陳曉宇

[摘要] 目的 探討血清類風濕因子（rheumatoid factor，RF）、抗環(huán)瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide，CCP）抗體和抗聚角蛋白微絲蛋白抗體（antifilaggrin antibody，AFA）聯(lián)合檢測對早期診斷類風濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）的臨床價值。 方法 選取2016年1月～2018年1月我院風濕免疫科收治的75例RA患者設(shè)為研究組，另選取非RA患者105例設(shè)為對照組。以免疫散射比濁法測定血清RF水平，ELISA法檢測抗CCP抗體和間接免疫熒光法測AFA抗體水平，回顧性統(tǒng)計分析三項指標與RA發(fā)病的相關(guān)性，血清RF、抗CCP抗體、AFA抗體單獨檢測與不同組合下聯(lián)合檢測診斷RA的價值。 結(jié)果 研究組三種指標聯(lián)合檢測檢出率最高，為81.33%；單獨檢測AFA抗體檢出率最低，為46.67%；研究組和對照組各項指標檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；回歸分析各指標系數(shù)均為正值，OR值均大于1（P<0.05）；單獨檢測中，靈敏度以RF最高（73.33%），特異性最高的是AFA抗體（98.10%），陽性預(yù)測值、陽性似然比以AFA抗體最高（94.59%，24.50），陰性預(yù)測值以RF、抗CCP最高（二者相近，分別為79.80%、79.03%），陰性似然比以RF最低（0.35）；聯(lián)合檢測中，靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值以RF+抗CCP+AFA最高，陰性似然比以RF+抗CCP+AFA最低（0.19）。 結(jié)論 血清RF、抗CCP抗體、AFA抗體均是RA的正相關(guān)危險因素，血清RF+抗CCP+AFA抗體聯(lián)合檢測能顯著提高單獨指標陽性者RA診斷率，更好的估計RA患病率。

[關(guān)鍵詞] 類風濕因子；抗CCP抗體；AFA抗體；類風濕關(guān)節(jié)炎

[中圖分類號] R593.22 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2018）32-0001-04

The value of combined detection of serum RF， anti-CCP antibody and AFA antibody in the early diagnosis of rheumatoid Arthritis

CHEN Xiaoyu

Clinical Laboratory， Jiujiang First People's Hospital in Jiangxi Province， Jiujiang 332000， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical value of combined detection of serum rheumatoid factor（RF）， anti-cyclic citrullinated peptide （CCP） antibody and anti-filaggrin antibody （AFA） in the early diagnosis rheumatoid arthritis （RA）. Methods A total of 75 RA patients who were admitted to the rheumatology and immunology department in our hospital from January 2016 to January 2018 were selected as the study group. Another 105 patients with non-RA were selected as the control group. The serum RF levels were determined by immunoturbidimetry. ELISA assay was used to detect anti-CCP antibodies and indirect immunofluorescence assay was used to detect AFA antibody levels. Retrospective statistical analysis was carried out for the correlation between the three indicators and the incidence of RA， as well as the value of serum RF， anti-CCP antibody， AFA antibody detection alone and different combined detections in the diagnosis of RA. Results The combined detection rate of the three indicators in the study group was the highest， which was 81.33%； the detection rate of AFA antibody alone was the lowest， which was 46.67%； there was statistically significant difference in the detection rate of all indicators between the study group and the control group（P<0.05）； regression analysis showed that all index coefficients were positive， and the OR values were all greater than 1（P<0.05）； in the single detection， the sensitivity was the highest in RF（73.33%）. The specificity was the highest in AFA antibody （98.10%）. The positive predictive value and positive likelihood ratio were the highest in AFA antibody （94.59%， 24.50）. The negative predictive value was the highest in RF and anti-CCP （the two were similar， 79.80%， 79.03%， respectively）. The negative likelihood ratio was the lowest in RF（0.35）； in the combined detection， sensitivity， specificity， positive predictive value， and negative predictive value were highest in RF+anti-CCP+AFA. The negative likelihood ratio was the lowest （0.19） in RF+anti-CCP+AFA. Conclusion Serum RF， anti-CCP and AFA antibodies are positive risk factors for RA. The combined detection of serum RF+anti-CCP+AFA antibody can significantly improve the diagnostic rate of RA in individuals with positive index alone， and better estimate the morbidity of RA.

[Key words] Rheumatoid factor （RF）； Anti-CCP antibody； AFA antibody； Rheumatoid arthritis （RA）

類風濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以手、腕等關(guān)節(jié)進行性功能障礙、腫痛、變形、受損，反復發(fā)作的、多系統(tǒng)性炎性自身免疫性疾病，發(fā)作緩慢，且比較隱匿，可引起不可逆的骨關(guān)節(jié)破壞，一旦發(fā)生需要長期服藥控制病情。據(jù)報道統(tǒng)計，我國RA患者有300多萬人[1]，已成為勞動力喪失的重要原因[2]，多見于25～50歲中年女性。由于RA患者的早期表現(xiàn)不明顯，但是至今還沒有公認的實驗室診斷指標，目前臨床上多參照美國風濕病學會提出的7項標準對RA進行診斷，并輔以臨床表現(xiàn)、影像學檢查如X射線以及實驗室檢查如RF，但當患者符合該診斷標準時，其骨關(guān)節(jié)通常已發(fā)生損壞。且RF特異性較差，早期診斷正確率低，常造成誤診、漏診，給RA的早期診斷帶來一定困難[3]。因此，我們需要找到更簡便實用的、靈敏度和特異度較高的檢測指標或聯(lián)合方法，對RA行早期診斷。隨著臨床對RA血清學研究不斷深入，發(fā)現(xiàn)多數(shù)自身抗體對在活化后的自身抗原的淋巴細胞或漿細胞產(chǎn)生，近年來國內(nèi)外相繼已在RA中發(fā)現(xiàn)RF、抗CCP抗體、抗聚角蛋白微絲蛋白抗體（AFA）、抗角蛋白抗體（antikeratin antibody，AKA）[4]、抗Sa、抗BiP抗體[5]、抗核周因子抗體（antiperinuclear factor autoantibody，APF）[6]等多種自身抗體，具有較高特異性，且許多指標于RA發(fā)病早期便可出現(xiàn)異常[7]。本研究旨在通過檢測血清RF、抗CCP抗體和AFA抗體三項指標，探討其在RA診斷中單一及聯(lián)合檢測的價值，為RA的早期診斷提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取選取2016年1月～2018年1月我院風濕免疫科門診就診及住院收治的75例RA患者設(shè)為研究組，均符合2010年美國風濕病協(xié)會的新RA診斷分類標準[8]。其中男32例，女43例，平均年齡（45.3±12.6）歲，病程均≤1年，正規(guī)治療≤0.5年；另選取其他自身免疫性疾病非RA患者或健康體檢者105例設(shè)為對照組，其中男44例，女61例，平均年齡（44.8±13.0）歲；其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）26例、血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病12例、骨性關(guān)節(jié)炎13例、原發(fā)性干燥綜合征8例、強直性脊柱炎11例，正常健康體檢者35例，相關(guān)診斷皆符合國內(nèi)相應(yīng)標準[9-11]。所選病例及方案經(jīng)倫理學委員會批準，患者皆已知情同意，并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

所有研究對象均空腹，在清晨抽取靜脈血，采血后立即將血清離心分離，備用。RF定量檢測采用膠乳增強散射比濁法進行檢測，試劑為配套試劑，使用美國貝克曼庫爾特公司IM-MAGE特定蛋白分析儀。RF>20 IU/L判為陽性，RF<20 IU/L判為陰性；抗CCP抗體和抗AFA抗體檢測均采用酶聯(lián)免疫吸附法測定[12]，EXL800酶標儀（美國BIOTEK公司），嚴格按照德國歐蒙試劑盒說明書進行操作，抗CCP抗體>25 RU/mL為陽性，抗CCP抗體<25 RU/mL為陰性；抗AFA抗體同上。

1.3 觀察指標

分析其三者單獨以及聯(lián)合檢測的靈敏度以及特異度等診斷指標。①靈敏度；②特異度；以及相應(yīng)診斷實驗指標陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、陽性似然比、陰性似然比；③OR（odds ratio）值：當OR值>1，OR值越大，表明相應(yīng)指標與疾病相關(guān)性越高，是一種危險因素[13]。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS22.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，危險因素相關(guān)性分析采用Logistic回歸分析；計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組RF、抗CCP抗體、AFA抗體單獨檢測與聯(lián)合檢測結(jié)果

研究組和對照組的單獨檢測和聯(lián)合檢測結(jié)果如表1所示，研究組三種指標聯(lián)合檢測檢出率最高，為81.33%；單獨檢測AFA抗體檢出率最低，為46.67%；研究組和對照組各項指標檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2.2 RA發(fā)病相關(guān)危險因素分析

Logistic回歸分析顯示，血清RF、抗CCP抗體、AFA抗體OR值均>1，表明三項指標皆為RA發(fā)病的危險因素（P<0.01），且關(guān)聯(lián)強度較強。

2.3 血清RF、抗CCP抗體、AFA抗體指標單獨及不同組合聯(lián)合檢測在RA診斷中的各項結(jié)果分析

單獨檢測中，靈敏度以RF最高（73.33%），但RF特異性最低（75.23%），特異性最高的是AFA抗體（98.10%），陽性預(yù)測值、陽性似然比以AFA抗體最高（94.59%，24.50），RF最低（67.90%，2.96），陰性預(yù)測值以RF、抗CCP最高（二者相近，分別為79.80%、79.03%），陰性似然比以RF最低（0.35）；聯(lián)合檢測中，靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值以RF+抗CCP+AFA最高（81.33%、100.00%、100.00%、88.24%），陰性似然比以RF+抗CCP+AFA最低（0.19）。表明三者聯(lián)合檢測能顯著提高診斷單獨指標陽性者RA患病率，更好的估計RA患病率。

3 討論

RA是一種自身免疫性結(jié)締組織疾病，致殘率較高，多見于中年女性，RA主要以關(guān)節(jié)滑膜炎癥與增生為主要病理改變[14]，主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)慢性炎癥，影響患者日常生活。若RA未得到及時診斷、治療，則會對機體活動產(chǎn)生嚴重影響，引發(fā)不可逆性骨關(guān)節(jié)系統(tǒng)損害[15]，甚者喪失勞動能力，其治療和康復護理對患者、家庭及社會來說，在精神和經(jīng)濟方面均造成很大壓力。因此，現(xiàn)階段臨床學者對RA治療的研究，逐漸轉(zhuǎn)為以如何早期診斷、早期干預(yù)及阻斷疾病進程為主。

以血清指標檢測診斷RA，為近年臨床上的重要方式，其中RF為重要血清學指標之一，該指標靈敏度較高，在RA發(fā)病初期便會異常增高，其滴度和RA病情具有密切負相關(guān)性，為疾病損傷及預(yù)后評估中的重要因子。但其特異度偏低，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、惡性腫瘤、原發(fā)性干燥綜合征等疾病患者，甚至是健康老年個體中，均可出現(xiàn)血清RF水平上升，極易造成漏診或誤診[16]，增加RA早期診斷難度，使患者錯失最佳治療時機。本研究結(jié)果顯示，RF診斷特異度僅為75.23%，與上述觀點具有一致性。因此RF作為RA早期診斷重要依據(jù)，需聯(lián)合其他血清抗體檢測進行聯(lián)合檢測以提高RA的診斷率。研究發(fā)現(xiàn)多種免疫細胞及抗體并聯(lián)檢測敏感度高達93.56%，陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、約登指數(shù)等明顯增大[17]，陰性似然比明顯降低。

因此，在RF檢測的基礎(chǔ)上，尋找更為有效的RA血清學診斷指標進行聯(lián)合檢測就變得尤為重要。歐洲抗風濕病聯(lián)盟及美國風濕病學會制定的RA臨床診斷標準中，將抗CCP抗體定為RA診斷血清學標志性抗體[18]?；貧w分析及相關(guān)性分析證實，抗CCP抗體與RA發(fā)病及進展也具有密切相關(guān)性[19]，這與本研究結(jié)果相一致，在RA初期便會異常增高，其增高幅度和RA病情活動度和骨關(guān)節(jié)侵損關(guān)系頗為密切。因此可以將抗CCP抗體檢測用于RA診斷和病情及預(yù)后評估的指標；AFA對RA的診斷有很高的特異度[20]，但目前用于AFA檢測的絲聚蛋白抗原，來源多為人乳房皮膚或嬰兒包皮，存在個體差異性大，或可影響結(jié)果穩(wěn)定性。

本次研究結(jié)果表明，研究組血清RF、抗CCP抗體和AFA抗體水平三種指標聯(lián)合檢測檢出率最高，為81.33%；單獨檢測AFA抗體檢出率最低，為46.67%；研究組和對照組各項指標檢出率比較，有顯著統(tǒng)計學差異（P<0.05）；血清RF、抗CCP抗體、AFA抗體與RA的相關(guān)性分析顯示，OR值均大于1，表明三項指標皆為RA發(fā)病的危險因素（P<0.05）；單獨檢測中，靈敏度以RF最高（73.33%），特異性最高的是AFA抗體（98.10%），陽性預(yù)測值、陽性似然比以AFA抗體最高（94.59%、24.50），陰性預(yù)測值以RF、抗CCP最高（二者相近，分別為79.80%、79.03%），陰性似然比以RF最低（0.35）；聯(lián)合檢測中，靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值以RF+抗CCP+AFA最高（81.33%、100.00%、100.00%、88.24%），陰性似然比以RF+抗CCP+AFA最低（0.19）。表明三者聯(lián)合檢測能顯著提高診斷單獨指標陽性者RA患病率，更好地估計RA患病率。通過比較本研究中，3種抗體單獨及不同組合聯(lián)合檢測在RA診斷中的價值，發(fā)現(xiàn)RF單獨檢測具有客觀局限性，RF+抗CCP+AFA聯(lián)合檢測診斷靈敏度及特異度等各項指標較各指標單獨檢測和兩兩組合均高，表明通過聯(lián)合檢測可更顯著提高RA的早期診斷率，降低漏診及誤診率，給患者的治療以最佳時機，利于改善RA的預(yù)后，穩(wěn)定性最佳，最具臨床價值。

綜上，本研究對于RA患者其他自身抗體，形成的抗體網(wǎng)絡(luò)的交叉作用，是否存在于每種抗體之間，是否影響其在RA診斷中的敏感度和特異度等，尚未有足夠的臨床樣本數(shù)量支撐和更深入的相關(guān)性研究，有待以后加強。

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（收稿日期：2018-08-02）