馬天華 遼寧省撫順市新賓滿族自治縣衛(wèi)生監(jiān)督所 （遼寧 撫順 113200）

內(nèi)容提要： 目的：探究在血液檢驗(yàn)中酶標(biāo)儀的具體應(yīng)用。方法：在臨床化學(xué)檢驗(yàn)規(guī)范操作流程的標(biāo)準(zhǔn)上，進(jìn)行相應(yīng)工作程序的設(shè)置，完成采血、檢測(cè)、結(jié)果打印、超微量化學(xué)檢驗(yàn)的全部過程，對(duì)酶標(biāo)儀在血液檢驗(yàn)中的具體應(yīng)用效果進(jìn)行分析。結(jié)果：以艾滋病為例，對(duì)三份血清進(jìn)行批內(nèi)、批間20次的重復(fù)檢測(cè)，酶標(biāo)儀批內(nèi)精密度及批間精密度均顯著高于血液分析儀（P＜0.05）；以艾滋病血清作為試驗(yàn)標(biāo)本，結(jié)果表明，線性范圍臨界值為160卡門單位，當(dāng)艾滋病活性達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)后可通過等滲鹽水將其稀釋，并完成檢測(cè)；在三份已確認(rèn)的艾滋病單位中加入艾滋病，混合后按照艾滋病方法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明酶標(biāo)儀的標(biāo)本平均回收率為98.2%，顯著高于血液分析儀（P＜0.05）；在一份艾滋病血清標(biāo)本進(jìn)行NaOH的添加，濃度為0.4mmol/L，在顯色后的不同時(shí)間進(jìn)行比色，結(jié)果表明，10～90min之間顯色較為穩(wěn)定，顯色10min后比色情況較好。結(jié)論：應(yīng)用酶標(biāo)儀對(duì)艾滋病的血液檢驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，具有準(zhǔn)確、微量、簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、快速等優(yōu)勢(shì)，檢驗(yàn)效果理想、效率高、成本低、消耗少。

臨床上艾滋病是一種較為常見的性病，主要傳播方式為性傳播，如果患者在發(fā)病后不能進(jìn)行及時(shí)有效的治療，就很有可能導(dǎo)致其他疾病的出現(xiàn)，對(duì)患者的生命健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅?，F(xiàn)階段，對(duì)于艾滋病的診斷尚無理想的手段，患者治療效果不佳，且易出現(xiàn)漏診和誤診的情況[1]。隨著相關(guān)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域知識(shí)和技術(shù)的發(fā)展和完善，自動(dòng)生化分析儀成為化學(xué)檢驗(yàn)中的一種新型方式，能夠進(jìn)行化學(xué)檢驗(yàn)的微量快速分析，具有良好的應(yīng)用效果。但是這種檢驗(yàn)方法的設(shè)備要求高，在基層醫(yī)院中難以覆蓋[2]。近幾年來，血液檢驗(yàn)中開始出現(xiàn)酶標(biāo)儀的應(yīng)用，該法具有準(zhǔn)確、微量、簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、快速等優(yōu)勢(shì)，本研究探究在血液檢驗(yàn)中酶標(biāo)儀的具體應(yīng)用，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 儀器

234 系列UBA微量加樣器、0.2mL聚苯乙烯離心管和酶標(biāo)板、SLT400SF酶標(biāo)儀、RA-XT全自動(dòng)生化分析儀、DG-3022A型酶標(biāo)儀、edp-2自動(dòng)加樣器。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)前準(zhǔn)備。按照相關(guān)要求對(duì)SLT400SF酶標(biāo)儀進(jìn)行程序的編制，根據(jù)程序分為測(cè)定值和吸光度值進(jìn)行打印。另外，校準(zhǔn)波長(zhǎng)的測(cè)定利用DG-3022A型酶標(biāo)儀進(jìn)行，完成比色測(cè)定。在酶標(biāo)儀中添加空白試劑并進(jìn)行比色，將每個(gè)孔的吸光度值進(jìn)行打印。完成234系列UBA微量加樣器以及edp-2自動(dòng)加樣器的校準(zhǔn)調(diào)整，使二者的準(zhǔn)確度誤差在±1%之間，且變異系數(shù)（CV）低于1%。

1.2.2 采血方法。試驗(yàn)所需血量較少，可以在末梢部位，例如耳垂、手指等部位，利用常規(guī)方法進(jìn)行刺血采血。將刺血所出血量使用微量吸管吸住后注入小離心管中，血量為0.2mL。血液凝固后則可進(jìn)行離心，速度為3000rpm，時(shí)間為5min。96孔酶標(biāo)板中，將A3、A4當(dāng)作標(biāo)準(zhǔn)孔，A1、A2當(dāng)作空白對(duì)照組，除標(biāo)準(zhǔn)孔為雙孔外，剩余都是測(cè)量孔，測(cè)量總量設(shè)置為300μl。相關(guān)操作步驟需按照試劑盒和儀器的標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)應(yīng)用SPSS18.0，計(jì)量資料應(yīng)用t檢測(cè)（±s），計(jì)數(shù)應(yīng)用χ2（%），以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1. 兩種方法精密度的比較(%)

2.結(jié)果

2.1 兩種方法精密度的比較

為使血液檢測(cè)儀器進(jìn)行更有針對(duì)性的測(cè)定，實(shí)驗(yàn)中以艾滋病為例，對(duì)三份血清進(jìn)行批內(nèi)、批間20次的重復(fù)檢測(cè)，酶標(biāo)儀批內(nèi)精密度及批間精密度均顯著高于血液分析儀（P＜0.05），見表1。

2.2 線性范圍

以艾滋病血清作為試驗(yàn)標(biāo)本，結(jié)果表明，線性范圍臨界值為160卡門單位，當(dāng)艾滋病活性達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)后可通過等滲鹽水將其稀釋，并完成檢測(cè)。

2.3 兩種檢測(cè)方法標(biāo)本回收率的比較

混合后按照艾滋病方法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明酶標(biāo)儀的標(biāo)本平均回收率為98.2%，顯著高于血液分析儀（P＜0.05），見表2。

2.4 穩(wěn)定性

在一份艾滋病血清標(biāo)本進(jìn)行NaOH的添加，濃度為0.4mmol/L，在顯色后的不同時(shí)間進(jìn)行比色，結(jié)果表明，10～90min之間顯色較為穩(wěn)定，顯色10min后比色情況較好。

3.討論

20世紀(jì)70年代初，在酶聯(lián)免疫組織化學(xué)的基礎(chǔ)上，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)出現(xiàn)并得到發(fā)展，逐漸成為國(guó)內(nèi)外血站試驗(yàn)中的首要檢查方式，一般情況下，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)都需要使用到比色測(cè)定，所以酶標(biāo)儀在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中的作用十分重要[3]。本研究按照酶標(biāo)儀的儀器軟件和嚴(yán)密的比色系統(tǒng)，簡(jiǎn)單進(jìn)行相應(yīng)附件的配置，并按照全國(guó)臨床檢驗(yàn)的操作標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)檢驗(yàn)項(xiàng)目程序，完成了采血、檢測(cè)、結(jié)果打印、超微量化學(xué)檢驗(yàn)的全部過程。本研究中，為使血液檢測(cè)儀器進(jìn)行更有針對(duì)性的測(cè)定，實(shí)驗(yàn)中以艾滋病為例，對(duì)三分血清進(jìn)行批內(nèi)、批間20次的重復(fù)檢測(cè)，酶標(biāo)儀批內(nèi)精密度及批間精密度均顯著高于血液分析儀（P＜0.05），說明酶標(biāo)儀具有更高的檢測(cè)精密度，有效提高了血液檢驗(yàn)的效果。

表2. 兩種檢測(cè)方法標(biāo)本回收率的比較(%)

臨床上，艾滋病篩查的一種主要方式即為酶標(biāo)儀檢測(cè)，該法在艾滋病的篩查和診斷中起到了十分重要的作用，對(duì)于患者的治療也有一定的積極意義。酶標(biāo)儀檢測(cè)法的光學(xué)系統(tǒng)和軟件功能都較為精密，其中軟件功能可以對(duì)檢驗(yàn)程序的整機(jī)測(cè)量的處理進(jìn)行控制，同時(shí)可以打印或是顯示檢測(cè)結(jié)果[4]；光學(xué)系統(tǒng)的原理是在朗博-比爾定律的基礎(chǔ)上發(fā)展而得出的，能在高精密度、高檢測(cè)速度的基礎(chǔ)上完成批量檢測(cè)。另外，酶標(biāo)儀檢測(cè)可以將酶標(biāo)儀進(jìn)行一體多用，不但能夠進(jìn)行免疫學(xué)試驗(yàn)，還能夠進(jìn)行多種臨床化學(xué)檢測(cè)，具有采血微量、檢測(cè)穩(wěn)定、試劑節(jié)約等明顯的優(yōu)勢(shì)。

綜上所述，應(yīng)用酶標(biāo)儀對(duì)艾滋病的血液檢驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，具有準(zhǔn)確、微量、簡(jiǎn)便、穩(wěn)定、快速等優(yōu)勢(shì)，檢驗(yàn)效果理想、效率高、成本低、消耗少。