李洋麗　　潛麗俊

[摘要] 目的 探討兒童膿毒癥患者治療前后氧化應(yīng)激及腸黏膜通透性的變化。 方法 選取2016年1月～2017年12月在該院住院治療的兒童膿毒癥患者40例為觀察組，予以抗感染、液體復(fù)蘇、營(yíng)養(yǎng)支持和原發(fā)病治療等基礎(chǔ)治療。觀察治療前和治療7 d后血清氧化應(yīng)激指標(biāo)[活性氧（ROS）、脂質(zhì)過(guò)氧化氫（LHP）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）]和腸黏膜通透性指標(biāo)[內(nèi)毒素和二胺氧化酶（DAO）]水平的變化。另選擇同期在該院體檢的正常健康兒童30例為對(duì)照組。 結(jié)果 觀察組治療前血清ROS和LHP水平明顯高于對(duì)照組，血清GSH-Px水平明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。治療7 d后，血清ROS和LHP水平較治療前明顯下降，血清GSH-Px水平較前明顯上升（P<0.05）。同時(shí)觀察組治療前血清內(nèi)毒素和DAO水平明顯高于對(duì)照組（P<0.05）。治療7 d后，血清內(nèi)毒素和DAO水平較治療前明顯下降（P<0.05）。 結(jié)論 兒童膿毒癥患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激紊亂及腸黏膜通透性異常，在其診斷和治療中起重要作用。血清ROS、LHP、GSH-Px、內(nèi)毒素和DAO水平的變化可作為兒童膿毒癥患者療效評(píng)價(jià)的敏感血清學(xué)指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 膿毒癥；兒童；氧化應(yīng)激；腸黏膜通透性

[中圖分類號(hào)] R725.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2018）32-0058-04

Changes of oxidative stress and intestinal mucosal permeability in children with sepsis

LI Yangli QIAN Lijun

Department of Pediatrics， Lishui Center Hospital in Zhejiang Province， Lishui 323000， China

[Abstract] Objective To investigate the changes of oxidative stress and intestinal mucosal permeability in children with sepsis before and after treatment. Methods 40 patients with sepsis who were hospitalized in the hospital from January 2016 to December 2017 were selected as the observation group and were given basic treatment such as anti-infection， fluid resuscitation， nutritional support， and primary disease treatment. The changes of serum oxidative stress parameters （reactive oxygen species （ROS）， lipid hydroperoxide （LHP） and glutathione peroxidase （GSH-Px）） and intestinal mucosal permeability indexes （endotoxin and diamine oxidase （DAO）） before treatment and after 7 days of treatment were observed. Another 30 normal healthy children who were examined in the same hospital during the same period were selected as the control group. Results The serum ROS and LHP levels in the observation group were significantly higher than those in the control group， and the serum GSH-Px level in the observation group was significantly lower than that in the control group（P<0.05）. After 7 days of treatment， serum ROS and LHP levels were significantly lower than those before treatment， and serum GSH-Px level was significantly higher than that before（P<0.05）. At the same time， serum endotoxin and DAO levels in the observation group were significantly higher than those in the control group before treatment（P<0.05）. After 7 days of treatment， the levels of serum endotoxin and DAO were significantly lower than those before treatment（P<0.05）. Conclusion There are oxidative stress disorders and intestinal permeability abnormalities in children with sepsis， which play an important role in diagnosis and treatment. The changes of serum ROS， LHP， GSH-Px， endotoxin and DAO levels can be used as sensitive serological markers for evaluating the efficacy of sepsis in children.

[Key words] Sepsis； Children； Oxidative stress； Intestinal mucosa permeability

膿毒癥是兒童較常見的感染性疾病，其病情危重，進(jìn)展較迅速，可引起感染性休克和多器官功能衰竭，死亡率較高[1-3]。膿毒癥的致病機(jī)制十分復(fù)雜，最新研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激引起的氧自由基損傷及腸黏膜屏障引起的腸黏膜通透性變化在其發(fā)病中作用越來(lái)越受重視[4，5]。氧自由基損傷及腸黏膜通透性直接測(cè)定均較困難，多采用間接血清學(xué)指標(biāo)評(píng)估，目前常用的氧自由基損傷指標(biāo)包括活性氧（Reactive oxygen species，ROS）、脂質(zhì)過(guò)氧化氫（Lipid hydrogen peroxide，LHP）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）；目前常用的評(píng)估腸黏膜通透性指標(biāo)為內(nèi)毒素和二胺氧化酶（Diamine oxidase，DAO）[6，7]。本研究分析了兒童膿毒癥患者治療前后氧化應(yīng)激指標(biāo)（ROS、LDH和GSH-Px）和腸黏膜通透性指標(biāo)（內(nèi)毒素和DAO）水平的變化，并與正常健康兒童相比較，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月～2017年12月我院住院治療的兒童膿毒癥患者40例為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)2005年制訂的的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；②發(fā)病時(shí)間<24 h，年齡4～14歲；③預(yù)計(jì)生存時(shí)間>1周。排除標(biāo)準(zhǔn)：①糖尿病或糖耐量減低患兒；②膿毒癥休克及預(yù)計(jì)生存時(shí)間<1周的患兒；③免疫功能低下或長(zhǎng)期使用免疫抑制劑者。另選擇同期在我院體檢的正常健康兒童30例為對(duì)照組。兩組兒童的性別構(gòu)成、年齡分布、體重等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

觀察組患兒予以廣譜抗生素抗感染治療（亞胺培南/西司他丁0.015 g/（kg·m2），q6～8 h）、補(bǔ)充液體（晶體液/膠體液=3：1）復(fù)蘇、營(yíng)養(yǎng)支持和原發(fā)病治療等基礎(chǔ)治療。觀察患兒治療前和治療7 d后血清氧化應(yīng)激指標(biāo)（ROS、LHP和GSH-Px）和腸黏膜通透性指標(biāo)（內(nèi)毒素和DAO）的變化。對(duì)照組兒童僅在納入研究時(shí)測(cè)定血清ROS、LHP、GSH-Px、內(nèi)毒素和DAO指標(biāo)水平。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 標(biāo)本采集 取患兒靜脈血約3～5 mL，2500 r/min離心機(jī)低溫離心15 min分離出血清并進(jìn)行分裝，凍存于-70℃冰箱備用。

1.3.2 血清ROS、LHP和GSH-Px水平測(cè)定 采用貝克曼庫(kù)爾特AU680全自動(dòng)生化儀測(cè)定血清ROS和LHP水平，采用硫代巴比妥酸比色法測(cè)定GSH-Px水平，試劑盒由上海寶曼生物公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3.3 血清內(nèi)毒素和DAO水平測(cè)定 分別采用鱟試劑動(dòng)態(tài)比濁法和聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清內(nèi)毒素和DAO水平，試劑盒分別由廈門市鱟試劑公司和南京建成科技公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析處理，組間比較采用成組t檢驗(yàn)，觀察組治療前后組內(nèi)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后血清ROS、LHP和GSH-Px水平比較

觀察組治療前血清ROS和LHP水平明顯高于對(duì)照組，血清GSH-Px水平明顯低于對(duì)照組（P<0.05）。治療7 d后，血清ROS和LHP水平較治療前明顯下降，血清GSH-Px水平較前明顯上升（P<0.05）。

2.2 兩組治療前后血清內(nèi)毒素和DAO水平比較

觀察組治療前血清內(nèi)毒素和DAO水平明顯高于對(duì)照組（P<0.05）。治療7 d后，血清內(nèi)毒素和DAO水平較治療前明顯下降（P<0.05）。

3 討論

近年來(lái)氧化應(yīng)激，尤其是氧自由基損傷在兒童膿毒癥病因及發(fā)病機(jī)制中扮演重要角色[9，10]。膿毒癥繼發(fā)于各種嚴(yán)重感染，大量炎癥因子對(duì)組織器官造成損傷；同時(shí)激活腎素-血管緊張素系統(tǒng)導(dǎo)致能量代謝障礙。膿毒癥發(fā)生后，大量炎癥因子釋放入血并活躍氧化應(yīng)激過(guò)程，使得氧代謝產(chǎn)物ROS、LH過(guò)度產(chǎn)生，進(jìn)而導(dǎo)致線粒體ATP產(chǎn)生不足，細(xì)胞能量衰竭出現(xiàn)。氧化應(yīng)激是膿毒癥多臟器損傷的根本機(jī)制之一，也可客觀衡量膿毒癥病情嚴(yán)重程度；GSH-Px可使有毒的過(guò)氧化物還原成無(wú)毒的羥基化合物，促進(jìn)過(guò)氧化氫的分解，使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能免受過(guò)氧化物的損害。因此，ROS和LHP水平變化反應(yīng)機(jī)體清除氧自由基能力，GSH-Px水平變化可反應(yīng)機(jī)體抗氧自由基的能力，因此，ROS、LHP和GSH-Px水平變化可作為評(píng)估氧化應(yīng)激的指標(biāo)[11-14]。

本研究發(fā)現(xiàn)觀察組患兒血清ROS和LHP水平高于對(duì)照組，血清GSH-Px水平低于對(duì)照組，且治療7 d后，觀察組血清ROS和LHP水平較前明顯下降，血清GSH-Px水平較前明顯上升。提示兒童膿毒癥患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激紊亂，在其診斷和治療中起重要作用。血清ROS、LHP和GSH-Px水平的變化可作為兒童膿毒癥患者療效評(píng)價(jià)的敏感血清學(xué)指標(biāo)。

研究發(fā)現(xiàn)，腸源性內(nèi)毒素血癥以及其引起腸黏膜通透性上升在膿毒癥發(fā)病整個(gè)過(guò)程中起著及其重要的作用[15-17]。膿毒癥過(guò)程中最易受累的器官是胃腸道，而胃腸道抵御膿毒癥攻擊最重要的結(jié)構(gòu)即為腸黏膜屏障，對(duì)腸黏膜屏障功能的保護(hù)在膿毒癥的防治中起著關(guān)鍵的作用。膿毒癥的病原體常為革蘭陰性桿菌，其繁殖后可大量分泌內(nèi)毒素形成內(nèi)毒素血癥；加上膿毒癥患者交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)興奮性上升，使得腸黏膜中的毛細(xì)血管收縮和血流供應(yīng)量明顯減少，導(dǎo)致腸黏膜缺血缺氧性改變，而且腸黏膜絨毛頂端上皮脫落，上皮細(xì)胞旁的路徑明顯增加，導(dǎo)致腸黏膜結(jié)構(gòu)和功能受損，腸道黏膜的通透性明顯增加，損害腸屏障功能及黏膜上皮細(xì)胞，內(nèi)毒素及細(xì)菌大量移位進(jìn)入血循環(huán)，刺激巨噬細(xì)胞及單核細(xì)胞、釋放大量炎性介質(zhì)及細(xì)胞因子引發(fā)炎癥因子級(jí)聯(lián)效應(yīng)、進(jìn)一步誘發(fā)腸黏膜功能障礙，形成惡性循環(huán)[18，19]。腸黏膜通透性常采用間接血清指標(biāo)測(cè)定，常用有內(nèi)毒素和DAO。當(dāng)腸黏膜通透性上升時(shí)，內(nèi)毒素和DAO經(jīng)受損腸黏膜大量進(jìn)入血液中引起其水平明顯升高，因此，血清內(nèi)毒素和DAO指標(biāo)可評(píng)估判斷腸黏膜的通透性和腸黏膜屏障受損情況，能更好的預(yù)測(cè)膿毒癥患者病情的程度及患者的死亡率[20-21]。

本研究示觀察組患兒治療前血清內(nèi)毒素和DAO水平明顯高于對(duì)照組。治療7 d后，血清內(nèi)毒素和DAO水平較治療前明顯下降。提示兒童膿毒癥患者體內(nèi)存在腸黏膜通透性異常，在其診斷和治療中起重要作用。血清內(nèi)毒素和DAO水平的變化可作為兒童膿毒癥患者療效評(píng)價(jià)的敏感血清學(xué)指標(biāo)。

總之，兒童膿毒癥患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激紊亂及腸黏膜通透性異常，在其診斷和治療中起重要作用。血清ROS、LHP、GSH-Px、內(nèi)毒素和DAO水平的變化可作為兒童膿毒癥患者療效評(píng)價(jià)的敏感血清學(xué)指標(biāo)。

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（收稿日期：2018-05-30）