廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023

中藥十八反中認(rèn)為烏頭反瓜蔞，兩藥合用一直被視為配伍禁忌，現(xiàn)行藥典中也有記載。附子瓜蔞配伍方劑的主治癥狀為疲乏、畏寒、腹冷等陽虛癥狀；附子瓜蔞配伍方劑的病機為陽氣虛弱，痰濕阻滯。方劑主治以氣血津液病及肛腸病癥為主。在十八反中“半蔞貝蘞及攻烏”中，烏頭與瓜蔞配伍是藥對組合最多的一組。目前，有關(guān)附子與天花粉配伍毒理學(xué)研究較少，本實驗觀察了小鼠亞急性毒性，以評價其安全性，為其臨床應(yīng)用提供一定的毒理學(xué)依據(jù)[1-2]。

1 材料與方法[3-6]

1.1 動物 雄性昆明種小鼠(SPF級)，100只，體重18～22 g，購于廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心(動物許可證號SCXK(桂)2014-0002)。

1.2 藥物 附子、天花粉均購于四川康美藥業(yè)有限公司，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)中藥調(diào)研室陳勇教授鑒定為毛茛科植物烏頭子根的加工品(附子)和葫蘆科植物栝蔞的根(天花粉)。

1.3 藥物供試液制備

1.3.1 附子與天花粉合煎液 稱取附子3000 g，天花粉750 g，共4組。分開浸泡30 min，加入10倍量水，將附子分別先煎2 h(第1組)、1 h(第2組)、30 min(第3組)和0 min(第4組)，后加入浸泡過的天花粉一煎50 min，過濾藥液，藥渣再加入8倍量的水二煎30 min，合并兩次濾液，濃縮成2000 mL膏液。

1.3.2 附子單煎液 稱取附子3000 g，共4組。浸泡30 min，加入10倍量水將附子分別先煎170 min(第5組)、110 min(第6組)、80 min(第7組)和0 min(第8組)，過濾藥液，藥渣再加入8倍量的水二煎30 min，合并兩次濾液，濃縮成2000 mL膏液。

1.3.3 天花粉單煎液(第9組) 稱取天花粉750 g，浸泡30 min，加入10倍量水天花粉一煎50 min，藥渣再加入8倍量的水二煎30 min，合并兩次濾液，濃縮成500 mL。

1.4 小鼠亞急性毒性實驗 將100只小鼠隨機分成10組，每組10只，1～9組(合煎2 h、1 h、30 min和0 min為1～4組，單煎170 min，110 min、80 min和0 min為5～8組，天花粉單煎為第9組)均給予相對應(yīng)的藥物灌胃，劑量均為0.4 mL/10 g；正常照組以生理鹽水灌胃，連續(xù)給藥15 d，測定小鼠體重變化，并進(jìn)行臟器系數(shù)測定。臟器系數(shù)=(臟器質(zhì)量/動物體質(zhì)量)×100%。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 20.0軟件處理實驗數(shù)據(jù)，組間比較采用方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般癥狀 灌胃給藥后，各給藥組鼠活動量減少，攝食、飲水減少，大便溏泄，生長發(fā)育緩慢，而且第2、4、6、7、8給藥組均有小鼠死亡，給藥組各組與對照組比體重減少具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2 各組小鼠臟器系數(shù)的變化 給藥組各組的心、肝、脾、肺的臟器指數(shù)與對照組比無差異統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，第8組給藥組腎器系數(shù)與對照組比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 各組小鼠的體重變化 (g,±s)

注：與對照組比較，*P<0.05。

表2 各組小鼠的臟器系數(shù) (%,±s)

注：與對照組比較，*P<0.05。

3 討論

小鼠亞急性實驗研究表明，給藥組各組與對照組比體重增重差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，給藥組各組的心、肝、脾、肺的臟器指數(shù)與對照組比無差異統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，表明附子與天花粉配伍并未增加其相對的毒性，與中藥傳統(tǒng)的“十八反、十九畏”的結(jié)論并不一致；觀察第8組單煎給藥組臟器系數(shù)對照組比具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，而對應(yīng)的合煎組與空白對照組比較并無統(tǒng)計學(xué)意義，反而說明附子與天花粉配伍其毒性較附子單煎還有所減小，但其具體的臨床應(yīng)用及實驗藥理依據(jù)還有待于進(jìn)一步的實驗研究。