黃健軍 岑芳 鄧剛

中圖分類號(hào) R284.2；R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2018）08-1052-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.08.10

摘 要 目的：優(yōu)化瑤藥破骨風(fēng)的水提取工藝，并考察其水提物的抗炎鎮(zhèn)痛作用。方法：采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，以阿魏酸含量、干膏率為指標(biāo)，考察提取時(shí)間、液料比、提取次數(shù)3個(gè)因素對(duì)水提取工藝的影響，優(yōu)選最佳工藝，并進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。以阿司匹林為陽(yáng)性對(duì)照，采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法和角叉菜膠致小鼠足腫脹法觀察低、中、高劑量（3、6、12 g/kg，以生藥計(jì)）的破骨風(fēng)水提物的抗炎作用，采用熱板致小鼠疼痛反應(yīng)和醋酸致小鼠扭體反應(yīng)考察其鎮(zhèn)痛作用；采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定小鼠以角叉菜膠致炎后血清中腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細(xì)胞介素1β（IL-1β）的含量，采用紫外分光光度法檢測(cè)小鼠血清和炎性組織中前列腺素E2（PGE2）的含量。結(jié)果：最優(yōu)提取工藝為提取時(shí)間120 min，液料比16 ∶ 1（mL/g），提取3次。與模型組比較，破骨風(fēng)水提物低、中、高劑量組小鼠耳廓腫脹度、足腫脹率均顯著降低，扭體次數(shù)顯著減少，疼痛反應(yīng)痛閾值顯著升高（P<0.05或P<0.01）；與模型組比較，該水提物低、中、高劑量組小鼠血清中的TNF-α、IL-1β、PGE2含量與炎性組織中的PGE2含量均顯著減少（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論：優(yōu)選的瑤藥破骨風(fēng)水提工藝效率高、穩(wěn)定可行；其水提物對(duì)模型小鼠具有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用，可能是通過(guò)降低體內(nèi)TNF-α、IL-1β、PGE2水平發(fā)揮作用。

關(guān)鍵詞 瑤藥；破骨風(fēng)；水提取；工藝優(yōu)化；抗炎；鎮(zhèn)痛

ABSTRACT OBJECTIVE： To optimize the water-extraction technology of Yao medicine Jasminum lanceolarium and study the anti-inflammatory and analgesic effect of its water extract. METHODS： The single factor test and orthogonal test were used to investigate the effects of extraction time， liquid-solid ratio and extraction times on water-extraction technology and optimize extraction technology using ferulic acid content and dry extract yield as index. The validation test was also conducted. With aspirin as positive control， the method of ear edema induced by xylene and paw edema induced by carrageenan in mice were used to observe the anti-inflammation effects of low-dose， medium-dose and high-dose （3， 6， 12 g/kg， by crude drug） of J. lanceolarium water extract； the analgesic effect of those was investigated by hot-plate induced pain response test and mice writhing response test. The contents of TNF-α and IL-1β were determined by ELISA after carrageenan induced inflammation in mice. The contents of PGE2 in serum and inflammation tissue were detected by UV spectrophotometry. RESULTS： The optimal extraction technology was as follows as extraction time of 120 min， liquid-solid ratio of 16 ∶ 1 （mL/g）， extracting for 3 times. Compared to model group， the ear edema degree and paw edema rate of mice were raduced， writhing response times were lessened， and pain response threshold was enhanced significantly in low-dose， medium-dose and high-dose groups of J. lanceolarium water extract （P<0.05 or P<0.01）. Compared to model group， the contents of TNF-α， IL-1β and PGE2 in serum and the content of PGE2 in inflammation tissue of mice were raduced significantly in low-dose， medium-dose and high-dose groups of J. lanceolarium water extract （P<0.05 or P<0.01）. CONCLUSIONS： The optimized water-extraction technology of Yao medicine J. lanceolarium shows high efficiency， stable and feasible. Water extract shows significant anti-inflammatory and analgesic effects through reducing the contents of TNF-α， IL-1β and PGE2.

KEYWORDS Yao medicine； Jasminum lanceolarium； Water extraction； Technology optimization； Anti-in?ammation； Analgesic

瑤藥破骨風(fēng)為木犀科植物清香藤（Jasminum lanceolarium Roxb.）的全草，作為104種經(jīng)典瑤藥之一，其味苦、辛，性平，可祛風(fēng)除濕、活血散瘀、消腫止痛；主治“崩閉悶”（風(fēng)濕痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎）、“改布悶”（腰腿痛）、“播沖”（跌打損傷）、“眸名腫毒”（無(wú)名腫毒）及“不錐累”（瘡癤癰腫）等[1]。破骨風(fēng)收載于《廣西瑤族習(xí)用藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（第一卷），瑤語(yǔ)發(fā)音為“排迸崩”，別名清香藤，在廣西、廣東、云南、貴州等地均有分布[2]。破骨風(fēng)主要含有環(huán)烯醚萜、木脂素、黃酮、三萜、簡(jiǎn)單苯丙素等成分[3-5]。阿魏酸是破骨風(fēng)中的主要活性成分之一，具有抗氧化和清除自由基[6]、抗血栓[7]、降血壓和抗癌[8]等作用，目前常用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定其含量。破骨風(fēng)在廣西尤其是瑤族地區(qū)植物資源豐富、民間藥用歷史悠久[3-4]，但是關(guān)于其現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究的報(bào)道較少，極大地制約了該藥材的開(kāi)發(fā)利用。將民間習(xí)用藥材制成中藥顆粒劑，具有用量小、起效快、質(zhì)量可控、攜帶方便等優(yōu)點(diǎn)[9]。為充分發(fā)揮破骨風(fēng)資源和療效的優(yōu)勢(shì)，本研究根據(jù)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以阿魏酸含量和干膏率為指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)選破骨風(fēng)的水提工藝；在此基礎(chǔ)上考察其水提物對(duì)模型小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用并初步探討其作用機(jī)制，為相關(guān)制劑的后續(xù)研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

LC-10A型HPLC儀，包括UV-10A紫外檢測(cè)器、威瑪龍色譜工作站（日本Shimadzu公司）；XS205DU型電子分析天平（梅特勒-托利多國(guó)際貿(mào)易上海有限公司）；752型紫外分光光度計(jì)（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；DK-S24型數(shù)顯恒溫水浴鍋（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；TDL80-2B型離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；RB-200型智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 藥品與試劑

阿魏酸對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：120927-201110，供含量測(cè)定用）；阿司匹林片（湖南新匯制藥有限公司，批號(hào)：160805，規(guī)格：50 mg/片）；生理氯化鈉溶液（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：A17042508-2，規(guī)格：500 mL ∶ 4.5 g）；角叉菜膠（美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：088K0317）；冰醋酸（成都市科龍化工試劑廠產(chǎn)品，批號(hào)：20140716）；人白細(xì)胞介素1β（IL-1β）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒（批號(hào)：E-EL-M0037c）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA試劑盒（批號(hào)：E-EL- M0049c）均由武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司提供；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純，水為純化水。

1.3 藥材

破骨風(fēng)藥材于2015年8月采自廣西壯族自治區(qū)金秀瑤族自治縣，經(jīng)廣西健豐藥業(yè)有限公司粱可文副研究員鑒定為木犀科植物清香藤（J. lanceolarium Roxb.）的全草。

1.4 動(dòng)物

昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量為（20±2）g，購(gòu)自桂林醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，使用許可證號(hào)：SCXK（桂）2007-0003。

2 方法與結(jié)果

2.1 阿魏酸的含量測(cè)定方法

2.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性、專屬性試驗(yàn) 色譜柱：Aichrom C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.085%磷酸（15 ∶ 85，V/V）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：316 nm；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。在此條件下，理論板數(shù)按阿魏酸峰計(jì)均在5 000以上；藥材中其他成分對(duì)阿魏酸的測(cè)定無(wú)干擾，專屬性良好。色譜見(jiàn)圖1。

2.1.2 溶液的制備 （1）對(duì)照品溶液。精密稱取阿魏酸對(duì)照品適量，置于棕色量瓶中，以70%甲醇溶解制成56.5 μg/mL的溶液，即得。（2）供試品溶液。將藥材樣品粉碎，過(guò)2號(hào)篩（下同），精密稱取適量，置于棕色錐形瓶中，加水，稱定質(zhì)量后回流提??；放冷，再次稱定質(zhì)量，用水補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3 方法學(xué)考察 （1）線性關(guān)系考察。精密吸取“2.1.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液3、6、9、12、15 μL，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以進(jìn)樣量（x，μg）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程y=2 413 310.9x+ 48 890.4（r=0.999 5），結(jié)果表明阿魏酸檢測(cè)進(jìn)樣量線性范圍為0.169 5～0.847 5 μg。（2）精密度試驗(yàn)。分別精密吸取“2.1.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μL，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果對(duì)照品溶液和供試品溶液峰面積的RSD分別為0.82%、0.93%。（3）穩(wěn)定性試驗(yàn)。將“2.1.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液和供試品溶液于室溫避光放置24 h，分別于0、2、4、8、12、24 h時(shí)按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣10 μL，結(jié)果對(duì)照品溶液和供試品溶液峰面積的RSD分別為1.15%、1.20%。（4）加樣回收率試驗(yàn)。取已知含量的藥材樣品適量，共6份，分別精密加入對(duì)照品溶液適量，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定阿魏酸含量并計(jì)算加樣回收率，結(jié)果平均加樣回收率為99.25%，RSD為1.20%。

2.2 干膏率測(cè)定方法

精密吸取“2.3”提取工藝項(xiàng)下的提取液20 mL，置于干燥至恒質(zhì)量的蒸發(fā)皿中，按照2015年版《中國(guó)藥典》（四部）“通則0831干燥失重測(cè)定法”[10]測(cè)定并計(jì)算干膏率。干膏率（%）=干膏質(zhì)量（g）/藥材質(zhì)量（g）×100%。

2.3 破骨風(fēng)水提工藝的優(yōu)選

2.3.1 單因素試驗(yàn) 對(duì)影響提取工藝的主要因素（提取時(shí)間、液料比、提取次數(shù)）進(jìn)行單因素考察。（1）提取時(shí)間：精密稱取適量藥材樣品粉末5份，各加入25倍量水，分別回流提取30、60、90、120、150 min；（2）液料比：精密稱取適量藥材樣品粉末5份，分別加入8、12、16、20、24倍量水，回流提取90 min；（3）提取次數(shù)：精密稱取適量藥材樣品粉末5份，加入20倍量水，分別回流提取1、2、3、4、5次，每次120 min。按“2.1”“2.2”項(xiàng)下方法分別測(cè)定各條件下所得水提物的阿魏酸含量和干膏率。結(jié)果顯示，提取時(shí)間在60～120 min、液料比在12 ∶ 1～20 ∶ 1、提取1～3次的條件下，阿魏酸和干膏率的提取效果較好，故在此條件范圍內(nèi)進(jìn)行正交試驗(yàn)優(yōu)化。

2.3.2 正交試驗(yàn) 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，選擇提取時(shí)間（A）、液料比（B）、提取次數(shù)（C）為主要影響因素，按L9（34）正交表設(shè)計(jì)試驗(yàn)，每個(gè)試驗(yàn)條件下平行試驗(yàn)3次，依法測(cè)定水提物的阿魏酸含量和干膏率。因素與水平見(jiàn)表1，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果見(jiàn)表2，方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。

由表2結(jié)果可知，A、B、C 3個(gè)因素對(duì)破骨風(fēng)提取效率的影響大小順序依次為C>A>B；由表3結(jié)果可知，C因素（提取次數(shù)）對(duì)阿魏酸量和干膏率的影響均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，A3B1C3工藝結(jié)果最佳。但由于B因素影響程度最小，出于節(jié)約成本等多方面綜合考慮，選擇最優(yōu)工藝為A3B2C3，即提取時(shí)間為120 min，液料比16 ∶ 1，提取3次。

2.3.3 驗(yàn)證試驗(yàn) 取藥材樣品粉末3份，按“2.3.2”項(xiàng)下優(yōu)選工藝提取并測(cè)定。結(jié)果顯示，阿魏酸含量分別為1.56、1.54、1.56 mg/g（RSD=0.61%，n=3），干膏率分別為18.36%、18.22%、18.17%（RSD=0.44%，n=3），結(jié)果穩(wěn)定，且均高于正交試驗(yàn)結(jié)果，因此確定A3B2C3為最優(yōu)水提工藝。

2.4 破骨風(fēng)水提物抗炎鎮(zhèn)痛作用研究

考察破骨風(fēng)水提物對(duì)模型小鼠的抗炎鎮(zhèn)痛作用。計(jì)量資料均以x±s表示，采用SPSS 13.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.4.1 破骨風(fēng)水提物給藥液的制備 取藥材樣品粉末，按“2.3”項(xiàng)下優(yōu)選工藝提取后，濃縮成浸膏，用0.5%羧甲基纖維素鈉溶液定容至100 mL（1 g/mL，以生藥計(jì)），于4 ℃保存?zhèn)溆谩１緦?shí)驗(yàn)中給藥劑量（g/kg）均按給藥液中所含生藥的質(zhì)量計(jì)算。

2.4.2 二甲苯致小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn) 參照文獻(xiàn)[11]方法，取小鼠50只，雌雄各半，按數(shù)字隨機(jī)表分為模型組（等量生理鹽水）、陽(yáng)性組（阿司匹林水溶液，0.06 g/kg）和破骨風(fēng)低、中、高劑量組（破骨風(fēng)水提物給藥液，3、6、12 g/kg，下同），每組10只，灌胃給藥，qd，連續(xù)4 d。末次給藥1 h后，各組小鼠右耳廓兩面均勻涂抹二甲苯0.05 mL，左耳不涂作為正常耳。1 h后脫頸椎處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用打孔器（直徑8 mm）在雙耳同一位置取下耳片，稱質(zhì)量，并計(jì)算腫脹度及腫脹抑制率[腫脹度（mg）=右耳片質(zhì)量-左耳片質(zhì)量；腫脹抑制率（%）=（模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度）/模型組平均腫脹度×100%]，結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可知，與模型組比較，破骨風(fēng)低、中、高劑量組及陽(yáng)性組小鼠耳廓腫脹度顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），表明破骨風(fēng)水提物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹有顯著的抑制作用；且隨著給藥劑量增加，小鼠耳廓腫脹度逐漸降低、腫脹抑制率逐漸升高。

2.4.3 角叉菜膠致小鼠足腫脹實(shí)驗(yàn) 參照文獻(xiàn)[12]方法，取小鼠50只，雌雄各半，分組及給藥方式同“2.4.2”項(xiàng)下，連續(xù)給藥7 d。末次給藥30 min后，于小鼠右后足注射0.1%角叉菜膠生理鹽水溶液0.1 mL致炎，分別于致炎后0.5、1、1.5、2 h采用游標(biāo)卡尺測(cè)量并記錄小鼠右后足爪容積，并計(jì)算腫脹率[腫脹率（%）=（致炎后足容積-致炎前足容積）/致炎前足容積×100%]，結(jié)果見(jiàn)表5。

由表5可知，與模型組比較，破骨風(fēng)低、中、高劑量組及陽(yáng)性組小鼠各時(shí)間點(diǎn)的足腫脹率顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），表明破骨風(fēng)水提物對(duì)角叉菜膠致小鼠足腫脹有顯著的抑制作用；且隨著給藥劑量增加，小鼠足腫脹率逐漸降低。

2.4.4 醋酸致小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn) 參照文獻(xiàn)[13]方法，取小鼠50只，雌雄各半，分組同“2.4.2”項(xiàng)下；模型組和破骨風(fēng)低、中、高劑量組均灌胃給藥，連續(xù)4 d；陽(yáng)性組前3天灌胃生理鹽水，第4天灌胃阿司匹林水溶液。末次給藥1 h后小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL，記錄15 min內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表6。

由表6可知，與模型組比較，破骨風(fēng)低、中、高劑量組及陽(yáng)性組小鼠15 min內(nèi)的扭體次數(shù)均明顯減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明破骨風(fēng)水提物對(duì)小鼠腹腔注射醋酸引起的疼痛具有顯著的抑制作用；且隨著給藥劑量增加，小鼠扭體次數(shù)逐漸減少。

2.4.5 熱板法致小鼠疼痛反應(yīng)實(shí)驗(yàn) 參照文獻(xiàn)[13]方法，取雌性小鼠置熱板儀[（55±0.5）℃]，以小鼠自投入至舔后足時(shí)間作為痛閾值。取痛閾值為5～30 s的小鼠50只，分組及給藥方式同“2.4.2”項(xiàng)下，連續(xù)給藥7 d，分別于末次給藥后30、60 min時(shí)測(cè)定小鼠痛閾值，結(jié)果見(jiàn)表7。

由表7可知，與模型組比較，破骨風(fēng)低、中、高劑量組及陽(yáng)性組小鼠的痛閾值在給藥后30 min和60 min時(shí)均明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01），表明破骨風(fēng)水提物能提高小鼠熱板疼痛反應(yīng)的痛閾值；且隨著給藥劑量增加，小鼠痛閾值逐漸升高。

2.4.6 角叉菜膠致炎小鼠血清和炎性組織中炎癥因子的測(cè)定 對(duì)“2.4.3”項(xiàng)下小鼠，在角叉菜膠致炎后4 h時(shí)進(jìn)行眼球取血，然后頸椎脫臼處死。自踝關(guān)節(jié)剪下發(fā)炎腫脹的右后足，剝皮剪碎后投入3 mL生理鹽水中浸泡，并不斷振搖1 h。將血樣與炎性組織標(biāo)本浸泡液離心（3 000 r/min，離心半徑為6 cm，下同）后取上層血清和炎性標(biāo)本上清液，置于-70 ℃冰箱保存。參照文獻(xiàn)[14]方法，分別取血清和炎性標(biāo)本上清液各200 μL，加入0.5 mol/L氫氧化鉀甲醇溶液2 mL，50 ℃水浴溫育20 min；加入2.5 mL甲醇，離心后取上清液，以紫外分光光度計(jì)測(cè)定其在278 nm波長(zhǎng)處的吸光度（A），以每毫升血清/每克炎性組織對(duì)應(yīng)的A表示PGE2的含量；另取血清，采用ELISA法檢測(cè)IL-1β、TNF-α的含量，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，結(jié)果見(jiàn)表8。

由表8可知，與模型組比較，破骨風(fēng)低、中、高劑量組及陽(yáng)性組小鼠以角叉菜膠致炎后，血清中IL-1β、TNF-α、PGE2及炎性組織中 PGE2的含量均顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）。

3 討論

3.1 破骨風(fēng)提取工藝研究

在破骨風(fēng)主要活性成分尚待深入研究的情況下，干膏率在某種程度上能直觀反映藥材的提取效率。因此，筆者選擇阿魏酸含量和干膏率作為提取工藝優(yōu)選的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

本課題組前期選取甲醇、乙醇（不同體積分?jǐn)?shù)）、水、乙醚等為提取溶劑進(jìn)行考察，結(jié)果乙醚對(duì)阿魏酸的提取效率較低；甲醇、乙醇、水提取阿魏酸的提取率相當(dāng)，但甲醇提取液中有一個(gè)與阿魏酸保留時(shí)間接近的色譜峰，明顯干擾測(cè)定；而不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇提取與水提取相比較，水提取液色譜圖中阿魏酸分離度高，且干膏率明顯更高。綜合實(shí)際生產(chǎn)成本、有機(jī)溶劑環(huán)境污染等因素，本課題組選擇水為提取溶劑。另外，對(duì)回流提取法、水煎煮法、冷浸漬法進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)回流提取法（20倍量水提取2次，每次120 min）所得阿魏酸含量和干膏率明顯高于水煎煮法（20倍量水煎煮3次，分別煎煮120、60、60 min）和水冷浸提法（20倍量水浸提3次，分別浸提48、24、24 h）。因此，確定水回流提取法為本試驗(yàn)提取方法。

經(jīng)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，提取次數(shù)是影響阿魏酸含量和干膏率的最主要因素，且均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)正交試驗(yàn)優(yōu)選，最優(yōu)工藝為提取時(shí)間120 min、液料比16 ∶ 1、提取3次；經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)證實(shí)，該工藝提取效率高、穩(wěn)定可行。

3.2 破骨風(fēng)抗炎鎮(zhèn)痛作用研究

阿司匹林為非甾體抗炎藥，抗炎鎮(zhèn)痛作用顯著，常作為陽(yáng)性對(duì)照藥應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)研究[15-16]，因此本實(shí)驗(yàn)采用阿司匹林作為陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)不同劑量的破骨風(fēng)水提物進(jìn)行了抗炎鎮(zhèn)痛作用研究。結(jié)果表明，破骨風(fēng)水提物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹、角叉菜膠致小鼠足腫脹、醋酸致小鼠扭體反應(yīng)和熱板致小鼠疼痛反應(yīng)均具有顯著抑制作用，其抗炎鎮(zhèn)痛作用明確。

已有研究證實(shí)，IL-1β、TNF-α是主要致炎介質(zhì)，可作用于單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞而引起炎癥反應(yīng)；PGE2可與緩激肽等炎癥介質(zhì)起協(xié)同作用，加劇炎癥反應(yīng)；大量PGE2、白三烯等與氧自由基的作用是致痛的主要原因，為致炎致痛介質(zhì)[17-18]。本研究表明，破骨風(fēng)水提物可降低角叉菜膠致炎小鼠血清中的TNF-α、IL-1β、PGE2含量與炎性組織中的PGE2含量，提示這可能為其抗炎鎮(zhèn)痛的作用機(jī)制。

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（收稿日期：2017-10-18 修回日期：2018-01-28）

（編輯：段思怡）