量改變情況，所選結(jié)構(gòu)參數(shù)包括：（1）骨小梁的體積（bone volume，BV）與樣本的體積（total volume，TV）的比值，為興趣區(qū)域（region of interest，ROI）內(nèi)代表骨性結(jié)構(gòu)體素的總體積與區(qū)域內(nèi)所有體素的總體積之比；（2）骨小梁間隙（trabecular spacing，Tb.Sp）；（3）骨小梁厚度（trabecular thickness，Tb.Th）；（4）骨小梁數(shù)目（trabecular number，Tb.N）。BV/TV、Tb.Sp、Tb.Th、Tb.N等數(shù)據(jù)從軟件直接獲得。采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)原代BMSC，于取材后第7天干細(xì)胞基因芯片技術(shù)檢測(cè)mRNA表達(dá)。基因表達(dá)譜檢測(cè)操作過程由上?？党缮锕こ逃邢薰就瓿?；基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)分析各組基因差異表達(dá)用Genespring 4.0軟件分析。基因差異表達(dá)（上調(diào)或下調(diào)）兩倍以上為有意義。結(jié)果：造模和治療后各組大鼠體質(zhì)量沒有發(fā)生明顯變化。Micro-CT顯示，皮質(zhì)酮注射14 d后，模型組與正常對(duì)照組之間，治療組與模型組之間腰椎骨形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)未出現(xiàn)顯著變化。干細(xì)胞基因表達(dá)譜顯示在皮質(zhì)酮改變的基因中，淫羊藿苷、補(bǔ)骨脂素和齊墩果酸分別可逆轉(zhuǎn)11、12和15種基因。3個(gè)有效成分共同作用的基因有5種，主要包括成骨分化相關(guān)分子Alpl和Bmpr1a，細(xì)胞周期調(diào)節(jié)相關(guān)因子Cdkn2a和細(xì)胞因子Fgf21，以及Notch信號(hào)通路上Adam17分子。結(jié)論：補(bǔ)腎中藥可能從BMSC周期調(diào)節(jié)和細(xì)胞代謝等方面發(fā)揮促進(jìn)BMSC成骨分化的作用，最終實(shí)現(xiàn)治療骨質(zhì)疏松的療效，但其確切的機(jī)制還有待深入研究。

來源出版物：中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào), 2011, 9(2): 179-185

入選年份：2016