鐘啟龍 傅國(guó)武 梁小明

[摘要]目的 分析EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的相關(guān)性，探討其對(duì)疾病臨床診療和預(yù)后判斷的參考價(jià)值。方法 選取我院2015年4月～2017年2月收治的35例EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌患者和同期于我院接受體檢的40名健康體檢者作為研究對(duì)象，分別作為觀察組和對(duì)照組，抽取兩組受檢者的空腹靜脈血，對(duì)于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平進(jìn)行檢測(cè)，比較兩組患者檢測(cè)結(jié)果上的差異，觀察治療前后的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平檢測(cè)結(jié)果的變化。結(jié)果 觀察組患者的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后觀察組患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展，會(huì)引起患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的變化。通過(guò)對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的檢測(cè)，能夠在一定程度上反映出患者的病情和治療恢復(fù)情況，對(duì)疾病臨床診療和預(yù)后判斷有著重要的參考價(jià)值。

[關(guān)鍵詞]EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌；調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；相關(guān)性

[中圖分類號(hào)] R739.63 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）4（b）-0078-03

Correlation analysis of nasopharyngeal carcinoma in Epstein-Barr virus positivity and regulatory T cells

ZHONG Qi-long FU Guo-wu LIANG Xiao-ming

Department of Otolaryngology，People′s Hospital of Maoming City，Guangdong Province，Maoming 525000，China

[Abstract]Objective To analyze the correlation between nasopharyngeal carcinoma in Epstein-Barr（EB） virus positivity and regulatory T cells and to explore its reference value for the clinical diagnosis and prognosis of the disease.Methods 35 patients with EB virus positivity of nasopharyngeal carcinoma admitted in our hospital from April 2015 to February 2017 and 40 healthy participants during the same period undergoing physical examinations in our hospital were selected as research objects.They were divided into observation group and control group respectively.Fasting venous blood was collected from the two groups to detect the level of regulatory T cells.The difference between the detection results of nasopharyngeal carcinoma patients with EB virus positivity and healthy participants was compared，and the change of regulatory T cell levels before and after treatment were observed.Results The levels of CD4+CD25+Foxp3+Treg and CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+ T of regulatory T cells in the observation group were significantly higher than those in the control group with significant differences between the two groups（P<0.05）.After treatment，the levels of CD4+CD25+Foxp3+Treg and CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+ of regulatory T cells in the observation group were lower than that in the before treatment，with statistical differences （P<0.05）.Conclusion The occurrence and development of nasopharyngeal carcinoma in EB virus positivity may cause the change of regulatory T cell levels in patients.By detecting the level of regulatory T cells，it to a certain extent can reflect the patient′s condition and the recovery after treatment，which has an important reference value for the clinical diagnosis and prognosis of the disease.

[Key words]Nasopharyngeal carcinoma in epstein-barr virus positivity；Regulatory T cells；Correlation

鼻咽癌是一種高發(fā)的惡性腫瘤疾病，其病因復(fù)雜，以EB病毒感染較為常見(jiàn)[1]。EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌的發(fā)生，主要是由于EB病毒感染B細(xì)胞所致，進(jìn)而引起細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的過(guò)度免疫[2]。早期癥狀不明顯，尤其是鼻部癥狀少，往往僅表現(xiàn)為后吸性涕中帶血，或反復(fù)一側(cè)耳閉塞感，或頸上部無(wú)痛性淋巴結(jié)腫大，但是難以進(jìn)行病情判斷，容易受到忽視[3]。隨著病情的進(jìn)展，EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌的危害程度明顯提升，患者的視力、顱神經(jīng)功能均會(huì)受到影響，還會(huì)侵犯骨、肺、肝等組織器官，危及患者的生命健康[4]。EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌的發(fā)生與進(jìn)展，往往會(huì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的改變，可將其作為疾病臨床診斷和預(yù)后判斷的參考依據(jù)[5]。本研究選取我院收治的EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌患者作為研究對(duì)象，分析該疾病與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1 一般資料

本組研究對(duì)象為我院2015年4月～2017年2月收治的35例EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌患者，將其作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)EB病毒血清學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢查以及組織病理學(xué)予以確診，符合鼻咽癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；排除標(biāo)準(zhǔn)：其他鼻咽部疾病以及存在精神障礙患者。選取同期于我院接受體檢的40名健康體檢者作為對(duì)照組。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，參與研究者簽署知情同意書。觀察組男22例，女13例；年齡22～69歲，平均（44.2±4.8）歲。對(duì)照組男24例，女16例；年齡25～72歲，平均（45.3±4.6）歲。兩組受檢者的一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

清晨抽取兩組受檢者的空腹靜脈血2 ml，經(jīng)EDTA-Na2抗凝處理后，用Navios 6 COLORS流式細(xì)胞儀（貝克曼庫(kù)爾特商貿(mào)有限公司）和配套的試劑盒，對(duì)CD4+CD25+Foxp3+Treg進(jìn)行測(cè)定。該過(guò)程中，在1 ml紅細(xì)胞裂解液中加入抗凝血100 μl，均勻混合后，需要能進(jìn)行孵育（室溫）、洗滌（PBS）。然后將其與FITC-CD4、APC-CD25混合，在室溫、避光條件下發(fā)生反應(yīng)。使用流式細(xì)胞儀測(cè)定管、氬離子激光器等設(shè)備，并對(duì)相關(guān)參數(shù)進(jìn)行校正和調(diào)節(jié)，收集1×105個(gè)細(xì)胞，并結(jié)合CD4+CD25+、CD4Foxp3+以及CD4+T細(xì)胞中CD4+CD25+Foxp3+所占比例等數(shù)據(jù)，進(jìn)而分析調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的改變。EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌患者經(jīng)確診后，主要實(shí)施放射治療，并輔以化療。治療后，再次抽取其空腹靜脈血進(jìn)行監(jiān)測(cè)，觀察治療前后的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的變化。

1.3觀察指標(biāo)

觀察兩組患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的檢測(cè)結(jié)果，對(duì)比其CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T的大小。同時(shí)觀察觀察組治療前后外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平變化。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

以SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理和分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的比較

觀察組患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

表1 兩組患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的比較（x±s）

2.2 患者治療前后調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的比較

治療后，EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

表2 患者治療前后調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的比較（x±s）

3討論

鼻咽癌的發(fā)病率為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首，尤其居住在我國(guó)嶺南地區(qū)的黃種人群中，起病變位于鼻咽后頂部和側(cè)壁，與遺傳因素和環(huán)境因素存在密切的聯(lián)系，而EB病毒感染對(duì)該病的影響更為突出、顯著[6]。經(jīng)免疫學(xué)和生物學(xué)研究[7]顯示，EB病毒在鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌是一種常見(jiàn)的疾病類型。EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌早期無(wú)明顯癥狀，或表現(xiàn)為后吸性涕中帶血，或反復(fù)一側(cè)耳閉塞感，或頸上部無(wú)痛性淋巴結(jié)腫大，往往不受重視，并會(huì)產(chǎn)生誤判，未能及時(shí)實(shí)施治療[8]。隨著病情的進(jìn)展，病變直接侵及破裂孔及其周圍骨質(zhì)向顱內(nèi)侵犯，引起相關(guān)神經(jīng)的損害及顱腦等癥狀，同時(shí)還會(huì)侵犯其他組織器官，癌細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散，增加疾病風(fēng)險(xiǎn)程度和治療難度[9]。根據(jù)EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌的發(fā)生，對(duì)于患者機(jī)體免疫功能造成了一定的破壞，相關(guān)的免疫功能指標(biāo)會(huì)出現(xiàn)異常變化，尤其是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，從中反映出患者的病情，能夠?yàn)榧膊〉脑缙谠\斷提供參考[10]?；颊呓?jīng)放療、化療等治療后，患者的病情得到有效控制，機(jī)體免疫功能得以恢復(fù)，CD4+CD25+、CD4Foxp3+等調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平也會(huì)相應(yīng)的發(fā)生變化，出現(xiàn)異常表達(dá)的情況[11-12]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組患者的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后觀察組患者的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Foxp3+Treg水平和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T水平均低于治療前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后，其調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平得以降低，逐漸恢復(fù)為正常的表達(dá)，對(duì)腫瘤有免疫抑制作用，能反映出患者的病得到好轉(zhuǎn)。EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平存在相關(guān)性，其對(duì)疾病的臨床治療提供了新的思路[13-14]。除了傳統(tǒng)的放療、化療、手術(shù)外，免疫療法成為了新的治療選擇。采取生物細(xì)胞治療方法，用以糾正機(jī)體內(nèi)環(huán)境失衡，而提高免疫功能，加強(qiáng)對(duì)腫瘤的有效抑制，防止其進(jìn)一步轉(zhuǎn)移與擴(kuò)散[15]。

綜上所述，EB病毒感染陽(yáng)性鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平改變存在相關(guān)性，影響著患者的機(jī)體免疫功能。在臨床疾病的診斷中，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平的變化，能夠真實(shí)、準(zhǔn)確的反映出患者的病情。在患者的治療恢復(fù)期間，同樣可以參考調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平進(jìn)行判斷。由于本組研究樣本較少，其研究結(jié)論不能完全保障其準(zhǔn)確性，仍需要深入進(jìn)行探索和研究。

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（收稿日期：2018-01-02 本文編輯：崔建中）