侯雅萍，俞 菁，樊 程

(上海市長(zhǎng)寧區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科 200051)

B族鏈球菌(GBS)又稱無(wú)乳鏈球菌，屬于條件致病菌，可定植于女性生殖道、腸道和尿道，新生兒可在分娩時(shí)由母體生殖道寄殖菌上行感染。GBS是引起產(chǎn)褥期發(fā)熱的常見病原體，也是引起孕婦菌血癥和傷口感染的主要致病菌[1]。GBS感染可引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等疾病，甚至引起新生兒死亡[2]。本研究通過對(duì)上海長(zhǎng)寧地區(qū)35～37周圍產(chǎn)期孕婦GBS感染及耐藥情況進(jìn)行分析，旨在積極采取預(yù)防及治療措施減少圍產(chǎn)期GBS感染提供較為可靠的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1-12月在本院就診的10 158例孕周為35～37周的圍產(chǎn)期孕婦為研究對(duì)象，并對(duì)所有研究對(duì)象的陰道分泌物拭子進(jìn)行GBS的檢測(cè)。

1.2儀器與試劑 含5%綿羊血的哥倫比亞血平皿購(gòu)自安圖生物公司；含5%綿羊血的MH瓊脂平皿(9 era)購(gòu)自科瑪嘉公司；藥敏紙片、T-H肉湯為英國(guó)OXOID公司產(chǎn)品；質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌(ATCC25923)。

1.3方法

1.3.1取材 參照文獻(xiàn)[3]推薦的取材方法，對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行取材：先擦去外陰分泌物，將無(wú)菌陰道棉拭子放入陰道下1/3內(nèi)，旋轉(zhuǎn)l周采取陰道分泌物。

1.3.2GBS的分離與鑒定 將陰道拭子置于T-H肉湯管中進(jìn)行增菌培養(yǎng)18～24 h；再分別接種到哥倫比亞血平皿上，并在5%～10%CO、35 ℃的孵箱孵育18～24 h。觀察血平皿上菌落特點(diǎn)，挑取灰白色、表面光滑、有乳光、半透明、β溶血、中等大小的菌落進(jìn)行觸酶試驗(yàn)和CAMP實(shí)驗(yàn)。當(dāng)觸酶試驗(yàn)陰性、CAMP實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，即為GBS。

1.3.3GBS藥敏試驗(yàn) 采用紙片擴(kuò)散法(K-B法)進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，按美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2016版標(biāo)準(zhǔn)判斷藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用WHONET5.6軟件分析藥敏數(shù)據(jù)。采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1GBS感染情況 對(duì)10 158例圍產(chǎn)期孕婦陰道分泌物培養(yǎng)，培養(yǎng)鑒定結(jié)果顯示640例GBS陽(yáng)性，陽(yáng)性率為6.3%。

2.2各季節(jié)GBS感染分析 2016年1-12月上海長(zhǎng)寧地區(qū)35～37周孕婦生殖道GBS檢測(cè)中，春季(3～5月)陽(yáng)性檢出率最高，為7.49%(185/2 467)，夏季(6～8月)為5.79%(143/2 469)，秋季(9～11月)為5.73%(141/2 459)，冬季(12～2月)為6.18%(171/2 763)。春季與其他季節(jié)陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而其他各季節(jié)陽(yáng)性檢出率之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.3各年齡段GBS感染分析 <26歲GBS陽(yáng)性檢出率為4.15%(20/482)，26～<31歲檢出率為5.54%(305/5 510)，31～≤35歲檢出率為7.62%(269/3 528)，>35歲檢出率為7.21%(46/638)。組間比較結(jié)果顯示，<26歲與31～≤35歲相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；<26歲與>35歲年齡組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；26～<31歲與31～≤35歲年齡組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。

2.4GBS對(duì)抗菌藥物的敏感性及分析 640例培養(yǎng)陽(yáng)性菌株均進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，7種藥物結(jié)果分析顯示：GBS陽(yáng)性菌株對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、利奈唑烷、頭孢噻肟均敏感，對(duì)紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星耐藥率分別為59.22%(379/640)、57.03%(365/640)和33.75%(216/640)。

3 討 論

GBS是孕婦產(chǎn)褥期膿毒血癥和新生兒腦膜炎的重要致病因素。它寄生在產(chǎn)婦生殖道，可引起產(chǎn)后感染、菌血癥、心內(nèi)膜炎、皮膚和軟組織感染及骨髓炎[4]。國(guó)內(nèi)外報(bào)道顯示，GBS產(chǎn)生的β溶血素/細(xì)胞溶素可破壞母胎屏障，通過羊膜，感染羊水，從而引起胎膜早破、早產(chǎn)，新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等新生兒感染性疾病，甚至導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)死亡[5-6]。

本研究結(jié)果顯示，上海長(zhǎng)寧地區(qū)35～37周孕婦GBS感染率為6.3%，高于國(guó)內(nèi)報(bào)道的江蘇揚(yáng)州地區(qū)的4.12%[7]和紹興地區(qū)的4.6%[8]，低于廣東東莞的9.1%[9]，北京地區(qū)9.2%[10]及佛山地區(qū)的13.7%[11]。導(dǎo)致各地區(qū)GBS感染率存在差異的原因可能為：(1)人群差異，與各地區(qū)人群的生活環(huán)境、生活方式等相關(guān)；(2)檢測(cè)方法不同，本研究采用經(jīng)典細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定方法，相比實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)方法靈敏度會(huì)相對(duì)降低[10]；(3)標(biāo)本來(lái)源不同，本研究只采集陰道分泌物標(biāo)本，而部分研究取材是同時(shí)取陰道分泌物和直腸分泌物進(jìn)行檢測(cè)。

本研究結(jié)果顯示，各季節(jié)GBS感染率存在差異，春季的感染率明顯高于其他季節(jié)，主要因?yàn)榇杭咎鞖舛嘧?，雨水增多，加上早晚溫差大，?dǎo)致人體調(diào)節(jié)功能紊亂，更容易使得GBS定植。同時(shí)，不同的年齡階段孕婦生殖道GBS感染存在顯著差異，>35歲和31～≤35歲孕婦的GBS感染率明顯高于其他兩組，說(shuō)明上海長(zhǎng)寧地區(qū)圍產(chǎn)期孕婦GBS感染情況可能與年齡結(jié)構(gòu)存在一定的關(guān)系。隨著“二孩”政策的全面放開，30歲以后生育的女性所占比例將大大提高。從本研究結(jié)果可以看出，30歲以后的生育的女性GBS感染陽(yáng)性率較高，因此對(duì)于孕期GBS的檢測(cè)提出了更高的要求。

640株GBS藥敏分析結(jié)果顯示，GBS菌株對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、利奈唑烷、頭孢噻肟耐藥率為0.00%，說(shuō)明在本院尚未出現(xiàn)青霉素和萬(wàn)古霉素耐藥菌株。萬(wàn)古霉素不良反應(yīng)較大，包括腎損害及耳毒性，孕婦不宜使用，嚴(yán)重感染時(shí)推薦使用利奈唑烷。青霉素不良反應(yīng)較小，是孕婦及新生兒治療GBS感染的首選用藥。對(duì)青霉素輕度過敏者建議使用頭孢菌素；對(duì)青霉素和頭孢菌素同時(shí)過敏者建議使用紅霉素和克林霉素，但結(jié)果顯示GBS對(duì)紅霉素和克林霉素耐藥率均超過50%以上，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)GBS耐藥性的監(jiān)測(cè)以防耐藥菌株的出現(xiàn)和擴(kuò)散。

綜上所述，上海長(zhǎng)寧地區(qū)孕晚期GBS感染率相對(duì)較高，與年齡、季節(jié)相關(guān)性大；青霉素仍可作為孕婦治療GBS感染的首選治療藥物，GBS陽(yáng)性的孕婦應(yīng)立即進(jìn)行抗菌藥物干預(yù)治療，以保證母嬰安全。