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華支睪吸蟲可寄生于人肝膽管內(nèi)引起肝膽病變，國內(nèi)的流行病學調(diào)查顯示華支睪吸蟲感染可能是膽管癌的病因之一[1]，WHO國際癌癥研究署于2009年將華支睪吸蟲確定為膽管細胞癌明確致癌物[2]。1988-1992年和2001-2004年兩次全國調(diào)查顯示人群感染水平呈上升趨勢，尤其是廣東由2.09%上升到6.20%，其流行地區(qū)的感染率高達17.48%[3]。淡水魚類是華支睪吸蟲的第二中間宿主，不同種類的淡水魚對華支睪吸蟲的易感程度不同，文獻報道的調(diào)查多采集野生小型淡水魚，感染率較高[4-5]，一般認為進食生或半生含華支睪吸蟲囊蚴的淡水魚是感染的主要途徑，以鯇魚、鳙魚等較大型的淡水魚多見，但國內(nèi)調(diào)查數(shù)據(jù)較少，廣東省陽山縣對餐館的調(diào)查結(jié)果顯示，鯇魚的華支睪吸蟲囊蚴感染率為2.22%(2/90)，另外6種非供生食的小魚的感染率均高于鯇魚，其中麥穗魚感染率高達55.56%[6]。吉林省白城地區(qū)市售淡水魚華支睪吸蟲囊蚴感染情況分別為麥穗魚33.3%、船丁魚29.6%、鯽魚10.0%，草魚8.5%[7]。本次針對廣東某地區(qū)養(yǎng)殖、零售和餐飲市場上供生食的淡水魚品種開展調(diào)查，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1樣品采集 于2016年8-10月，在廣東省某華支睪吸蟲病高發(fā)地區(qū)養(yǎng)殖(魚塘)和零售環(huán)節(jié)(農(nóng)貿(mào)市場和超市)采集用于生食的鮮活淡水魚樣品，包括鯇魚、鳙魚、鯉魚、鯽魚等；在餐飲環(huán)節(jié)采集生魚片樣品。

1.2檢驗方法 采用酶消化法進行檢測，其中①鮮活魚樣品去除頭、鱗、骨、內(nèi)臟后，用清水沖洗干凈，將魚肉剪成小塊；②生魚片樣品檢測量不低于150 g。魚肉經(jīng)絞碎后以1∶4的比例加入消化液，充分攪勻后置37 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)約12 h，在消化過程中攪動2～3次，將消化后的樣品用20目/吋的銅篩過濾，濾液倒入500 mL三角燒杯，靜置沉淀20～30 min，緩慢棄去上清液，加清潔水至500 mL，攪拌后再沉淀20～30 min，棄去上清液，如此法反復(fù)清洗3次以上，至上清液透明為止。棄去上清液，吸取沉渣鏡檢有無囊蚴。

1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計學分析，數(shù)據(jù)采用卡方檢驗，檢驗水準為α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1鮮活淡水魚樣品結(jié)果分析 調(diào)查結(jié)果顯示鮮活淡水魚華支睪吸蟲囊蚴檢出率為17.24%(10/58)。從淡水魚種類上分析，采集的主要淡水魚種類均檢出華支睪吸蟲囊蚴。具體情況見表1。

表1 不同種類鮮活魚樣品的感染情況

Tab.1 Incidence of Clonorchis sinensis metacercariae in different kinds of fresh fish samples

淡水魚種類Fishspecies樣品數(shù)量(份)No.samplestested囊蚴陽性樣品數(shù)量(份)No.samplespositive檢出率(%)Detectionrate鯇魚2015.00鯽魚12433.33鳙魚11218.18鯪魚10110.00鯉魚3266.67鰱魚100羅非魚100合計581017.24

從采樣地點類型上分析，鮮活淡水魚樣品分別采自當?shù)佤~塘、消費量較大的農(nóng)貿(mào)市場和超市。采自魚塘、農(nóng)貿(mào)市場的樣品華支睪吸蟲囊蚴檢出率分別為24.24%(8/33)和10.00%(2/20)，采自超市的樣品未檢出(0/5)。所調(diào)查的6個魚塘中有3個魚塘建有直接入塘的廁所(魚塘A、B和C)，均檢出華支睪吸蟲囊蚴，從另1個建有直接入塘的動物欄并用動物糞便喂魚的魚塘中也有檢出(魚塘E)，無直接入塘的廁所或動物欄的魚塘F未檢出(表2)。

農(nóng)貿(mào)市場售賣的鮮活魚大多進貨來自當?shù)啬乘a(chǎn)品批發(fā)市場，少量攤販的鮮活魚來自當?shù)佤~塘。本次調(diào)查的20份農(nóng)貿(mào)市場樣品中，2份華支睪吸蟲囊蚴陽性樣品均來自當?shù)佤~塘，魚塘周邊環(huán)境不詳。

2.2生魚片樣品結(jié)果分析 生食淡水魚樣品均采自餐飲環(huán)節(jié)，采集的主要淡水魚種類為鯇魚，采樣形式為生魚片。調(diào)查結(jié)果顯示62份生魚片樣品中有11份檢出華支睪吸蟲囊蚴，檢出率為17.74%。

從采樣地點類型分析，4家餐館檢出華支睪吸蟲囊蚴，占所調(diào)查餐館總量的18.18%(4/22)。多數(shù)餐館的進貨渠道為當?shù)嘏l(fā)市場或農(nóng)貿(mào)市場。值得關(guān)注的是，一家餐館銷售自家魚塘養(yǎng)殖的淡水魚，從該餐館采集的4份生魚片樣品均檢出華支睪吸蟲囊蚴。

2.3華支睪吸蟲囊蚴定量分析 以往的調(diào)查中多采用操作較為簡單的直接壓片法進行檢測，本次調(diào)查統(tǒng)一采用了酶消化法，檢樣量較大，鮮活魚樣品去除頭、鱗、骨、內(nèi)臟后全部魚肉用于檢測，生魚片樣品檢測量不低于150 g。對陽性樣品中的華支睪吸蟲囊蚴進行計數(shù)分析，結(jié)果顯示76.19%的陽性樣品中囊蚴數(shù)量小于10個。

表2 不同魚塘中鮮活魚樣品的感染情況

Tab.2 Incidence of Clonorchis sinensis metacercariae in fresh fish samples from different fish farm

魚塘編號No.fishfarm魚塘環(huán)境Environmentoffishfarm樣品數(shù)量(份)No.samplestested囊蚴陽性樣品數(shù)量(份)No.samplespositive魚塘A建有入塘廁所62魚塘B建有入塘廁所62魚塘C建有入塘廁所52魚塘D建有入塘的動物欄并用動物糞便喂魚50魚塘E建有入塘的動物欄并用動物糞便喂魚62魚塘F無入塘的廁所或動物欄50合計338

3 討 論

本次調(diào)查結(jié)果顯示，鮮活魚樣品華支睪吸蟲囊蚴檢出率為17.24%(10/58)，其中采自魚塘、農(nóng)貿(mào)市場的樣品檢出率分別為24.24%(8/33)、10.00%(2/20)，2份采自農(nóng)貿(mào)市場的陽性樣品也產(chǎn)自當?shù)佤~塘，超市樣品未檢出(0/5)。魚塘的調(diào)查顯示，3個建有直接入塘廁所的魚塘中淡水魚均檢出，具有較高的致病風險，當?shù)厝A支睪吸蟲病流行與此密切相關(guān)。

采自餐飲環(huán)節(jié)的生魚片樣品華支睪吸蟲囊蚴檢出率為17.74%(11/62)，提示在當?shù)剡M食生魚片感染華支睪吸蟲病的風險較高。但制作生魚片的淡水魚無法溯源，不能追溯到源頭。

為提高檢出率，本次調(diào)查均采取酶消化法，結(jié)果顯示76.19%的陽性樣品中囊蚴數(shù)量小于10個，若采取直接壓片法檢測，囊蚴數(shù)量少的樣品很可能漏檢，檢出囊蚴的幾率可能大大降低。但酶消化法耗時耗力，不易作為常規(guī)方法推廣，在日常的監(jiān)測中如何簡便有效地提高檢出率值得探討。

中國寄生蟲病防治工作的開展取得了一定的成績，但兩次全國寄生蟲病調(diào)查顯示中國華支睪吸蟲病流行呈上升趨勢[2]。全球估計有1 500萬華支睪吸蟲感染者，而中國達1 300萬[8-9]，中國作為全球華支睪吸蟲感染的高發(fā)區(qū)，其疾病負擔、流行因素尚未明確，防治形勢嚴峻[10]。本次調(diào)查掌握當?shù)氐~在養(yǎng)殖、零售、餐飲等一系列食品鏈中的華支睪吸蟲囊蚴基本感染情況，結(jié)果顯示當?shù)厝A支睪吸蟲病感染者與魚塘中淡水魚華支睪吸蟲囊蚴的高感染率密切相關(guān)并相互促進。造成該狀況可能與以下因素相關(guān)：第一，淡水養(yǎng)殖衛(wèi)生管理不到位，衛(wèi)生檢驗檢疫工作也相對滯后，淡水魚感染持續(xù)存在；第二，群眾長期以來形成生食淡水魚的飲食習慣難以改變，并且對華支睪吸蟲病的危害性和傳播途徑認識不足。上述因素導(dǎo)致針對華支睪吸蟲病的防治措施未能有效發(fā)揮作用。

結(jié)合本次調(diào)查結(jié)果，除對華支睪吸蟲病流行區(qū)人群進行重點防治以外，必須加強魚塘養(yǎng)殖衛(wèi)生管理、加強淡水魚的檢驗檢疫工作，建立市售淡水魚溯源體系，一旦發(fā)現(xiàn)問題可以及時溯源到養(yǎng)殖地，從源頭治理，避免感染區(qū)域擴大。同時深入開展對群眾的健康教育，使之充分認識到華支睪吸蟲對健康造成的危害，加大農(nóng)村改廁力度，避免人畜糞便直接排入魚塘，提高群眾的食品安全意識，盡量不進食未煮熟煮透的淡水魚。

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