鄧城旗，楊靜，房曉燕，郝濟(jì)偉，張慶紅，孟令超，唐家廣，李萌萌

隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，越來越多的嬰幼兒接受手術(shù)麻醉。目前研究顯示，全身麻醉藥物對(duì)生后發(fā)育期大腦可產(chǎn)生短暫或長(zhǎng)期的影響[1-3]。2016年底，美國(guó)食品與藥品管理局(FDA)發(fā)布警示：3歲以下兒童或妊娠后3個(gè)月的孕婦在手術(shù)或操作過程中反復(fù)或長(zhǎng)期使用全身麻醉和鎮(zhèn)靜藥物可能會(huì)影響兒童的大腦發(fā)育[4]。對(duì)于那些需要多次手術(shù)麻醉的嬰幼兒，調(diào)整手術(shù)間隔時(shí)間能否減弱或消除多次麻醉對(duì)認(rèn)知功能造成的影響目前尚不明確。本課題組既往研究發(fā)現(xiàn)，多次異氟烷處理對(duì)發(fā)育期大鼠隨后的認(rèn)知功能存在一定影響，延長(zhǎng)間隔時(shí)間可緩解短期的認(rèn)知損害[5-6]。本研究進(jìn)一步觀察了生后多次異氟烷處理對(duì)發(fā)育期大鼠成年后空間認(rèn)知功能的影響，探索能否通過改變手術(shù)治療的間隔時(shí)間保護(hù)成年后的認(rèn)知功能，以期為臨床制定合理的診療方案提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 生后7d的SD大鼠48只，購(gòu)自北京協(xié)和醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，合格證編號(hào)：11401300014294。采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為Naive組、G6h組、G2h-1d和G2h-3d組，每組12只，雌雄比為5:7。實(shí)驗(yàn)前測(cè)量幼鼠體重，然后置于透明有機(jī)玻璃麻醉誘導(dǎo)盒中，Naive組幼鼠自由呼吸空氣6h；G6h組幼鼠采用異氟烷處理6h；G2h-1d組幼鼠采用異氟烷處理，每次2h，每次間隔1d，共處理3次；G2h-3d組幼鼠采用異氟烷處理，每次2h，每次間隔3d，共處理3次。

本實(shí)驗(yàn)方案通過本院動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，動(dòng)物處置過程中所有操作均符合動(dòng)物倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 異氟烷處理[5]應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉機(jī)(美國(guó)MATRX公司)，以3%異氟烷(山東魯南貝特，生產(chǎn)批號(hào)64140302)誘導(dǎo)，1.5%異氟烷與30%氧氣混合吸入維持麻醉。監(jiān)測(cè)幼鼠呼吸頻率，每15min夾尾確認(rèn)其存活，采用ALC-HTP動(dòng)物恒溫系統(tǒng)(上海奧爾科特)維持幼鼠體溫在36.5±0.5℃，開啟CO2吸附器吸收廢氣。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法 于大鼠生后7、21、98d測(cè)量體重，觀察其發(fā)育情況。麻醉后每組取1只幼鼠采集心臟血進(jìn)行血?dú)夥治觯蝗缓箫曫B(yǎng)至成年。在91、98、119d分別進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、八臂迷宮及Morris水迷宮行為學(xué)測(cè)試。應(yīng)用EthoVision XT軟件跟蹤軌跡系統(tǒng)(荷蘭Noldus公司)記錄大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)。

1.3.1 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)[7]將大鼠放置于場(chǎng)地中央，實(shí)時(shí)攝像記錄其5min的行為，應(yīng)用EthoVision XT軟件分析中央?yún)^(qū)域(半徑≤5cm)耗時(shí)、周邊區(qū)域(半徑＞5cm)耗時(shí)、角落區(qū)域耗時(shí)、穿梭中央?yún)^(qū)域次數(shù)、速度及總路程，以評(píng)價(jià)大鼠的探索、焦慮及自主行為等。

1.3.2 八臂迷宮測(cè)試[5,8]用于評(píng)估大鼠的空間記憶能力。采用成年大鼠迷宮(長(zhǎng)425mm，寬145mm，高225mm)進(jìn)行測(cè)試，分為以下3步。①適應(yīng)階段：大鼠放入迷宮中央平臺(tái)適應(yīng)2min后，依次打開八臂閥門，讓其自由攝食；②訓(xùn)練階段：隨機(jī)選取四臂的前、中、后放置巧克力，待大鼠吃完或10min后將其取出，乙醇去除異味，每日1次，連續(xù)5d；③測(cè)試階段：選定訓(xùn)練時(shí)的四臂末端放入巧克力，以大鼠吃完或耗時(shí)10min作為測(cè)試結(jié)束，每日2次，間隔1h以上，連續(xù)5d，共10次。記錄大鼠在迷宮中表現(xiàn)，包括錯(cuò)誤次數(shù)[指大鼠進(jìn)入不曾放過食粒的臂，也稱參考記憶錯(cuò)誤(reference memory error，RME)，反映動(dòng)物的長(zhǎng)期記憶]、重復(fù)錯(cuò)誤次數(shù)[指在同一次測(cè)試中大鼠再次進(jìn)入已經(jīng)吃過食粒的臂，也稱工作記憶錯(cuò)誤(working memory error，WME)，反映動(dòng)物的臨時(shí)記憶]、入臂總次數(shù)(指動(dòng)物吃完所有食物進(jìn)入臂的總次數(shù))和入臂總耗時(shí)(指動(dòng)物吃完所有食粒所用時(shí)間或10min測(cè)試結(jié)束)。

1.3.3 Morris水迷宮測(cè)試[5,9]用于評(píng)價(jià)大鼠與空間學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的腦區(qū)功能，測(cè)試分為以下3步。①環(huán)境適應(yīng)：大鼠在水迷宮實(shí)驗(yàn)室自由攝食飲水，每日2h；②定位航行訓(xùn)練：水溫維持在26±1℃，將大鼠頭朝池壁放入水中，隨機(jī)取東、西、南、北4個(gè)方向之一，每日4次，間隔15～20min；③空間探索測(cè)試：大鼠由原平臺(tái)對(duì)側(cè)象限放入池中1min，記錄大鼠進(jìn)入各象限耗時(shí)、平臺(tái)潛伏期、穿梭平臺(tái)次數(shù)、平臺(tái)耗時(shí)和速度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以±s表示，多組間比較采用完全隨機(jī)方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)和Dunnett t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以大于或小于中位數(shù)的率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠一般情況 隨日齡增長(zhǎng)，各組大鼠體重增加，組間及組內(nèi)雌/雄成鼠體重比較均無(wú)明顯差異(P＞0.05)，而98d時(shí)雄鼠體重明顯高于雌鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)，提示生后發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)明顯影響，成年后雄鼠體重高于雌鼠，符合正常生理狀況[10]。發(fā)育期異氟烷處理后，各組間雌/雄幼鼠血?dú)夥治鲋笜?biāo)比較均無(wú)明顯差異(P＞0.05)，提示異氟烷處理未導(dǎo)致幼鼠出現(xiàn)低氧血癥、高二氧化碳血癥等，排除其可能的影響。

2.2 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 與Naive組相比，各處理組大鼠在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)均無(wú)明顯差異，不同性別大鼠的曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)表現(xiàn)中的比較亦無(wú)明顯差異(P＞0.05，表1)，提示發(fā)育期異氟烷處理對(duì)大鼠成年后焦慮、探索等自主行為無(wú)明顯影響。

表1 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 (±s)Tab. 1 Effects of neonatal isoflurane exposures in different ways on the results of open field tests in adult rats (±s)

表1 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 (±s)Tab. 1 Effects of neonatal isoflurane exposures in different ways on the results of open field tests in adult rats (±s)

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2.3 八臂迷宮測(cè)試結(jié)果

2.3.1 對(duì)成年雄鼠的影響 成年雄鼠錯(cuò)誤次數(shù)＞3的百分比由低到高依次為G2h-3d組、Naive組、G6h組、G2h-1d組，分別為21.4%、34.3%、50.0%、50.0%。與Naive組比較，G6h組和G2h-1d組錯(cuò)誤次數(shù)＞3的百分比明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.043、P=0.043)，而Naive組與G2h-3d組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.090)。各處理組間比較，G6h組、G2h-1d組錯(cuò)誤次數(shù)＞3的百分比明顯高于G2h-3d組(P＜0.001，圖1A)。成年雄鼠重復(fù)錯(cuò)誤次數(shù)各組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，圖1B)。各組成年雄鼠入臂總次數(shù)(以＞7的百分比表示)比較，G6h組明顯高于Naive組(P=0.042)，而G6h組和G2h-1d組明顯高于G2h-3d組(P=0.003、P=0.008，圖1C)。與其余3組比較，G2h-3d組入臂總耗時(shí)明顯縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001、P＜0.001、P=0.030，圖1D)。提示發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年后雄鼠的空間認(rèn)知能力有一定影響，單次長(zhǎng)時(shí)間和間隔較短的異氟烷多次處理，對(duì)成年后雄鼠的長(zhǎng)期記憶均有損害，而延長(zhǎng)處理間隔時(shí)間可明顯減輕雄鼠空間認(rèn)知能力的損害。

2.3.2 對(duì)成年雌鼠的影響 與Naive、G2h-1d和G2h-3d組比較，G6h組成年雌鼠錯(cuò)誤次數(shù)＞3的百分比明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.008、0.024、0.008，圖2A)。G6h組成年雌鼠重復(fù)錯(cuò)誤次數(shù)明顯低于Naive、G2h-1d和G2h-3d組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.005、0.000、0.046)，且G2h-3d組明顯低于G2h-1d組(P=0.024，圖2B)。G6h組入臂總次數(shù)(以＞8的百分比表示)為6%，明顯低于Naive、G2h-1d和G2h-3d組(分別為32%、30%和26%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001、0.002、0.006，圖2C)。G6h組入臂總耗時(shí)也明顯低于Naive、G2h-1d和G2h-3d組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000、0.006、0.039，圖2D)。提示發(fā)育期單次異氟烷處理6h對(duì)雌鼠成年后的空間認(rèn)知能力可能具有促進(jìn)作用，但多次異氟烷處理對(duì)雌鼠成年后的臨時(shí)記憶有一定損害，延長(zhǎng)處理間隔時(shí)間可減弱對(duì)成年后臨時(shí)記憶的影響。

2.3.3 不同性別成年大鼠八臂迷宮測(cè)試結(jié)果比較

Naive組中雌鼠錯(cuò)誤次數(shù)＞3的百分比和入臂總次數(shù)＞7的百分比均明顯高于雄鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.031、0.000)，而G6h組中雌鼠則明顯低于雄鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.016、0.041，圖3A、C)。G2h-1d組雌鼠重復(fù)錯(cuò)誤次數(shù)明顯高于雄鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.010，圖3B)。G2h-3d組雌鼠在錯(cuò)誤次數(shù)＞3的百分比和入臂總次數(shù)(以＞7的百分比表示)均明顯高于雄鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000、0.000，圖3A、C)。Naive和G6h組雌鼠入臂總耗時(shí)明顯低于雄鼠(P=0.023、0.000，圖3D)。提示大鼠成年后，雄鼠的空間認(rèn)知功能明顯優(yōu)于雌鼠；發(fā)育期單次異氟烷處理6h對(duì)雄鼠成年后的空間認(rèn)知功能有一定損害，而多次異氟烷處理對(duì)雌鼠成年后的空間記憶損害作用更為明顯。

圖1 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年雄鼠八臂迷宮測(cè)試結(jié)果的影響Fig.1 Effects of neonatal isoflurane exposures in different ways on the results of radial arm maze test in adult male rats(1)P＜0.05, (2)P＜0.01 compared with Naive group; (3)P＜0.05, (4)P＜0.01 compared with G2h-3d group

圖2 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年雌鼠八臂迷宮測(cè)試結(jié)果的影響Fig. 2 Effects of neonatal isoflurane exposures in different ways on the results of radial arm maze test in adult female rats(1)P＜0.05, (2)P＜0.01 compared with Naive group; (3)P＜0.05, (4)P＜0.01 compared with G6h group; (5)P＜0.05 compared with G2h-1d group

圖3 發(fā)育期不同方式異氟烷麻醉對(duì)大鼠八臂迷宮影響的性別差異Fig. 3 Gender differences on the effects of neonatal isoflurane exposures in different ways on the results of radial arm maze test in adult rats

2.4 Morris水迷宮測(cè)試結(jié)果 各組雄鼠在目標(biāo)象限、相反象限耗時(shí)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.756、0.674)，潛伏期、穿梭平臺(tái)次數(shù)、平臺(tái)耗時(shí)和速度比較差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.687、0.945、0.814、0.980)，其中G2h-1d組與其他3組相比在相反象限中耗時(shí)最長(zhǎng)、潛伏期最長(zhǎng)、穿梭平臺(tái)次數(shù)最少、平臺(tái)耗時(shí)最短，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。各組雌鼠在目標(biāo)象限耗時(shí)、潛伏期、平臺(tái)耗時(shí)、速度等指標(biāo)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；G2h-3d組在相反象限耗時(shí)低于G2h-1d組，穿梭平臺(tái)次數(shù)多于G2h-1d組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.033、0.04，表3)。提示發(fā)育期多次異氟烷處理，延長(zhǎng)處理間隔時(shí)間能夠明顯提高成年大鼠在水迷宮測(cè)試中的視覺相關(guān)空間認(rèn)知功能。

3 討 論

近年來，全身麻醉及鎮(zhèn)靜藥物對(duì)于發(fā)育期大腦影響的研究備受關(guān)注，F(xiàn)DA的用藥警示[4]則引起了更為廣泛的擔(dān)憂，尤其是需要經(jīng)歷長(zhǎng)時(shí)間或多次手術(shù)麻醉的嬰幼兒，其大腦發(fā)育及認(rèn)知是否受到影響再次成為研究熱點(diǎn)。但該警示主要基于臨床前研究結(jié)果，針對(duì)人類的回顧性研究目前尚無(wú)明確結(jié)論[1]，基礎(chǔ)研究也因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物種類，麻醉藥物處理時(shí)機(jī)、處理時(shí)間及次數(shù)，神經(jīng)損害的檢測(cè)指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行為學(xué)測(cè)試的方法，以及是否有手術(shù)傷害性刺激等原因，導(dǎo)致結(jié)果存在明顯差異[2]。其中達(dá)成共識(shí)的結(jié)論指出，相比發(fā)育期短時(shí)間麻醉藥物處理，長(zhǎng)時(shí)間或多次處理對(duì)成年后神經(jīng)發(fā)育及認(rèn)知存在一定影響[1]。本研究旨在探討延長(zhǎng)發(fā)育期多次麻醉處理的間隔時(shí)間能否減輕對(duì)成年大鼠認(rèn)知行為的影響，結(jié)果顯示，發(fā)育期多次異氟烷處理對(duì)大鼠成年后焦慮、探索等自主行為沒有明顯影響，但對(duì)空間記憶功能存在一定影響。

表2 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年雄鼠水迷宮測(cè)試結(jié)果的影響(±s，n=7)Tab. 2 Effects of neonatal isoflurane exposures in different ways on the results of Morris water maze test in adult male rats (±s, n=7)

表2 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年雄鼠水迷宮測(cè)試結(jié)果的影響(±s，n=7)Tab. 2 Effects of neonatal isoflurane exposures in different ways on the results of Morris water maze test in adult male rats (±s, n=7)

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表3 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年雌鼠水迷宮測(cè)試結(jié)果的影響(±s，n=5)Tab. 3 Eあects of neonatal iso fl urane exposures in diあerent ways on the results of Morris water maze test in adult female rats (±s, n=5)

表3 發(fā)育期不同方式異氟烷處理對(duì)成年雌鼠水迷宮測(cè)試結(jié)果的影響(±s，n=5)Tab. 3 Eあects of neonatal iso fl urane exposures in diあerent ways on the results of Morris water maze test in adult female rats (±s, n=5)

(1)P＜0.05 compared with G2h-31d group

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本研究在經(jīng)典的測(cè)試大鼠空間記憶行為的八臂迷宮和Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)：間隔時(shí)間較短的多次異氟烷處理組(G2h-1d組)，無(wú)論雌性還是雄性大鼠，其成年后認(rèn)知行為表現(xiàn)均較差，與既往研究一致[11-12]。延長(zhǎng)異氟烷處理間隔時(shí)間后(G2h-3d組)，雄鼠的行為學(xué)表現(xiàn)優(yōu)于單次處理組和對(duì)照組，而單次異氟烷處理6h組的雌鼠成年后也表現(xiàn)出明顯的認(rèn)知行為學(xué)優(yōu)勢(shì)。該結(jié)果提示，發(fā)育期異氟烷處理對(duì)大鼠成年后認(rèn)知行為的影響存在明顯的性別差異，與Shen等[13]的研究結(jié)果一致。

針對(duì)人類的回顧性研究發(fā)現(xiàn)，幼兒發(fā)育期接受多次全身麻醉可明顯增加學(xué)習(xí)障礙及注意缺陷障礙的發(fā)生率[14-16]。最近Hu等[17]對(duì)1057例接受單次或多次全身麻醉的兒童進(jìn)行隊(duì)列研究，再次證實(shí)3歲以內(nèi)幼兒?jiǎn)未温樽斫?jīng)歷與閱讀及語(yǔ)言測(cè)試成績(jī)下降相關(guān)，多次麻醉則影響認(rèn)知能力和學(xué)習(xí)成績(jī)，增加學(xué)習(xí)障礙和注意力缺陷/多動(dòng)癥的風(fēng)險(xiǎn)，但是否完全由麻醉藥物的影響所致尚無(wú)定論。目前通過嚙齒類及非人類靈長(zhǎng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，麻醉藥物導(dǎo)致的神經(jīng)毒性可引起短期或持續(xù)的神經(jīng)認(rèn)知功能損害[2,18]，涉及的吸入麻醉藥包括氟烷、異氟烷和七氟烷，在大腦發(fā)育期可引起神經(jīng)元變性、凋亡，進(jìn)而導(dǎo)致認(rèn)知功能(空間學(xué)習(xí)及記憶)受損[19-20]。單次異氟烷處理發(fā)育期的嚙齒類動(dòng)物后，免疫組化染色可見大腦神經(jīng)元突觸密度及線粒體密度降低、樹突棘減少、神經(jīng)元凋亡增加等神經(jīng)毒性現(xiàn)象[21-22]，但成年后未見明顯認(rèn)知行為異常[22-23]。全麻藥物引起的發(fā)育期神經(jīng)變性凋亡并不一定引起成年后的神經(jīng)認(rèn)知行為異常，考慮與發(fā)育期麻醉暴露時(shí)間、暴露次數(shù)等多種因素有關(guān)[24-25]。而有研究顯示，多次異氟烷處理發(fā)育期嚙齒類動(dòng)物對(duì)其成年后的認(rèn)知功能具有明顯損害[11]；七氟醚處理間隔時(shí)間越短，其引起的成年后認(rèn)知損害越明顯[12]。本研究結(jié)果顯示，發(fā)育期異氟烷多次處理可導(dǎo)致大鼠成年后認(rèn)知功能受損，而延長(zhǎng)處理間隔時(shí)間可明顯減輕成年大鼠的認(rèn)知損害，與既往研究[11-12]一致。該結(jié)果提示，對(duì)于臨床中需要多次手術(shù)麻醉的嬰幼兒，應(yīng)盡可能延長(zhǎng)手術(shù)麻醉的間隔時(shí)間，以減輕或消除成年后可能的認(rèn)知損害，為臨床選擇手術(shù)時(shí)機(jī)提供了基礎(chǔ)研究的證據(jù)。

為避免雌激素的影響，基礎(chǔ)研究中多選用雄性動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。也正因如此，雌性在臨床前研究中常被忽略。但不同性別動(dòng)物的行為、神經(jīng)化學(xué)及神經(jīng)解剖學(xué)上的差異是不容忽視的[26]。發(fā)育期異氟烷多次處理對(duì)成年后大鼠認(rèn)知行為影響的性別差異是本研究的另一重要內(nèi)容，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與雄鼠相比，異氟烷持續(xù)處理6h的雌鼠成年后認(rèn)知功能明顯增強(qiáng)，而間隔時(shí)間較短的多次異氟烷處理可使雌鼠成年后認(rèn)知功能發(fā)生損害。無(wú)論是成年后認(rèn)知功能增強(qiáng)還是受損，發(fā)育期異氟烷處理對(duì)雌鼠成年后認(rèn)知功能的影響較大。該結(jié)果與Boscolo等[27]的報(bào)道一致，他們認(rèn)為發(fā)育期雌鼠更易受到麻醉藥物(咪達(dá)唑侖+笑氣+異氟烷)的影響。目前越來越多的研究顯示，雌鼠的基礎(chǔ)反應(yīng)水平明顯強(qiáng)于雄鼠，但在空間學(xué)習(xí)記憶方面弱于雄鼠[26]，本研究的行為學(xué)測(cè)試也證實(shí)了這一點(diǎn)。不同性別大鼠的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)形成及可塑性、學(xué)習(xí)記憶、處理壓力等能力存在差異[26]；雌鼠對(duì)精神藥物的反應(yīng)更為強(qiáng)烈，而空間記憶能力較差，也更易受損[26]。性別差異及雌激素在認(rèn)知行為中的作用還有待進(jìn)一步深入研究。

麻醉藥物對(duì)神經(jīng)功能的影響除了神經(jīng)毒性外，還有研究證實(shí)具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用，尤其是對(duì)已有的神經(jīng)損害。Weeks等[28]報(bào)道應(yīng)用異氟烷麻醉治療藥物難治性抑郁癥，發(fā)現(xiàn)異氟烷吸入麻醉處理后，患者神經(jīng)認(rèn)知測(cè)試評(píng)分明顯改善，提示異氟烷具有一定的抗抑郁作用。Murphy等[11]的研究也證實(shí)，單次七氟烷處理2h后，雄鼠的空間記憶能力明顯提高。本研究中發(fā)育期單次異氟烷處理6h(G6h組)的雌鼠及異氟烷多次處理(G2h-3d組)的雄鼠，其成年后的認(rèn)知功能明顯增強(qiáng)。De Roo等[29]報(bào)道，在大腦發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期，麻醉藥物能夠促進(jìn)軀體感覺皮層和海馬突觸的發(fā)生，增加樹突棘密度，并促進(jìn)功能性突觸的形成。但上述研究結(jié)果的生理學(xué)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步探索。

綜上所述，本研究結(jié)果表明，生后發(fā)育期不同時(shí)間間隔的異氟烷處理對(duì)大鼠成年后認(rèn)知功能具有一定影響。間隔時(shí)間短的多次處理易造成認(rèn)知損害，延長(zhǎng)處理間隔時(shí)間能有效減輕或消除成年后的認(rèn)知行為異常，且這種作用存在明顯的性別差異。本研究為臨床需要多次手術(shù)麻醉的患兒如何選擇手術(shù)時(shí)機(jī)，以盡可能降低對(duì)其成年后認(rèn)知功能的影響提供了必要的臨床前研究證據(jù)。

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