李瑞，趙鼎，張耀東

(鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、河南省兒童醫(yī)院、鄭州兒童醫(yī)院；河南省兒童遺傳代謝性疾病重點實驗室，鄭州 450018)

染色體病通常伴有發(fā)育畸形和智力低下[1]，是兒科遺傳性疾病的重要組成部分。染色體異常的胎兒大部分在妊娠2個月內(nèi)自然流產(chǎn)，但尚有一部分無致命的染色體異常胎兒能足月娩出，其在活產(chǎn)嬰兒中的發(fā)生率約為0.6%[2]。染色體核型分析和熒光原位雜交技術(shù) （fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）是目前診斷染色體病的主要方法。本研究對851例新生兒的染色體核型分析和FISH結(jié)果進行歸納總結(jié)，以了解新生兒異常染色體的分布情況，為早期發(fā)現(xiàn)染色體病提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 對象 2008年1月～2018年3月期間851例臨床表現(xiàn)不同程度的反應(yīng)遲鈍、精神發(fā)育遲滯或伴器官畸形、特殊面容、膚紋異常等疑似染色體異常癥狀的新生兒，除常規(guī)檢查外另進行了外周血染色體核型分析和FISH。樣本采集及相關(guān)檢測均已告知患者，并均簽署了知情同意書。本研究經(jīng)鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 G顯帶染色體核型分析 取患兒外周血培養(yǎng)，常規(guī)方法制備染色體計數(shù)20個核型，按ISCN標準分析3個核型，嵌合體加倍計數(shù)[3]。

1.2.2 FISH FISH對21號和性染色體著絲粒探針，進行標本處理、變性、雜交、雜交后洗脫操作。

1.2.3 熒光顯微鏡檢查 在奧林巴斯BX51熒光顯微鏡下通過三色濾光塊(DAPI/TRITC/FITC)觀察雜交信號，F(xiàn)ISH 2.0熒光圖像分析系統(tǒng) （俄羅斯VideoTesT）進行圖像分析，每份間期核標本計數(shù)200個細胞判斷陽性結(jié)果。

2 結(jié)果

851例新生兒中染色體正常（320-550條帶階段未見染色體異常）的631例，占全部受檢病例數(shù)的74.1%（631/851）。染色體異常220例，占全部受檢病例的25.9%（220/851），其中各種類型的21三體綜合征178例，占染色體異常核型的80.9%(178/220)。男性患兒105例，女性患兒73例，男女之比約為 1.44：1。標準三體型 167例占 93.8%（167/178），嵌合型 6 例占 3.4%（6/178），易位型 5 例占2.8%（5/178）。易位型5例中，其中G/G易位2例占 40.0%（2/5），D/G 易位 3例占 60.0%（3/5）。 其余異常核型分別涉及到性染色體及多條常染色體共220例，詳見表1。

表1 220例患兒染色體異常分布

3 討論

由于缺乏有效的治療措施，出生缺陷如今已成為新生兒致死、致殘的重要原因之一[4]。本研究檢出的染色體異常核型中21-三體綜合征有178例，占染色體異常核型的80.9%，本組資料最顯著的一個特點是全部21-三體綜合征病例中標準三體型占93.8%，嵌合型占3.4%，易位型占2.8%，與文獻報道一致[2]。21-三體綜合征是新生兒中最常見的染色體異常疾病，嚴重危害兒童健康，群體發(fā)病率為12.3%，占智力障礙病人的10%[5，6]。目前還無法治療，因此對高風(fēng)險孕婦開展產(chǎn)前胎兒染色體核型分析非常重要，只有早期診斷，及時終止妊娠，才能減少患兒出生。

本研究檢出5p-綜合征（貓叫綜合征）5例，群體發(fā)病率1/50000，在智力低下兒中約占1～1.5%，在小兒染色體病中占1.3%，在常染色體結(jié)構(gòu)異常病兒中居首位。本病的主要臨床特征是患兒在嬰幼兒期的哭聲似小貓的“咪咪”聲，有關(guān)研究認為是喉部畸形、松弛、柔弱所引起，但也有認為是中樞神經(jīng)系統(tǒng)器官性或功能性病變引起呼氣時喉部漏氣所致。大部分患者能活到兒童，少數(shù)能活到成年。5p15為本病缺失片段。80%的病例為染色體片段的單純?nèi)笔В?0%為不平衡易位引起的，環(huán)狀染色體或嵌合體則比較少見。大部分病例的染色體畸變是新發(fā)生的，呈散發(fā)性，但約10～15%患者為攜帶者的子代[7]。

額外標記小染色體 （small supernumerary marker chromosome，sSMC）是指在人類正常染色體核型 46，XX（女性）或者 46，XY（男性）基礎(chǔ)上額外增加的小標記染色體。其在大多數(shù)情況下要小于20號染色體，結(jié)構(gòu)可能是倒位重復(fù)、環(huán)狀或者其它微小結(jié)構(gòu)[8]。本文檢出額外小染色體1例，新生兒肌張力低，面容異常送檢，核型為 47，XY，t(14；18)，+mar。家系調(diào)查：其父25歲，其母21歲，從事服務(wù)性工作。否認近親結(jié)婚和有害物質(zhì)、放射性物質(zhì)接觸史。此系第一胎，足月順產(chǎn)，妊娠期無特殊不適，患兒父母拒絕進行染色體檢查，無法查明標記染色體來源。

本研究檢出的性染色體異常12例，其中2例47，XXY；4 例 47，XYY；5 例 45，X；1 例 48，XXXY，均建議患兒家屬到內(nèi)分泌科進行咨詢。

本院新生兒異常核型檢出率25.9%，高于Balkan等[9]報道的16.1%、張璩等[10]報道的16.3%和鄭昭科等[11]報道的14.47%。核型異常檢出率較高的原因可能為：⑴染色體核型分析和FISH共同檢測；⑵臨床醫(yī)生嚴格執(zhí)行染色體細胞遺傳學(xué)檢查的指征；⑶與其他學(xué)者報道不一致可能與納入研究的人群、研究時間段、時間跨度不一致有關(guān)。

綜上所述，常染色體病患者一般均有較嚴重或明顯的先天性多發(fā)畸形、智力和生長發(fā)育落后，常伴特殊膚紋，即所謂的“三聯(lián)征”[7]。染色體異?；颊呦乱淮霈F(xiàn)染色體異常的概率高于正常人群，尤其是平衡易位攜帶者下一代出現(xiàn)染色體異常的概率高達50%～100%，給家庭和社會造成沉重的經(jīng)濟和精神負擔。因此盡早進行細胞遺傳學(xué)核型檢查，檢出攜帶者。