王柏輝，楊 蕾，羅玉龍，王 宇，袁 倩，王德寶，靳 燁*

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010018）

隨著國家退化草地限牧、退牧還草及禁牧舍飼、恢復(fù)草地生態(tài)政策的實(shí)施，內(nèi)蒙古、新疆和青海等以放牧為主的地區(qū)逐漸改變飼養(yǎng)模式，由傳統(tǒng)的天然放牧或放牧補(bǔ)飼的飼養(yǎng)方式轉(zhuǎn)變?yōu)樯犸暬蛏犸暸c放牧（季節(jié)性）相結(jié)合的飼養(yǎng)管理方式，這種轉(zhuǎn)變的確帶來了明顯的生態(tài)環(huán)境效應(yīng)和產(chǎn)生了巨大的社會效益，但同時(shí)帶來了一些負(fù)面影響；其中放牧羊圈養(yǎng)后造成的羊肉品質(zhì)劣化是消費(fèi)者的一個(gè)普遍認(rèn)識。放牧羊肉在風(fēng)味上顯著優(yōu)于舍飼羊，羊肉異味發(fā)生率明顯低，并且放牧羊肉營養(yǎng)素組成和功能性成分含量方面也優(yōu)于非放牧羊[1-2]。蘇尼特羊作為內(nèi)蒙古獨(dú)特的優(yōu)良羊種，蛋白含量高、膻味輕，并且富含人體所需的各種氨基酸和脂肪酸，具有較高的營養(yǎng)價(jià)值[3]。

近年來，動物體內(nèi)胃腸道微生物是研究熱點(diǎn)，大量文獻(xiàn)報(bào)了道腸道微生物與動物（包括人類）營養(yǎng)代謝、肥胖、脂肪沉積和糖尿病等的關(guān)系，胃腸道微生物在營養(yǎng)代謝方面的作用主要包括碳水化合物代謝、蛋白質(zhì)和氨基酸代謝、脂質(zhì)代謝、維生素代謝及礦物質(zhì)代謝等[4-5]。研究表明動物飲食和能量代謝的不同、羊腸道菌群的變化與肉中化學(xué)組成的變化有密切的聯(lián)系[6]。也有研究表明首先脂肪沉積與擬桿菌屬和厚壁菌屬的比例有密切關(guān)系，其次細(xì)菌基因可能調(diào)控與脂代謝途徑相關(guān)基因。腸道微生物的發(fā)酵產(chǎn)物短鏈脂肪酸作為機(jī)體的能源物質(zhì)，可調(diào)控G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR 41和GPCR 43）的活性，其與脂肪代謝相關(guān)酶（脂肪酸合成酶、乙酰輔酶A羧化酶等）間具有相互協(xié)同、相互調(diào)控的作用[7-9]。另外，研究不同飼養(yǎng)模式下蘇尼特羊腸道微生物及代謝產(chǎn)物和血液與羊肉中脂肪酸的相互關(guān)系，為今后改善放牧羊圈養(yǎng)后羊肉品質(zhì)的劣化提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

在內(nèi)蒙古烏拉特中旗，選擇兩種飼養(yǎng)方式（放牧和放牧+舍飼）12 月齡蘇尼特羊共24 只，每組12 只，公母各半。放牧組：斷奶后，自由放牧12 個(gè)月；放牧+舍飼組：斷奶后，自由放牧9 個(gè)月后舍飼喂養(yǎng)3 個(gè)月。在放牧條件下，牧草種類以烏拉特中旗荒漠化草原典型牧草（芨芨草、蒙古蔥、中間錦雞兒、沙生冰草、堿韭等10余種）為主；舍飼條件下，草料以農(nóng)區(qū)飼草料（玉米秸稈、葵盤粉、葵花籽皮等，同時(shí)補(bǔ)充玉米精料及育肥飼料）為主，放牧組和放牧+舍飼組體質(zhì)量分別約為40.8 kg和28.55 kg。屠宰前，用乙二胺四乙酸抗凝劑的真空采血管采集羊頸靜脈血液約2 mL；屠宰后，取背最長肌60 g于－20 ℃保藏待用。收集糞便約20 g于無菌無酶凍存管中，液氮運(yùn)輸，－80 ℃保藏待測。

三氯甲烷、三氟化硼-乙醚絡(luò)合物、氯化鈉、氫氧化鈉、無水硫酸鈉、硫酸、乙醚（均為分析純）、正己烷（色譜純）、甲醇（色譜純）、37 種脂肪酸甲酯的混合標(biāo)準(zhǔn)品 美國Sigma公司；甘油三酯（triglyceride，TG）測定試劑盒、總膽固醇（total cholesterol，TC）測定試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）測定試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）測定試劑盒 南京建成生物工程研究所；QIAamp DNA Stool Mini Kit試劑盒 德國QIAGEN公司；乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸標(biāo)準(zhǔn)品 天津光復(fù)科技發(fā)展有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國賽默飛世爾科技公司；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠；TU-1810紫外-可見分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；HJ-6型多頭磁力攪拌加熱器 江蘇榮華儀器制造有限公司；5810R離心機(jī) 德國Eppendorf公司；HH-4水浴鍋 上海?，攲?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；GRX-9053A型熱空氣干燥箱 上海一恒科技有限公司；FTC-3000聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）儀 加拿大Funglyn Biotech公司。

1.3 方法

1.3.1 腸道微生物菌群的測定

1.3.1.1 糞便總DNA提取

采用QIAamp DNA Stool Mini Kit試劑盒提取細(xì)菌總DNA，用核酸濃度測定儀測定總DNA濃度，于－20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.1.2 細(xì)菌16S rDNA序列擴(kuò)增和MiSeq測序

選取16S rDNA的V4～V5區(qū)序列進(jìn)行高通量測序分析。采用兩步PCR擴(kuò)增方法進(jìn)行文庫構(gòu)建。將純化的DNA作為模板，利用16S rDNA V4～V5區(qū)通用引物515F（5’-GTGCCAGCMGCCGCGG-3’）和907R（5’-CCGTCAATTCMTTTRAGTTT-3’）擴(kuò)增目的片段16S rDNA V4～V5區(qū)，并用1.2%瓊脂糖凝膠電泳檢測，檢測效果較好的樣本進(jìn)行2%瓊脂糖凝膠電泳并切膠回收，以回收產(chǎn)物為模板進(jìn)行一次8 個(gè)循環(huán)的PCR擴(kuò)增，將Illumina平臺測序所需要的接頭，測序引物和標(biāo)簽序列添加到目的片段兩端。全部PCR產(chǎn)物采用AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒進(jìn)行回收，并用PCR儀進(jìn)行熒光定量，均一化混勻后完成文庫構(gòu)建，在Illumina MiSeq平臺上完成測序。此實(shí)驗(yàn)由上海微基生物科技有限公司完成。

1.3.2 腸道微生物代謝物的測定

1.3.2.1 短鏈脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別取標(biāo)準(zhǔn)品（純度為99%）1 mL用色譜純甲醇定容至10 mL容量瓶中，依次10 倍稀釋為6 個(gè)梯度（10－1、10－2、10－3、10－4、10－5、10－6）。

1.3.2.2 短鏈脂肪酸的提取

稱取0.1～0.2 g糞便與2 mL冰生理鹽水，再加入1 mL 50%的硫酸溶液后漩渦混勻，10 000 r/min離心5 min。然后再加入2 mL乙醚充分混勻，10 000 r/min離心5 min，靜止分層，取上清液，用0.22 μm有機(jī)濾膜過濾后，用于氣相色譜分析。

1.3.2.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件

氣相色譜條件：DB-5色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm），載氣為氦氣，載氣流速1.2 mL/min，進(jìn)樣口溫度250 ℃，進(jìn)樣量為1 μL，分流比10∶1。采用程序升溫：初始溫度為100 ℃，保持0.5 min，然后以8 ℃/min的速率升至180 ℃，保持1 min；然后以20 ℃/min的速率升至200 ℃，保持5 min。

質(zhì)譜條件：離子源溫度250 ℃，傳輸線溫度250 ℃，質(zhì)量掃描范圍m/z 40～450。

1.3.3 血脂指標(biāo)的測定

采用分光光度法，根據(jù)測定試劑盒說明書操作步驟，對TG、TC、HDL-C、LDL的濃度進(jìn)行測定。

1.3.4 羊肉中脂肪酸的測定

1.3.4.1 脂肪酸的提取

根據(jù)Folch等[10]的方法進(jìn)一步調(diào)整：稱取5 g已均質(zhì)肉樣加入氯仿-甲醇混合液（2∶1，V/V），振搖2 h，浸泡8 h后用G3漏斗過濾，濾液中加入5 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)20%氯化鈉溶液，靜止分層，下層的氯仿層即為脂肪提取液。通過無水硫酸鈉脫水后，40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮得到脂肪。然后加入0.5 mol/L的氫氧化鈉-甲醇溶液5 mL，70 ℃下回流5 min，進(jìn)行脂肪皂化，隨后加入5 mL的三氟化硼乙醚溶液，70 ℃下回流2 min，進(jìn)行脂肪甲酯化。最后加入2 mL色譜純正己烷，70 ℃下回流1 min后，加入5 mL飽和NaCl溶液，靜置10 min，吸取出1 mL正己烷層于進(jìn)樣瓶中，用0.22 μm有機(jī)濾膜過濾后，進(jìn)行氣相色譜分析。

1.3.4.2 氣相色譜-質(zhì)譜分析

氣相色譜條件：反式色譜柱（100 m×0.25 mm，0.20 μm），載氣為氦氣，載氣流速1 mL/min，進(jìn)樣口溫度240 ℃，進(jìn)樣量1 μL，分流比100∶1。采用程序升溫：初始溫度為60 ℃，保持1 min，然后以20 ℃/min的速率升至120 ℃，保持1 min；然后以5 ℃/min的速率升至240 ℃，保持15 min。

質(zhì)譜條件：離子源溫度為300 ℃，傳輸線溫度240 ℃，質(zhì)量掃描范圍m/z 50～500，溶劑延遲時(shí)間4 min。

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和相關(guān)性分析（Pearson系數(shù)）。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼養(yǎng)方式對腸道菌群的影響

通過應(yīng)用高通量測序技術(shù)對兩組糞便樣品進(jìn)行測序分析可知，門水平上，腸道菌群以厚壁菌門和擬桿菌門為主，約占94%；從屬水平上來說，測序結(jié)果中豐度大于1%的主要包括擬桿菌屬、Alistipes、纖維桿菌屬、Phocaeicola和瘤胃球菌屬。

表1 飼養(yǎng)方式對腸道微生物相對豐度的影響Table 1 Effects of two different feeding patterns on the abundance of intestinal flora%

由表1可知，在兩種飼養(yǎng)方式下，厚壁菌門和擬桿菌門的豐度沒有顯著差異（P＞0.05）。放牧+舍飼組中擬桿菌屬、Alistipes和Phocaeicola的豐度要顯著高于放牧組（P＜0.05），而纖維桿菌屬和瘤胃球菌屬的豐度顯著低于放牧組（P＜0.05）。放牧組中厚壁菌門與擬桿菌門的比值高于放牧+舍飼組，但差異不顯著（P＞0.05）。Sonia等[7]研究表明相對于瘦的動物或人，肥胖的動物或人的腸道菌群中有較高比例的厚壁菌門，較低比例的擬桿菌門，這與本研究中結(jié)果相一致。由于放牧組中擬桿菌屬的比例顯著低于放牧+舍飼組，并且放牧組的肌內(nèi)脂肪含量高于放牧+舍飼組，肌內(nèi)脂肪含量分別為3.33%和2.55%，從而進(jìn)一步說明了腸道菌群與脂肪沉積有密切關(guān)系。

2.2 飼養(yǎng)方式對腸道微生物代謝物的影響

表2 飼養(yǎng)方式對腸道微生物代謝物含量的影響Table 2 Effects of two different feeding patterns on the contents of intestinal short chain fatty acids μg/g

由表2可知，兩種飼養(yǎng)方式對腸道微生物代謝物的含量有顯著影響。放牧組中乙酸、丁酸和戊酸的含量顯著低于放牧+舍飼組（P＜0.05），而丙酸和異戊酸的含量顯著高于放牧+舍飼組（P＜0.05），異丁酸含量在兩組間沒有顯著差異（P＞0.05）。

動物飲食通過小腸被吸收或消化，腸道菌群的代謝物主要是短鏈脂肪酸，主要包括乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸和異戊酸為主。短鏈脂肪酸作為機(jī)體的主要能源物質(zhì)，為機(jī)體的脂肪代謝、蛋白質(zhì)代謝、碳水化合物代謝等提供能量[11]。腸道微生物代謝物直接影響小腸功能，也可能影響胃、腦、脂肪組織和肌肉組織。有研究表明脂肪組織是腸道微生物代謝物的富集的靶點(diǎn)，進(jìn)而說明腸道微生物代謝與脂肪沉積有著顯著關(guān)系[7]。

2.3 飼養(yǎng)方式對血脂指標(biāo)的影響

表3 飼養(yǎng)方式對血液中血脂指標(biāo)的影響Table 3 Effects of two different feeding patterns on plasma lipid parameters mmol/L

由表3可知，兩種飼養(yǎng)方式對血液中血脂指標(biāo)有顯著的影響。放牧+舍飼組血液中TC和HDL-C的濃度顯著高于放牧組（P＜0.05），而TG和LDL-C的濃度無顯著差異（P＞0.05）。

血液中TG反映了機(jī)體對脂類的利用情況，TG濃度越低，意味著機(jī)體對脂肪的利用率越高。脂類在體內(nèi)運(yùn)輸發(fā)生障礙時(shí)，血脂濃度會明顯升高。TC濃度對動物肌間脂肪濃度有較大的影響，TC濃度低的個(gè)體其肌間脂肪濃度高而肌間膽固醇濃度低[12]。放牧組血液中TC濃度低于放牧+舍飼組，TG濃度高于放牧+舍飼組，進(jìn)一步說明放牧羊機(jī)體代謝對脂肪的利用率比較低，從而其肌內(nèi)脂肪濃度較高。HDL-C濃度反映了血漿中高密度脂蛋白含量，高密度脂蛋白的主要功能是將肝外組織中過多的膽

固醇轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟代謝，以防止膽固醇在這些組織中過多地聚集。放牧羊血液中HDL-C的濃度低于放牧+舍飼羊，且脂肪細(xì)胞中膽固醇大部分由循環(huán)血液中攝取而來，可推測放牧羊肌肉組織和脂肪組織中膽固醇濃度較少。并且也有研究表明HDL-C與機(jī)體質(zhì)量有密切關(guān)系[13]。

2.4 飼養(yǎng)方式對肌肉中脂肪酸的影響

表4 飼養(yǎng)方式對蘇尼特羊肉中脂肪酸含量的影響Table 4 Effects of two different feeding patterns on fatty acid contents in meat from Sunit sheep%

由表4可知，在兩種飼養(yǎng)方式下蘇尼特羊背最長肌中脂肪酸主要以棕櫚酸、硬脂酸和油酸為主，約占78%，其所占比例依次為油酸＞棕櫚酸＞硬脂酸，這與Atti[14]和Cividini[15]等的研究結(jié)果一致。兩種飼養(yǎng)方式下，飽和脂肪酸（saturated fatty acids，SFA）和單不飽和脂肪酸（monounsaturated fatty acid，MUFA）含量平均值分別為44.4%和41.9%。放牧組中多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，PUFA）的含量顯著高于放牧+舍飼組（P＜0.05），約高2.24%。

兩種飼養(yǎng)方式下，蘇尼特羊背最長肌中SFA主要以棕櫚酸和硬脂酸為主，兩者分別約占總脂肪酸的22.6%和19.5%，差異不顯著（P＞0.05）。放牧組中癸酸的含量顯著低于放牧+舍飼組（P＜0.05），而月桂酸的含量顯著高于放牧+舍飼組（P＜0.05）。兩種飼養(yǎng)方式對肉豆蔻酸含量無顯著影響。

蘇尼特羊背最長肌中MUFA主要包括棕櫚油酸、油酸和反式油酸。由表4可知，兩種飼養(yǎng)方式對油酸和棕櫚油酸的含量沒有顯著影響（P＞0.05）。放牧組反式油酸的含量顯著高于放牧+舍飼組（P＜0.05），這與Wachira[16]和Vasta[17]等的研究結(jié)果相一致，這可能與牧草中PUFA含量較高有關(guān)系。

由表4可知，兩種飼養(yǎng)方式對長鏈脂肪酸的含量有顯著影響。放牧組中α-亞麻酸的含量要顯著高于放牧+舍飼組（P＜0.05）。亞麻酸是長鏈脂肪酸合成的前體物質(zhì)，并且具有較為廣泛的生物學(xué)意義且對人體健康有益[18-19]。有研究表明放牧轉(zhuǎn)變?yōu)樯犸暫髸r(shí)間長短對亞麻酸含量的影響有顯著影響，轉(zhuǎn)變后時(shí)間較短組羊肉中亞麻酸的含量要顯著高于轉(zhuǎn)變后時(shí)間較長組[20]。放牧組中二十碳五烯酸（eicosapntemacnioc acid，EPA）（C20:5）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）（C22:6）所占總脂肪酸的比例顯著高于放牧+舍飼組（P＜0.05），分別為1.05%和0.75%、1.27%和0.93%。EPA和DHA是兩種功能性長鏈脂肪酸，具有抗氧化、抗衰老作用，可用于健腦補(bǔ)腦，提高記憶力及思維能力，對記憶力減退、老年性癡呆有一定療效[21]。兩種飼養(yǎng)方式對亞油酸和反式亞油酸的含量沒有顯著影響（P＞0.05），其同分異構(gòu)體主要包括共軛亞油酸。研究表明共軛亞油酸具有抗動脈粥樣硬化、抗腫瘤等重要的生理功能。放牧組中共軛亞油酸的含量顯著大于放牧+舍飼組，其原因可能是牧草有利于肌內(nèi)脂肪中共軛亞油酸的沉積，這與Urrutia等[22]的研究結(jié)果一致，表明高含量脂肪物質(zhì)（亞麻酸和亞油酸）能極顯著促進(jìn)共軛亞油酸在組織中沉積。

放牧組中背最長肌n-3 PUFA的比例顯著高于放牧+舍飼組（P＜0.05），分別為4.24%和2.63%。兩種飼養(yǎng)模式下羊肉的n-6/n-3比例依次分別為2.14和3.87，差異顯著（P＜0.05）。兩種飼養(yǎng)模式的比值都低與歐美等國家推薦的4∶1。營養(yǎng)專家認(rèn)為合理的n-6/n-3比例有利于降低血壓、抑制不規(guī)律心臟跳動、維持能量平衡、糖代謝和其他慢性疾病的發(fā)生，以及促進(jìn)正常的生長發(fā)育，如何改善飼養(yǎng)模式下羊肉的n-6/n-3比例還需進(jìn)一步的研究[23]。

2.5 腸道菌群及代謝產(chǎn)物與血脂指標(biāo)間相關(guān)性分析

表5 腸道微生物與其代謝物和血脂指標(biāo)相關(guān)性分析Table 5 Correlation coefficients between the abundance of intestinal flora, fecal short chain fatty acids and plasma lipid parameters

由表5可知，通過分析腸道微生物與短鏈脂肪酸濃度的相關(guān)性可知，丙酸濃度與Alistipes豐度（P＜0.05）、纖維桿菌屬豐度（P＜0.01）和瘤胃球菌屬豐度（P＜0.01）間存在顯著正相關(guān)；與擬桿菌屬豐度（P＜0.01）和Phocaeicola豐度（P＜0.05）存在顯著負(fù)相關(guān)?？扇苄陨攀忱w維在結(jié)腸微生物的作用下可產(chǎn)生短鏈脂肪酸，主要包括乙酸、丙酸和丁酸。丙酸在碳水化合物和蛋白質(zhì)代謝過程中扮演著重要的角色，并且有利于維持結(jié)腸的正常功能和腸上皮細(xì)胞的形態(tài)和功能具有重要作用[24]。在本研究中，放牧組中丙酸的含量顯著高于放牧+舍飼組，可推測出牧草的多樣性有利于丙酸在體內(nèi)的沉積，也可能有利于羊肉風(fēng)味物質(zhì)的形成。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)Phocaeicola豐度與異丁酸和異戊酸含量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）。

通過分析血液中血脂指標(biāo)與腸道微生物的關(guān)系可知，TC濃度與擬桿菌屬豐度之間存在顯著正相關(guān)（P＜0.05），與瘤胃球菌屬豐度之間存在顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。哺乳動物細(xì)胞中膽固醇的合成是一個(gè)復(fù)雜的過程，其以乙酰輔酶A為原料，經(jīng)過40余個(gè)細(xì)胞溶質(zhì)和膜結(jié)合酶的催化作用完成。有研究表明腸道中丹毒絲菌科（Erysipelotrichaceae）和毛螺菌科（Lachnospiraceae）細(xì)菌的濃度與動脈粥樣硬化患者血漿中TC和LDL-C的濃度呈正相關(guān)，并通過口服益生菌有利于改善腸道微生物，從而降低血液中TC濃度。其可能存在的潛在機(jī)理是由于NPC1L1蛋白是介導(dǎo)哺乳動物小腸對膳食中膽固醇吸收的關(guān)鍵蛋白質(zhì)，益生菌通過抑制腸道內(nèi)NPC1L1蛋白的表達(dá)，來降低血液中TC和LDL-C的濃度[25-26]。

2.6 長鏈脂肪酸與腸道菌群及代謝物和血液指標(biāo)間相關(guān)性分析

表6 長鏈脂肪酸與腸道微生物及其代謝物和血脂指標(biāo)相關(guān)性分析Table 6 Correlation coefficients between long chain fatty acids of muscle and the abundance of intestinal flora and plasma lipid parameters

如表6所示，通過分析羊肉中長鏈脂肪酸和腸道菌群間相關(guān)性可知，羊肉中共軛亞油酸與含量纖維桿菌屬豐度（P＜0.05）、瘤胃球菌屬豐度（P＜0.001）和Alistipes豐度（P＜0.05）間存在顯著正相關(guān)，與擬桿菌屬豐度存在顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01）。有研究認(rèn)為機(jī)體內(nèi)共軛亞油酸主要通過瘤胃微生物丁弧酸菌對亞油酸的生物轉(zhuǎn)換作用生成，也可能是腸道微生物在動物細(xì)胞內(nèi)起脫氫作用產(chǎn)生[27-28]。反式油酸含量與擬桿菌屬豐度間存在顯著負(fù)相關(guān)，而與Alistipes豐度存在顯著正相關(guān)。其原因可能是由于哺乳動物體內(nèi)無Δ-12-脫氫酶，反式油酸進(jìn)入機(jī)體后，通過瘤胃和腸道微生物異構(gòu)化作用由油酸生成共軛亞油酸[29]。眾所周知，α-亞麻酸是人體必需脂肪酸，是n-3系列PUFA的母體，也是反芻動物瘤胃中脂肪酸代謝主要的氫化底物[30]。羊肉中亞麻酸的含量與纖維桿菌屬、瘤胃球菌屬和Alistipes豐度間存在極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與擬桿菌屬豐度間存在顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。纖維桿菌屬豐度與EPA和DPA含量間存在極顯著正相關(guān)（P＜0.01）。通過分析羊肉中長鏈脂肪酸與腸道微生物代謝物與血液中血脂指標(biāo)濃度的相互關(guān)系可知，亞麻酸含量與乙酸含量、異丁酸含量和異戊酸含量間存在顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），而與丙酸含量呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），還發(fā)現(xiàn)EPA和DHA含量與丙酸含量呈現(xiàn)顯著正相關(guān)（P＜0.05）。飲食與腸道微生物代謝物間有密切聯(lián)系，富含亞麻酸的飲食對動物腸道菌群多樣性有顯著影響，進(jìn)而能夠促進(jìn)動物組織中亞麻酸的沉積。血液中TC濃度與肌肉中亞麻酸和共軛亞油酸含量間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.05），從而說明高含量亞麻酸和共軛亞油酸的飲食有利于降低血液中TC的濃度，對預(yù)防粥樣動脈硬化等疾病有重要意義。綜上所述，亞麻酸代謝與腸道菌群及其代謝物和血液脂質(zhì)代謝有密切的聯(lián)系，如何改善腸道菌群的多樣性，進(jìn)而影響機(jī)體內(nèi)亞麻酸代謝，從而為改善哺乳動物肉和乳中長鏈脂肪酸的沉積，也是未來課題研究的新方向。

3 結(jié) 論

放牧組蘇尼特羊中纖維桿菌屬和瘤胃球菌屬的豐度顯著高于放牧+舍飼組，而擬桿菌屬、Alistipes和Phocaeicola的豐度顯著低于放牧+舍飼組。放牧+舍飼組中乙酸和丁酸的含量顯著高于放牧組，而丙酸的含量顯著低于放牧組。放牧組中TC和HDL-C濃度要低于放牧+舍飼組，TG和LDL-C的含量無顯著影響。兩種飼養(yǎng)方式下，脂肪酸主要以棕櫚酸，硬脂酸和油酸為主。放牧組中α-亞麻酸、EPA、DHA和共軛亞油酸的含量顯著高于放牧+舍飼組，n-3系列的PUFA含量也顯著高于放牧+舍飼組。放牧條件下菌群結(jié)構(gòu)更有利于短鏈脂肪酸的產(chǎn)生，進(jìn)而有利于PUFA沉積，提高了羊肉營養(yǎng)價(jià)值。

丙酸含量與Alistipes、纖維桿菌屬和瘤胃球菌屬豐度存在顯著正相關(guān)，與擬桿菌屬和Phocaeicola豐度存在顯著負(fù)相關(guān)。膽固醇濃度與擬桿菌屬豐度存在顯著正相關(guān)，與瘤胃球菌屬豐度存在顯著負(fù)相關(guān)。蘇尼特羊肉中共軛亞油酸和α-亞麻酸含量與腸道微生物豐度存在顯著的相關(guān)性，與血液中TC濃度存在顯著負(fù)相關(guān)，并且丙酸含量與EPA和DHA含量存在顯著正相關(guān)。因此，如何改善腸道菌群的多樣性，建立腸道菌群與機(jī)體亞麻酸代謝的關(guān)系，有利于羊肉中長鏈脂肪酸的沉積，為改善舍飼羊肉風(fēng)味和營養(yǎng)物質(zhì)提供一種新的思路。