田小鵬

摘要：文章分析了進(jìn)行動(dòng)物疫病診斷與檢測的必要性，以及出現(xiàn)動(dòng)物疫病時(shí)的檢測方案的設(shè)計(jì)分析，并根據(jù)當(dāng)今的科技手段，提出動(dòng)物疫病檢測方案和檢測技術(shù)的綜合運(yùn)用途徑。

關(guān)鍵詞：動(dòng)物疫??；檢測方案；檢測技術(shù)

1引言

畜牧業(yè)是我國國民經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要產(chǎn)業(yè)之一，而動(dòng)物疫病是影響畜牧業(yè)安全生產(chǎn)的關(guān)鍵，也是影響食品質(zhì)量與安全的重要因素。因此，在進(jìn)行畜牧業(yè)養(yǎng)殖過程中，要重視對(duì)動(dòng)物疫病的診斷和檢測，注意對(duì)疫病的防控。

2動(dòng)物疫病診斷與檢測的必要性分析

動(dòng)物疫病的發(fā)生不僅影響到動(dòng)物的健康生長，也會(huì)影響到動(dòng)物產(chǎn)品的質(zhì)量，而且有的動(dòng)物疫病甚至?xí)魅镜饺耍o人類健康帶來嚴(yán)重威脅，比如禽流感。因此，加強(qiáng)動(dòng)物疫病的診斷和檢測工作，是動(dòng)物行業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ)性工作之一，在及時(shí)發(fā)現(xiàn)動(dòng)物疫病，及時(shí)預(yù)防和治療，保證動(dòng)物健康和動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量方面具有重要意義。動(dòng)物疫病的診斷和檢測工作也是評(píng)價(jià)國家動(dòng)物防疫工作水平的重要標(biāo)志。加強(qiáng)對(duì)于動(dòng)物疫病的診斷和檢測，是實(shí)現(xiàn)疫病預(yù)防，降低動(dòng)物死亡率和發(fā)病率的基礎(chǔ)，也是提高我國動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量，以滿足國際市場需求的基礎(chǔ)。

3動(dòng)物疫病檢測方案設(shè)計(jì)分析

動(dòng)物疫病檢測是在疫病發(fā)生使其，對(duì)疫病開始到結(jié)束期間的發(fā)生、發(fā)展、流行、分布等進(jìn)行調(diào)查和分析，并利用相關(guān)技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)患病畜禽樣本進(jìn)行檢查和診斷，以掌握該種疫病的類型、發(fā)展和流行病學(xué)特征的工作，可以為制定防疫政策提供指導(dǎo)依據(jù)。

3.1確定檢測的性質(zhì)和目的

進(jìn)行動(dòng)物疫病檢測方案的設(shè)計(jì)，首先要確定的就是檢測的性質(zhì)和目的。前者是確定對(duì)動(dòng)物實(shí)行感染檢測（對(duì)動(dòng)物攜帶或已經(jīng)感染的病原體進(jìn)行確診和調(diào)查）還是健康檢測（對(duì)動(dòng)物免疫抗體的檢測，確定抗感染保護(hù)狀態(tài)）；后者有兩種區(qū)別，一是根據(jù)臨床癥狀和流行病學(xué)特點(diǎn)能夠基本確定動(dòng)物疫病的種類以及檢測方法；二是不確定檢測疫病的種類，需要進(jìn)一步進(jìn)行檢查或排除后確診。

3.2確定流行病學(xué)調(diào)查的內(nèi)容

對(duì)于動(dòng)物疫病的流行病學(xué)調(diào)查主要包括轄區(qū)動(dòng)物產(chǎn)業(yè)發(fā)展情況，有沒有疫病的發(fā)生，疫病發(fā)生出現(xiàn)的死亡情況，患病畜禽的臨床癥狀，有沒有流行性，以及流行的地區(qū)性、季節(jié)性、易感群體等內(nèi)容。

3.3樣品采集和處理

對(duì)于動(dòng)物疫病來說，可供采集的樣品種類很多，比如血液、乳汁、皮膚、毛發(fā)、器官和組織切片等，而且根據(jù)檢測對(duì)象的不同以及項(xiàng)目的不同，不同樣品的采集時(shí)間也不同，比如血液要根據(jù)是否凝集在動(dòng)物剛死亡或未死亡時(shí)進(jìn)行采集；樣本采集要按照規(guī)定采集足夠數(shù)量的樣品，但不要太多，留有重復(fù)檢測的余地；不同疫病類型需要采集的樣品種類不同，實(shí)際中需要按照已基本確定或側(cè)重的疫病進(jìn)行采樣，不好確定的要全部采集；要選擇沒有進(jìn)行過藥物治療、臨床癥狀最典型、病理變化最明顯的動(dòng)物進(jìn)行采樣，如果出現(xiàn)并發(fā)癥，也要考慮并發(fā)癥的采樣；需要進(jìn)行病原學(xué)檢測的樣品，要特別注意適時(shí)無菌采樣；采樣人要注意自我保護(hù)，而且在防止病原外泄的同時(shí)也要防止樣品受到污染。

樣品的處理是按照檢測方法的需求、樣品的種類和性狀以及檢測目的等，選擇不同的處理方式，一般都是密封前處理、冷藏、冷凍等，目的是為了保證樣品的新鮮性和有效性，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。樣品處理時(shí)按照需要對(duì)樣品進(jìn)行包裝，主要是封閉包裝，避免樣品泄露和受到污染。樣品處理好后根據(jù)要求送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測，有的是采集后立刻檢測，有的則需要放置一段時(shí)間，但要保證在規(guī)定時(shí)間內(nèi)送檢，以免影響樣品檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3.4確定檢測技術(shù)和方法

檢測技術(shù)和方法的確定主要是根據(jù)動(dòng)物表現(xiàn)出的臨床癥狀和基礎(chǔ)的解剖學(xué)病理變化，對(duì)可能發(fā)生的疫病種類有個(gè)基本的判斷后，確定需要檢測的病種和方法，從而進(jìn)行疫病確診。想要對(duì)每一種動(dòng)物疫病都做出正確的診斷，科學(xué)合理的檢測技術(shù)和方法是基礎(chǔ)。要按照國家或動(dòng)物行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)確定技術(shù)方法、行業(yè)主管部門規(guī)定的技術(shù)方法、國際上通用的技術(shù)方法、確定可靠并獲得認(rèn)可的新出現(xiàn)的技術(shù)方法以及研發(fā)有標(biāo)準(zhǔn)或合格的診斷試劑，可直接用于檢測。

除此之外，還要保證檢測環(huán)境和條件，一般是在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測，要有專業(yè)的有資質(zhì)的檢測技術(shù)人員、符合檢測要求和需求的設(shè)備，合格的實(shí)驗(yàn)室設(shè)施（尤其是無菌檢測設(shè)施），以及具有符合要求的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外環(huán)境條件。

4動(dòng)物疫病的檢測方案與檢測技術(shù)的綜合運(yùn)用

4.1組織病理學(xué)檢測

檢測方案主要是借助病理學(xué)知識(shí)將采集的病變組織樣本制作成切片，進(jìn)行免疫組織染色，在進(jìn)行顯微鏡觀察，通過對(duì)病變組織的觀察，確定動(dòng)物疫病的病原。該種檢測方案運(yùn)用了兩種檢測技術(shù)，病理學(xué)檢測技術(shù)和免疫病理學(xué)檢測技術(shù)。病理學(xué)檢測技術(shù)是通過對(duì)動(dòng)物出現(xiàn)的病變特征和病理變化的分析，對(duì)動(dòng)物疫病進(jìn)行診斷。免疫病理學(xué)檢測技術(shù)的主要原理是免疫學(xué)的抗原和抗體反應(yīng)，利用標(biāo)記過的抗原或抗體對(duì)病變動(dòng)物的細(xì)胞和組織內(nèi)的相應(yīng)抗體或抗原進(jìn)行的定性、定量或定位檢測，經(jīng)過組織學(xué)的顯色反應(yīng)之后（即我們常用的革蘭氏染色等染色手段），利用顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡等進(jìn)行觀察，確定疫病種類。

4.2血清學(xué)檢測

主要是借助免疫學(xué)的抗原抗體反應(yīng)，對(duì)收集到的動(dòng)物疫病血清進(jìn)行檢測、流行病學(xué)檢查以及免疫抗體檢測。抗原抗體特異性反應(yīng)包括凝集性反應(yīng)、標(biāo)記抗體技術(shù)、補(bǔ)體參與的反應(yīng)、中和試驗(yàn)等。比如應(yīng)用廣泛的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。ELISA是將抗原或抗體吸附在載體上，進(jìn)行免疫酶反應(yīng)，底物顯色之后利用肉眼或分光光度計(jì)判斷結(jié)果，分為間接法、夾心法、競爭法和捕獲包被法，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、簡便快捷、重復(fù)性強(qiáng)、安全等特點(diǎn)，適用于大批量的標(biāo)準(zhǔn)化檢測。

4.3病原學(xué)檢測

主要是借助微生物學(xué)和細(xì)胞學(xué)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)采集樣品的病原微生物的分離、純化、培養(yǎng)和鑒定。包括細(xì)菌、細(xì)胞、病毒的分離和培養(yǎng)以及鑒定，還有寄生蟲的檢測。細(xì)菌的分離培養(yǎng)主要是依靠接種方法，借助各種培養(yǎng)基和不同的培養(yǎng)條件，實(shí)現(xiàn)對(duì)大部分細(xì)菌的分離、培養(yǎng)，細(xì)菌的鑒定包括形態(tài)學(xué)鑒定、生化鑒定、血清型鑒定。病毒的分離培養(yǎng)要嚴(yán)格按照時(shí)間規(guī)定進(jìn)行，采取低溫保存；濃度高的可直接鑒定，濃度低的需要進(jìn)行分離和培養(yǎng)，接種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物或組織細(xì)胞中進(jìn)行試驗(yàn)，提高鑒定的可靠性。寄生蟲檢測包括對(duì)蟲卵、蟲體的檢測，還可以使用免疫學(xué)檢測和分子生物學(xué)檢測。

4.4分子生物學(xué)檢測

主要是利用分子生物學(xué)技術(shù)，對(duì)采集到的樣本進(jìn)行基因檢測，對(duì)于動(dòng)物疫病的特異性檢測和病原基因的變異與進(jìn)化等具有良好效果。分子生物學(xué)檢測主要有核酸探針技術(shù)、基因序列分析以及聚合酶鏈反應(yīng)等（PCR）。PCR是應(yīng)用最廣泛的分子生物學(xué)檢測技術(shù)，可以從微量生物材料中快速擴(kuò)增獲得大量特定的核酸，進(jìn)行檢測，適用于微量樣品的檢測，具有簡便快捷、靈敏、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。PCR技術(shù)可用于對(duì)疫病的早期診斷、對(duì)不完全病原的檢測、進(jìn)行病原體的分類和鑒別等，十分快速和準(zhǔn)確。

5結(jié)語

動(dòng)物疫病的診斷和檢測是關(guān)系到國家動(dòng)物防疫水平，降低動(dòng)物發(fā)病率和死亡率，保證動(dòng)物產(chǎn)品食品安全的重要工作。進(jìn)行動(dòng)物疫病的診斷要先進(jìn)行檢測方案的設(shè)計(jì)，選擇合適的檢測方案和檢測方法、檢測技術(shù)，在規(guī)定的時(shí)間對(duì)規(guī)定的樣品進(jìn)行檢測，可以提高檢測準(zhǔn)確率，保證動(dòng)物疫病的確診，從而為做出疫病防控決策提供依據(jù)。

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