郭春景，王建忠，李 廣，林秋君

（遼寧省農(nóng)業(yè)科學院/農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風險評估實驗室（沈陽），沈陽110161）

0 引言

蔬菜農(nóng)藥殘留問題是菜籃子的隱形殺手，關乎百姓利益、產(chǎn)業(yè)發(fā)展、國家安全。近年來對遼寧省芹菜農(nóng)藥殘留情況的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，氧樂果的檢出率和超標率較高，屬于高敏農(nóng)藥。其他省份芹菜中也存在氧樂果檢出超標情況[1-3]。產(chǎn)生這一問題的最大原因可能是在芹菜生長過程中施用樂果而代謝產(chǎn)生的高毒氧樂果[4-5]。樂果[6]是內(nèi)吸性有機磷殺蟲劑，通過抑制乙酰膽堿酯酶，阻礙神經(jīng)傳導導致害蟲死亡，主要用于防治蚜蟲[7-10]。根據(jù)《食品中農(nóng)藥最大殘留限量(GB 2763—2016)》要求，樂果在芹菜上的允許最大殘留限量值（MRL值）為0.5 mg/kg，而氧樂果的允許最大殘留限量值（MRL值）為0.02 mg/kg。樂果的安全性評估中應充分考慮代謝產(chǎn)物氧樂果的安全風險[11-14]。目前，針對樂果的殘留動態(tài)研究[15-19]多未涉及代謝物氧樂果。王新全等[20]則對豇豆中樂果及氧樂果進行了研究，但對樂果在芹菜上代謝轉(zhuǎn)化為氧樂果并產(chǎn)生膳食風險的相關研究很少。為明確樂果在芹菜不同生育期施用的風險，筆者進行了田間試驗，探討露地栽培模式下，樂果在芹菜上施用的殘留動態(tài)和最終殘留量，以期為芹菜的質(zhì)量安全提供有針對性的建議。

1 材料與方法

1.1 試驗時間、地點

研究田間試驗于2016年7月20日，在沈陽市遼中區(qū)浦東鎮(zhèn)烏伯牛村山久蔬菜生產(chǎn)基地進行，室內(nèi)試驗于2016年11月在遼寧省農(nóng)科院農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風險評估實驗室（沈陽）進行。施藥期間沒有暴雨冰雹等極端天氣，氣候條件正常。

1.2 試驗材料

試驗作物為西芹，購買市售芹菜苗定植。試驗農(nóng)藥為40%樂果乳油，河北中天邦正生物科技股份公司。

1.3 儀器和試劑

1.3.1 儀器 Waters UPLC Xezo TQ超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀，美國Waters公司；中佳HC 3514高速離心機，安徽中科中佳科技有限公司；鼎昊源RS-1渦旋混合器，北京鼎昊源科技有限公司；帕恩特超純水機，北京湘順源科技有限公司；0.22 μm針頭過濾器、50 mL聚丙烯塑料離心管，新康醫(yī)療器械有限公司。

1.3.2 試劑 甲醇、乙腈（色譜純，Merck公司）。

1.3.3 農(nóng)藥標準品 樂果、氧樂果，購自農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（天津）。

1.4 方法

1.4.1 田間試驗設計

（1）試驗小區(qū)15 m2(3 m×5 m)，隔離區(qū)2 m，重復小區(qū)3個。

（2）在生長中期（定植期和采收期中間點），分別以樂果最高登記劑量（低濃度）和最高登記劑量的1.5倍劑量（高濃度）施藥，考察成熟芹菜產(chǎn)品農(nóng)藥累積情況。

（3）在采收期，分別以樂果最高登記劑量（低濃度）和最高登記劑量的1.5倍劑量（高濃度）施藥，分別施藥2次和3次，施藥間隔期為7天。于最后一次施藥后3、5、7天采集芹菜，考察成熟芹菜產(chǎn)品農(nóng)藥累積情況。

（4）在采收期，以樂果最高登記劑量（低濃度）施藥1次，施藥后2 h、1天、3天、5天、7天、10天、14天、17天、21天分別采集芹菜樣品，考察樂果和氧樂果的代謝情況。

（5）對照區(qū)：另設對照區(qū)30 m2(3 m×10 m)，不施藥，采集對照樣品。

（6）樣品采集。每次取樣量2 kg。抽取的樣品在8 h內(nèi)冷藏運回實驗室，分別用組織搗碎機粉碎混勻，四分法縮分成500 g，作為待測樣品，于-18℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 樣品分析

（1）提取。稱取待測樣品10.00 g，置于50 mL離心管中。加入20.0 mL乙腈，勻漿2 min。加入QuEChERS凈化包，劇烈振蕩2 min，10000 r/min離心5 min，取上清液過0.22 μm濾膜，濾液待測。

（2）上機。色譜條件：Acquity UPLC HSS T3柱(100mm×2.1mm，1.8 μm)，柱溫25℃，進樣量5 μL，流速0.45 mL/min，流動相A為水、B為甲醇。梯度洗脫條件：0～0.25 min，90%～5%A；0.25～5.00 min，5%～90%A。質(zhì)譜條件：電噴霧離子源正離子模式(ESI+)，離子源溫度500℃，毛細管電壓1.0 kV，霧化氣流量900 L/h，錐孔反吹氣流量50 L/h，掃描方式為多反應監(jiān)測(MRM)模式。

2 結果與分析

2.1 樂果和氧樂果在芹菜上的降解動態(tài)分析

芹菜中樂果的消解動態(tài)試驗，施藥劑量為最高登記劑量（低濃度）600 g a.i/hm2，分別在施藥后2 h、1天、3天、5天、7天、10天、14天、21天取樣。根據(jù)消解數(shù)據(jù)進行擬合（圖1），符合一級動力學方程，C=1.1682e-0.274t，相關系數(shù)r為0.99，半衰期為2.5天。3天后樂果濃度降解到0.5 mg/kg以下，低于樂果在芹菜上的允許最大殘留限量值。

圖1 樂果在芹菜中的降解曲線

氧樂果的降解動態(tài)方程為C=0.1049e-0.132t，相關系數(shù)r為0.96，半衰期為5.25天。21天后氧樂果濃度降解到0.02 mg/kg以下，低于氧樂果在芹菜上的允許最大殘留限量值。

圖2 氧樂果在芹菜中的降解曲線

2.2 生長中期施藥后芹菜中樂果與氧樂果的最終殘留分析

生長中期即在芹菜定植到采收時的中間點，時間在移栽定植后40天施藥。施藥濃度分別為低濃度600 g a.i/hm2和高濃度900 g a.i/hm2。由表1可見，成熟芹菜產(chǎn)品中，樂果和氧樂果殘留量均低于最大殘留限量MRL值。

表1 生長中期施藥后芹菜中樂果與氧樂果的最終殘留

2.3 采收期施藥后芹菜中樂果與氧樂果的最終殘留分析

在采收期分別設置2種施藥濃度低濃度600ga.i/hm2和高濃度900 g a.i/hm2。每種施藥濃度分別施藥2次和3次，每次施藥間隔期為7天。在末次施藥結束后3、5、7天分別進行采樣，檢測成熟芹菜產(chǎn)品中樂果和氧樂果的最終殘留量。

由表2可以看出，施藥2次，噴施2種濃度樂果的殘留量在7天時均低于芹菜上的允許最大殘留限量值0.5 mg/kg，但氧樂果的濃度7天時仍高于芹菜上的允許最大殘留限量值0.02 mg/kg。

由表3可以看出，施藥3次，噴施低濃度樂果的殘留量在7天時低于芹菜上的允許最大殘留限量值0.5 mg/kg，噴施高濃度樂果的殘留量超過芹菜上的允許最大殘留限量值0.5 mg/kg。氧樂果的濃度在7天時均高于芹菜上的允許最大殘留限量值0.02 mg/kg。

3 結論

露地試驗芹菜中樂果的動態(tài)降解相關系數(shù)r為0.99，氧樂果的動態(tài)降解相關系數(shù)r為0.96，均屬高度相關水平，環(huán)境條件對試驗的影響總體可控。

在芹菜生長中期按最高登記劑量和最高登記劑量的1.5倍噴施樂果1次，采樣間隔45天，不會造成成熟芹菜產(chǎn)品中樂果和氧樂果殘留量超標，芹菜產(chǎn)品食用安全。

在芹菜采收期按最高登記劑量噴施1次，施藥安全間隔期達到21天以上，可以保證芹菜中樂果和氧樂果殘留量低于芹菜上允許的最大殘留限量值。

在芹菜采收期多次噴施樂果，會造成芹菜中氧樂果殘留量超標。樂果在芹菜采收期使用存在較大的質(zhì)量安全風險。

4 討論

樂果在芹菜中的半衰期為2.5天，這比盧平等[21]研究報道的3.5天和5.4天略低。出現(xiàn)這種差別可能與試驗的地理位置、氣候條件和試驗時間天氣因素有關。

樂果的高毒代謝產(chǎn)物氧樂果屬于果蔬上禁止使用農(nóng)藥。樂果的安全風險應該進行重新評價。

樂果在芹菜采收期使用存在較大的質(zhì)量安全風險，建議加強監(jiān)管，嚴格控制樂果在蔬菜上的使用，以其他高效低毒低殘留農(nóng)藥替代樂果的使用。

簡秋[22]、王麗梅[23]、周艷琳[24]針對露地和溫室蔬菜中農(nóng)藥殘留進行了研究，發(fā)現(xiàn)溫室中蔬菜最終農(nóng)藥殘留高于露地蔬菜。范素芳[25]在不同生長季節(jié)對農(nóng)藥殘留規(guī)律進行了研究，發(fā)現(xiàn)環(huán)境因子對農(nóng)藥殘留的影響較大。下一步將繼續(xù)對溫室芹菜和露地芹菜進行對比研究。

本試驗雖以芹菜為研究對象，但其中的試驗設計可以為其他高風險農(nóng)藥殘留的作物關鍵控制點研究提供借鑒。

表2 施藥2次芹菜中樂果與氧樂果的最終殘留

表3 施藥3次芹菜中樂果與氧樂果的最終殘留

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