馬秋瓊 周麗 嚴(yán)芝光 張麗娟

【摘要】目的調(diào)查防城港市邊境地區(qū)兒童地中海貧血發(fā)生率、基因類型及分布特征。方法搜集防城港市邊境地區(qū)0～6歲兒童997例外周血進行血常規(guī)分析，血常規(guī)篩查陽性標(biāo)本再進行地貧基因檢測。結(jié)果血常規(guī)篩查陽性標(biāo)本369例，地貧基因檢出α地貧136例，β地貧39例，α復(fù)合β地貧11例。該地區(qū)兒童地貧基因攜帶率為18.66%，其中α地貧14.74%[（136+11）/997]（含α復(fù)合β），β地貧5.02%[（39+11）/997]（含α復(fù)合β）。該研究檢出6種α地貧等位基因SEA/、α3.7/、α4.2/、ααWS/、ααQS/、和ααCS/，其中以SEA/最為常見，構(gòu)成比為51.95%（80/154）；檢出8種β地貧突變類型CD4142（CTTT）、28（A>G）、CD17（A>T）、IVSⅡ654（C>T）、IVSⅠ1（G>T）、CD7172（+A）、CD26（GAG>AAG）、CAP+4043（AACC），最常見的為CD4142（CTTT），構(gòu)成比為46.94%（23/49）。結(jié)論防城港市邊境地區(qū)0～6歲兒童地中海貧血發(fā)生率較高，查明其基因類型及分布特征，為地貧防控工作提供了資料。

【關(guān)鍵詞】防城港市；邊境地區(qū)；兒童；地中海貧血；基因檢測

中圖分類號：R556 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2018.02.007

Analysis of gene types of thalassemia in children in Fangchenggang border area

MA Qiuqiong，ZHOU Li，YAN Zhiguang，ZHANG Lijuan

（The First Peoples Hospital of Fangchenggang，F(xiàn)angchenggang 538021，China）

【Abstract】ObjectiveTo investigate the incidence，genotypes and distribution characteristics of thalassemia in children in Fangchenggang border area.MethodsA total of 997 children aged 0～6 years old from Fangchenggang border area were collected for blood routine analysis， and then blood routine screening for positive specimens and thalassemia gene detection were performed. Results369 positive specimens were screened out by blood routine test，and 136 cases were diagnosed as αthalassemia，39 cases as βthalassemia and 11 cases as αthalassemia combined with βthalassemia by thalassemia gene detection.The gene carrying rate of children with thalassemia in this area was 18.66%.Among them，that of αthalassemia was 14.74%（included αthalassemia combined with βthalassemia） and that of βthalassemia was 5.02% （included αthalassemia combined with βthalassemia）.Six kinds of αthalassemia alleles（SEA/，α3.7/，α4.2/，ααWS/，ααQS/ and ααCS/） were detected，of which SEA/was the most common，with a composition ratio of 51.95%（80/154）.Eight βthalassemia mutation types including CD4142（CTTT），28（A>G），CD17（A>T），IVSⅡ654（C>T），IVSⅠ1（G>T），CD7172（+A），CD26（GAG>AAG） and CAP+4043（AACC） were detected，of which CD4142（CTTT） was the most common，with a composition ratio of 46.94%（23/49）.ConclusionThe incidence of thalassemia in children aged 0～6 years old in Fangchenggang city is high.And to find out genotypes and distribution characteristics can provide data for the prevention and control of thalassemia.

【Key words】Fangchenggang；border area；children；thalassemia；gene detection

地中海貧血（地貧）是廣西最常見的遺傳性血液疾病，主要表現(xiàn)為慢性溶血性貧血，重型患者胎死宮內(nèi)或出生后依賴輸血生存并絕大部分在幼年期夭折[1]。廣西是全國地貧高發(fā)地區(qū)，α地貧人群基因攜帶率為17.41%，β地貧人群基因攜帶率為6.37%[2]。地貧基因攜帶者一般無明顯癥狀，但夫妻雙方為同類型地貧基因攜帶者，下一代將有25%的概率成為重型地貧患者。重型地貧會給社會和家庭帶來沉重的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)和精神負(fù)擔(dān)。不同的國家或地區(qū)，不同的民族其基因的攜帶率和基因型不同，研究地中海貧血遺傳病基因的攜帶率和基因種類，是地中海貧血防治決策的基礎(chǔ)。防城港市邊境地區(qū)有5個鄉(xiāng)鎮(zhèn)與越南接壤，是多民族聚居的地區(qū)，主要有漢、壯、瑤、京、苗等民族，一直以來又有與越南人通婚的習(xí)慣。推測該地區(qū)的地貧攜帶率和基因型不同于廣西的壯族和漢族，故進行本次研究。

1資料與方法1.1研究對象搜集2016年5月～2017年10月防城港市邊境地區(qū)的997例0～6歲兒童血樣為研究樣本。

1.2方法

1.2.1試劑與儀器血細(xì)胞分析采用法國ABX公司120DF 型血球分析儀及配套試劑； α和β地貧基因診斷試劑為深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供，基因擴增儀為廣州達(dá)安DA7600 型分析儀。

1.2.2檢驗方法及標(biāo)準(zhǔn)采集研究對象靜脈血2 ml，EDTAK2抗凝，用全自動血細(xì)胞分析儀進行血細(xì)胞分析；以平均紅細(xì)胞體積MCV<82 fl和（或）平均血紅蛋白含量MCH<27 pg為地貧血常規(guī)篩查陽性指標(biāo)[3]。陽性標(biāo)本進行地貧基因檢測6種α和17種β珠蛋白基因突變。

1.2.3地貧基因檢測方法（1）α地貧基因診斷采用gapPCR/PCRRDB法：檢測東南亞缺失型（SEA），37KB缺失型（α3.7），4.2KB 缺失型（α4.2）；Westmead 點突變（αWS）、CS點突變（αCS），QS點突變（αQS）。（2） β地貧基因診斷采用PCR結(jié)合反向點雜交（RDB）技術(shù)：檢測中國人群8個常見突變位點（CD4142>CTTT、IVS2654C>T、CD17A>T、28A>G、CD26G>A、CD7172+A、CD43G>T、29A>G，以及9個位點突變：CCD1415+G、CD27/28+C、32C>A、30T>C、IVS11G>T、IVS15G>C、CD31C、CAP+4043AACC 和CAP+1A>C起始密碼子ATG>AGG）。

1.2.4統(tǒng)計學(xué)方法根據(jù)基因型結(jié)果采用Excel 2010對數(shù)據(jù)進行錄入、整理；采用SPSS 17.0 軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。

2結(jié)果在997例0～6歲兒童血樣中，通過血常規(guī)篩查陽性的有369例，地貧初篩陽性率為37.0%。369例血樣再經(jīng)地貧基因診斷為地貧基因攜帶者的有186例，其中α地貧136例，β地貧39例，α復(fù)合β地貧11例（見表1）。該地區(qū)兒童地貧基因攜帶率為18.66%，其中α地貧14.74%（含α復(fù)合β），β地貧5.02%（含α復(fù)合β）。本研究檢出6種α地貧等位基因SEA/、α3.7/、α4.2/、ααWS/、ααQS/和ααCS/，以SEA/最為常見，構(gòu)成比為51.95%（見表2）。檢出8種β地貧突變類型CD4142（CTTT）、28（A>G）、CD17（A>T）、IVSⅡ654（C>T）、IVSⅠ1（G>T）、CD7172（+A）、CD26（GAG>AAG）、CAP+4043（AACC），最常見的為CD4142（CTTT），構(gòu)成比為4694%（見表3）。

997例樣本中，通過血常規(guī)篩查陽性的有369例，地貧初篩陽性率為37.0%，進一步經(jīng)地貧基因診斷為地貧基因攜帶者的有186例，基因診斷率為50.4%（186/369），還有49.6%樣本血常規(guī)篩查陽性但地貧基因檢測陰性。有報道顯示，90%以上6歲以下貧血兒為缺鐵性貧血（IDA），尤其6 個月至2 歲的嬰幼兒更為多見。IDA 是臨床常見的一種貧血類型，是由于體內(nèi)鐵缺乏導(dǎo)致血紅蛋白合成減少所致，與喂養(yǎng)不當(dāng)、偏食、慢性腹瀉等有關(guān)，臨床上表現(xiàn)為小細(xì)胞低色素性貧血，以血清鐵蛋白減少為特征，鐵劑治療有效[7]。由于缺乏鐵蛋白等相關(guān)檢查數(shù)據(jù)，這49.6%提示小細(xì)胞卻不是地貧的兒童中具體有多少例是缺鐵性貧血引起的還有待于進一步調(diào)查研究。

本次研究提示防城港市邊境地區(qū)0～6歲兒童地中海貧血發(fā)生率較高，各級醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)該針對可能人群建議其進行相關(guān)篩查，自開放二胎政策后，尤其是育齡人群更應(yīng)當(dāng)重視遺傳咨詢和基因診斷，對于孕婦必要時抽取羊水進行產(chǎn)前診斷，預(yù)防患有地中海貧血，尤其是重型患兒出生，以達(dá)到遏制地中海貧血流行、減輕患病家庭經(jīng)濟負(fù)擔(dān)的目的。

參考文獻(xiàn)[1]謝丹尼，李衛(wèi).地中海貧血產(chǎn)前基因診斷現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢[J].中國計劃生育學(xué)雜志，2004，12（8）：506.

[2]熊符，孫曼那，婁季武，等.廣西壯族自治區(qū)人群血紅蛋白病的分子流行病學(xué)調(diào)查[C].//第八次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會議（中華醫(yī)學(xué)會2009年醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)年會）論文集，2009：6465.

[3]徐湘民.地中海貧血預(yù)防控制操作指南[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2011：3738.

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[6]涂志華，黃慈丹，溫英梅，等.?？诘貐^(qū)人群地中海貧血基因型分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志 2013，21（10）：2829.

[7]馬芬，李長春，周文君.530例貧血兒童的血常規(guī)檢測分析[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（11）：14691470.

（收稿日期：2018-01-13修回日期：2018-04-10）

（編輯：梁明佩）