賈紀(jì)萍，金禮琴，陳曉蘭，周 瑤，張 迪，章婷婷

（江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州 225300）

中藥口服液是在傳統(tǒng)湯劑基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新劑型，其質(zhì)量穩(wěn)定、藥量小、療效確切、吸收快、易于保存、服用適口性好［1］，因此，口服中獸藥越來越受到廣大養(yǎng)殖戶的青睞。復(fù)方桑杜口服液是一種新型中獸藥免疫增強(qiáng)劑，由桑葉和杜仲兩味藥材煎煮而成。桑葉為?？粕僦参锷５母稍锶~，具有抑菌、抗炎、抗病毒、抗腫瘤等作用［2］；杜仲屬于杜仲科 植物杜仲的干燥莖皮［3］，有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗菌、消炎、抗癌等作用［4］。筆者對復(fù)方桑杜口服液中桑葉和杜仲兩味藥材近10年的研究資料進(jìn)行綜述，重點(diǎn)介紹桑葉和杜仲有效成分分析方法的最新研究進(jìn)展，以期為復(fù)方桑杜口服液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供參考。

1 桑葉的有效成分分析

1.1 桑葉中的有效成分及藥理作用

桑葉在中藥中又名“鐵扇子”，是囯家衛(wèi)生部門認(rèn)定的藥食同源植物葉［5］，可用于制作桑葉食品、桑葉茶、桑葉飼料等［6］。桑葉中活性物質(zhì)的提取主要采用浸提法、超聲輔助提取法和微波輔助提取法。其藥理活性成分有黃酮、生物堿、多糖、氨基酸、植物甾醇和微量元素等［7］。

桑葉中的黃酮類化合物主要包括槲皮素、紫云英苷、蘆丁、桑黃酮H等［8］，這些成分是天然的強(qiáng)抗氧化劑，具有降血糖、降血壓、抗衰老、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抑制脂質(zhì)氧化和膽固醇吸收的作用。此外，還有雌激素樣作用，以及解痙、鎮(zhèn)痛等生理作用［9］。

桑葉多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能［10］、抗氧化、降血糖、降血脂［11］和抗腫瘤、抗病毒等作用［12］。 桑葉中的生物堿包括 1-脫氧野尻霉素（1-DNJ）、1α-脫氧野尻霉素、2α-脫氧野尻霉素、3α-脫氧野尻霉素、4β-脫氧野尻霉素等［13］。 1-DNJ 是一種糖苷酶抑制劑，具有降血糖、抗病毒和抗腫瘤轉(zhuǎn)移等作用［14］。桑葉中植物甾醇含量比一般植物高3～4倍，主要包括β-甾醇、豆甾醇、菜油甾醇等，這些成分能夠抑制腸道對膽固醇的吸收［15］。

1.2 桑葉中有效成分分析方法

孫蓮等［16］以乙酸乙酯—水—甲酸—甲苯（17∶2∶2∶0.8）為展開劑，于高效硅膠 G板上展開，以AlCl3為顯色劑，在365 nm波長處檢視鑒別蘆丁、異槲皮苷及紫云英苷。 田從麗［17］和花蕾 等［18］利用分光光度法，以蘆丁為對照品，采用亞硝酸鈉—硝酸鋁—?dú)溲趸c顯色法，在510 nm波長處測定桑葉中的總黃酮含量。鄭娟等［19］以0.1%磷酸—乙腈為流動(dòng)相，在348 nm波長處梯度洗脫測定桑葉中的綠原酸、蘆丁、木犀草苷含量。邸學(xué)等［20］以 0.1%磷酸乙腈溶液 （A）和磷酸 （0.16%）—三乙胺（0.18%）水溶液為流動(dòng)相，在360 nm波長處梯度洗脫測定桑葉中的綠原酸、蘆丁、異槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量。 歐陽臻等［21］和陸廣富等［22］對桑葉中的多糖進(jìn)行提取純化，并采用苯酚—硫酸法測定桑葉中的多糖含量。趙麗玲等［23］以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌為指示菌，對桑葉提取物的提取工藝和提取物抑菌活性進(jìn)行了研究。李凡等［24］采用雷氏鹽比色法檢測桑葉中的總生物堿。李玲等［25］以正丁醇—冰醋酸—水（5∶2∶1）為展開劑，在硅膠G板上展開，以茚三酮為顯色劑鑒別1-DNJ。

2 杜仲的有效成分分析

2.1 杜仲中的有效成分及藥理作用

杜仲中活性成分的提取方法主要有水提法、乙醇提取法、超聲提取法、微波提取法、酶提取法、超臨界 CO2流體萃取法［26］，主要含有木脂素類、環(huán)烯醚萜類、苯丙素類、黃酮類、多糖類化合物，以及微量元素等［27］。

木脂素類活性成分主要包括松脂醇二葡萄糖苷、杜仲脂素、橄欖素等［28］，其中，松脂醇二葡萄糖苷廣泛存在于杜仲皮中，具有降血壓的功效［29］。

環(huán)烯醚萜類活性成分主要包括京尼平苷酸、京尼平苷、桃葉珊瑚苷、杜仲醇等［4］。京尼平苷酸和京尼平苷可作為抗衰老的重要藥物，在降低血壓的同時(shí)，可提高機(jī)體抗腫瘤活性；桃葉珊瑚苷也能應(yīng)用于傷口的消炎處理，還可以顯著提高傷口的自愈能力。

黃酮類成分有槲皮素、山萘酚、黃芩素、紫云英苷等，具有廣泛的抗菌、消炎、抗氧化、提高機(jī)體免疫力、抗高血壓的作用［30］。

多糖類能夠應(yīng)用于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的活化反應(yīng)，達(dá)到提高機(jī)體免疫作用的重要目的［31］。Xia 等［32］研究發(fā)現(xiàn)，杜仲葉多糖具有一定的抗運(yùn)動(dòng)疲勞功效；Chun等［33］研究表明，杜仲中的多糖成分能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡從而直接殺傷腫瘤細(xì)胞。

苯丙素類活性成分主要包括咖啡酸、綠原酸及香草酸等。研究表明，綠原酸具有抗氧化、抑菌、抗病毒、抗炎、抗腫瘤、保肝等作用［34］。

2.2 杜仲中有效成分分析方法

已有文獻(xiàn)資料中關(guān)于杜仲薄層鑒別方法的報(bào)道較少。程德軍等［35］通過2次制備薄層色譜純化杜仲葉粗提物得到綠原酸。邢亞楠等［36］采用高效硅膠 G 板，以乙酸乙酯—甲酸—水（7∶2.5∶2.5）為展開劑，在365 nm波長處檢視鑒別綠原酸。劉玲等［37］采用高效硅膠G板，以三氯甲烷—正丁醇—水—乙酸（1∶7∶1∶1）為展開劑，在日光下檢視鑒別松脂醇二葡萄糖苷和京尼平苷酸。

王麗楠等［38］采用 HPLC 法，以乙腈—0.4%磷酸（13∶87）為流動(dòng)相，檢測波長為 327 nm，測定杜仲不同部位的綠原酸和松脂醇二葡萄糖苷的含量。呂強(qiáng)等［39］利用 HPLC 法，以甲醇—水（35∶75）為流動(dòng)相，檢測波長為240 nm，測定綠原酸的含量；將甲醇和磷酸按照二元高壓梯度洗脫，檢測波長為240 nm，測定京尼平苷酸的含量；應(yīng)用硝酸鋁—亞硝酸鈉比色法測定總黃酮的含量。馮薇薇等［40］采用HPLC法，以甲醇—0.1%磷酸為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，利用PDA-3000光電二極管陣列檢測器的多波長檢測，分析京尼平苷酸、綠原酸、松脂醇二葡萄糖苷、桃葉珊瑚苷的含量。姜曉芳等［41］采用 HPLC 法，以甲醇—水—冰醋酸（13∶87∶1.5）為流動(dòng)相，檢測波長237 nm，測定京尼平苷酸、綠原酸、京尼平苷的含量。孫佳等［42］采用UPLC法同時(shí)測定杜仲藥材中的桃葉珊瑚苷、京尼平苷酸、綠原酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇單葡萄糖苷含量。鄭義等［43］采用RP-HPLC法，以乙腈—0.2%磷酸（15∶85）為流動(dòng)相，檢測波長為 277 nm，測定松脂醇二葡萄糖苷的含量。

3 結(jié)語

近年來，天然植物來源的中獸藥逐漸受到人們的重視和青睞。大量研究表明，桑葉和杜仲在降壓、降糖、降脂、提高免疫力等方面發(fā)揮重要作用。新型中獸藥免疫增強(qiáng)劑桑杜口服液的研發(fā)應(yīng)運(yùn)而生，隨后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立對該藥物的質(zhì)量控制尤為重要。