王 瑛

（哈爾濱醫(yī)科大學附屬第四醫(yī)院靜脈藥物調(diào)配中心，黑龍江哈爾濱 150001）

山楂葉為薔薇科植物山里紅（Crataegus pinnatifida Bge. var.major N. E. B r.） 或山楂（C. pinnatifida Bge.）的干燥葉[1-2]。山楂葉味酸、性平， 歸肝經(jīng)， 具有活血化瘀、理氣通絡的作用。我國山楂葉資源豐富，價廉易得，而山楂葉總黃酮為山楂葉提取物中的主要成分。目前對山楂葉的現(xiàn)代藥理研究主要集中在心腦血管、降脂、降糖、降壓和抗氧化等方面[3]。有資料表明，山楂葉的主要成分黃酮類物質(zhì)具有一定的抗抑郁作用[4]。本研究旨在明確山楂葉的抗抑郁作用，為臨床研究提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 實驗藥物

主要藥品包括山楂葉提取物粉末（晉城中晉藥業(yè)有限公司生產(chǎn)） ，百合皂苷（黑龍江中醫(yī)藥大學自制，純度為70%），氟西汀（常州四藥制藥有限公司）。

1.2 實驗動物

健康昆明種小鼠，雄性，體質(zhì)量18～21 g，2月齡，由黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供。飼養(yǎng)環(huán)境：室溫18～22℃，相對濕度40%～55%。

1.3 試劑

蒸餾水、生理鹽水于購哈爾濱三聯(lián)藥業(yè)有限公司。

1.4 實驗儀器

主要儀器包括電子天平（沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司）；MC-3型數(shù)字式溫度體溫計[歐姆龍（中國）有限公司 ]；1/100 s秒表秒表。

1.5 實驗方法

（1）動物分組和給藥。昆明種小白鼠適應性飼養(yǎng)1周，隨機分為6組，分別為山楂葉提取物高劑量組（1 g/kg）、中 劑 量 組（0.5 g/kg）、低 劑 量 組（0.25 g/kg）、氟 西 汀 組（0.004 g/kg）、百合皂苷組（0.05 g/kg）和空白對照組（給等體積的生理鹽水）。灌胃給藥1次/d，連續(xù)7 d。

（2）懸尾實驗。末次給藥1 h后將每組小鼠尾部距末端2 cm處用膠帶條固定懸掛于鐵架臺上，距離桌面15 cm，適應2 min后計算4 min內(nèi)小鼠懸尾累計不動時間（小鼠表現(xiàn)被動懸掛，肢體運動消失時被認定為不動狀態(tài)）。

（3）強迫游泳實驗。小鼠末次給藥1 h后先訓練游泳5 min，1 d后將小鼠放入水深10 cm、直徑20 cm 的玻璃缸內(nèi)，水溫保持在25℃，先預適應2 min，然后記錄小鼠4 min內(nèi)不動時間（小鼠表現(xiàn)被動漂浮，掙扎行為消失持續(xù)1 min被認定為不動狀態(tài)）。

（4） 拮抗利血平降低小鼠體溫實驗。將體溫計探頭輕插入小鼠肛門內(nèi) 1～2 cm，當溫度顯示穩(wěn)定后讀數(shù)，為基礎體溫。然后給藥，1 h后腹腔注射利血平 2.5 mg/kg，4 h后測定肛溫，以體溫降低值作為指標。

1.6 統(tǒng)計學分析

采用 SPSS 17.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，多組間單因素比較先用單因素分析其正態(tài)分布，后以LSD 法進行統(tǒng)計。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 山楂葉提取物對小鼠懸尾不動時間的影響

各組小鼠與空白對照組比較，山楂葉提取物高、中、低劑量組、百合皂苷組和氟西汀組小鼠懸尾不動時間均明顯縮短，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05或P＜0.01），見表1。

表1 山楂葉提取物對小鼠懸尾不動時間的影響（±s）

表1 山楂葉提取物對小鼠懸尾不動時間的影響（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 劑量（g/kg） 4 min累計不動時間（s）山楂葉提取物高劑量組 10 1 74.28±6.22*山楂葉提取物中劑量組 10 0.5 70.13±7.25*山楂葉提取物低劑量組 10 0.25 85.17±8.45*百合皂苷組 10 0.05 77.08±6.93*氟西汀組 10 0.004 48.35±5.47**空白對照組 10 等容積 102.69±8.36

2.2 山楂葉提取物對小鼠強迫游泳不動時間的影響

各組小鼠與空白對照組比較，山楂葉提取物高、中、低劑量組、百合皂苷組和氟西汀組小鼠強迫游泳不動時間均明顯縮短，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05或P ＜ 0.01），見表 2。

表2 山楂葉提取物對小鼠強迫游泳不動時間的影響（±s）

表2 山楂葉提取物對小鼠強迫游泳不動時間的影響（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 劑量（g/kg） 4min累計不動時間（s）山楂葉提取物高劑量組 10 1 66.38±5.37*山楂葉提取物中劑量組 10 0.5 59.24±5.67*山楂葉提取物低劑量組 10 0.25 68.90±7.19*百合皂苷組 10 0.05 69.14±3.98*氟西汀組 10 0.004 47.75±4.79**空白對照組 10 等容積 98.29±6.20

2.3 山楂葉提取物對拮抗利血平降低小鼠體溫的影響

腹腔注射利血平1 h后各組小鼠體溫無明顯變化，組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；腹腔注射利血平4 h后，各組小鼠與空白對照組比較，山楂葉提取物中、低劑量組、百合皂苷組合氟西汀組小鼠體溫變化明顯減小，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

3 討論與結(jié)論

抑郁癥是以顯著而持久的心情低落為主要特征，是心境障礙的主要類型，是近年來嚴重危害人類身心健康的精神類疾病之一[5]。氟西汀、帕羅西汀、舍曲林等西藥的抗抑郁作用主要與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)，且副作用明顯。今年來，植物抗抑郁藥的研究也有了一定的發(fā)展。山楂葉是一種常用天然藥用植物，其野生資源非常豐富，目前臨床上多用于心血管疾病，有資料表明，山楂葉的主要成分黃酮類物質(zhì)具有一定的抗抑郁作用[6]。動物模型懸尾試驗與強迫游泳是臨床評估應用藥物抗抑郁效果的一種模型，將動物模型放置在有限空間內(nèi)對其進行懸尾或使之進行游泳，會發(fā)現(xiàn)動物會拼命逃脫，但一段時間后動物會停止掙扎放棄逃脫，是一種絕望表現(xiàn)。本文作者制作小鼠動物模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各給藥組小鼠與空白對照組相比，小鼠懸尾不動時間和小鼠強迫游泳不動時間均縮短，初步證實山楂葉提取物具有一定抗抑郁效應。目前臨床普遍認為抑郁癥的發(fā)病機制與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量下降或單胺類受體功能減弱密切相關(guān)。利血平可以通過阻礙神經(jīng)末梢內(nèi)囊泡對神經(jīng)遞質(zhì)的攝取，使中樞5-羥色胺與去甲腎上腺素等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)耗竭，引起運動不能或者體溫降低等行為以及生理上改變[7-8]。本文作者制作小鼠動物模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各給藥組小鼠與空白對照組相比，體溫變化有所減小。提示山楂葉提取物可以拮抗利血平所致的體溫下降情況，與抗抑郁機制有著一定聯(lián)系，然而其抗抑郁的作用機制仍需我們進一步探討。

表3 山楂葉提取物對拮抗利血平降低小鼠體溫的影響（±s）

表3 山楂葉提取物對拮抗利血平降低小鼠體溫的影響（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 n 劑量（g/kg） 1 h體溫降低值（℃） 4 h體溫降低值（℃）山楂葉提取物高劑量組 10 1 1.38±0.53 5.14±0.07山楂葉提取物中劑量組 10 0.5 -0.09±0.04 4.07±0.13*山楂葉提取物低劑量組 10 0.25 1.14±0.09 3.55±1.21*百合皂苷組 10 0.05 1.20±0.11 3.94±0.09*氟西汀組 10 0.004 -0.07±0.02 3.21±0.04*空白對照組 10 等容積 0.22±0.08 5.68±1.27