王孟迪 姚勤偉 薛濤 劉新民 梁娟娟 秦文杰 葉祖光 王瓊

〔摘要〕 目的 比較3個(gè)中藥處方的抗抑郁作用，篩選出抗抑郁效果最好的處方。方法 ICR雄性小鼠（130只）隨機(jī)分為對(duì)照組，模型組，阿米替林組，帕羅西汀組，處方一高、中、低濃度組，處方二高、中、低濃度組，處方三高、中、低濃度組，每組10只。通過(guò)采用小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)以及建立小鼠利血平拮抗模型，檢測(cè)其眼瞼下垂度、體溫和自主活動(dòng)能力，以此檢測(cè)小鼠的抑郁樣行為。結(jié)果 預(yù)防性給藥7 d后，與對(duì)照組相比，陽(yáng)性藥及3個(gè)處方均能不同程度縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間（P<0.05，P<0.01）;阿米替林、處方二能顯著縮短強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（P<0.05），增加游泳距離（P<0.01），但處方一和三無(wú)效。預(yù)防給藥14 d后，與對(duì)照組相比，各陽(yáng)性藥與3個(gè)處方均能顯著縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間（P<0.05，P<0.01）;同時(shí)，各陽(yáng)性藥與處方一和處方二能明顯縮短小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（P<0.05，P<0.01），增加小鼠游泳距離（P<0.05），但處方三無(wú)效。在利血平拮抗實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，模型組運(yùn)動(dòng)時(shí)間明顯減少（P<0.01），體溫出現(xiàn)明顯下降（P<0.01），小鼠眼瞼下垂度明顯增加（P<0.01）;與模型組相比，阿米替林、帕羅西汀以及3個(gè)處方均能不同程度逆轉(zhuǎn)利血平所致小鼠運(yùn)動(dòng)不能（P<0.05），體溫下降（P<0.05，P<0.01），眼瞼下垂（P<0.05，P<0.01）的現(xiàn)象。結(jié)論 3個(gè)中藥方均具有一定的抗抑郁作用，其中處方二的藥理作用更廣，抗抑郁作用效果更好，表現(xiàn)為起效時(shí)間短、藥效強(qiáng)。

〔關(guān)鍵詞〕 抑郁癥;中藥方;懸尾;強(qiáng)迫游泳;利血平

〔中圖分類號(hào)〕R285.5? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ?〔文章編號(hào)〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.09.003

The Comparison of Three Traditional Chinese Medicine Formulas on Their Antidepressant Efficacy

WANG Mengdi1， YAO Qinwei2， XUE Tao1， LIU Xinmin1，3， LIANG Juanjuan4， QIN Wenjie4， YE Zuguang5*， WANG Qiong1，6*

（1. Affiliated TCM Hospital， Sino-Portugal TCM International Cooperation Center/School of Pharmacy， Southwest Medical University， Luzhou， Sichuan 646000， China; 2. Department of Critical Care Medicine of Liver Diseases， Beijing You'An

Hospital， Capital Medical University， Beijing 100069， China; 3. Institute of Medicinal Plant Development， Chinese

Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College， Beijing 100193， China; 4. Zhendong Pharmaceutical

Research Institute， Beijing 100088， China; 5. Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical

Sciences， Beijing 100700， China; 6. Institute of Food Science and Technology CAAS， Beijing 100193， China）

〔Abstract〕 Objective To compare the effects of three traditional Chinese medicine （TCM） formulas on their antidepressent efficacy and to screen out the prescription with the best antidepressant effect. Methods 130 ICR male mice were randomly divided into 13 groups， including the control group， the model group， the amitriptyline group， the paroxetine group， the first formula groups （high， medium and low dosages）， the second formula groups （high， medium and low dosages）， the third formula groups （high， medium and low dosages）. 10 mice in each group. Tail suspension test， forced swimming test and reserpine induced depression mice model were used. The degree of eyelid ptosis， body temperature and autonomous activity were measured to test the depressive-like behavior in mice. Results Prophylaxis and treatment of TCM formulas for 7 days， compared with the control group， the positive medicine and the three formulas significantly shorten the immobility time in the tail suspension test in mice （P<0.05， P<0.01）; amitriptyline and the second formula significantly shorten the immobility time of forced swimming （P<0.05） and increased swimming distanse （P<0.01）. The first formula and third formula had no effect in the forced swimming test in mice. Prophylaxis and treatment of TCM formulas for 14 days， compared with the control group， the positive medicines and the three formulas significantly shorten the immobility time in the tail suspension test （P<0.05， P<0.01）. At the same time， positive medicines and the first and the second formulas significantly shorten the immobility time of forced swimming （P<0.05， P<0.01） and increased swimming distanse （P<0.05）， but the third formula had no effect in the forced swimming test in mice. In the reserpine antagonistic experiment， compared with the control group， the movement time of the model group was significantly reduced （P<0.01）， the body temperature was significantly decreased （P<0.01）， and the ptosis degree of the mouse eyelid was significantly increased （P<0.01）. Compared with the model group， amitriptyline， paroxetine and three prescriptions could reverse the locomotor failure （P<0.05）， body temperature decreased （P<0.05， P<0.01）， eyelid ptosis （P<0.05， P<0.01） induced by reserpine to varying degrees. Conclusion Three TCM formulas have effects on antidepression， but the second formula is the best one which has fast and strong effects on antidepression compared to the other two formulas.

〔Keywords〕 depression; traditional Chinese medicine formula; tail suspension; forced swimming test; reserpine

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展和生活節(jié)奏加快，人們的心理壓力也普遍增加，越來(lái)越多的人易患精神障礙疾病[1]。抑郁癥被認(rèn)為是一種常見(jiàn)的、復(fù)發(fā)性和失能性嚴(yán)重的精神疾病，這種情感障礙性疾病，多伴有不同程度的焦慮、自罪自責(zé)等心理癥狀和睡眠障礙、食欲紊亂、社交恐懼等癥狀，嚴(yán)重者有較高的自殺性傾向[2]。根據(jù)已有的調(diào)查結(jié)果，世界精神病理學(xué)估計(jì)，抑郁癥的患病率約占全球人口的8.3%，已上升為世界第二大疾病，且其發(fā)病率正呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)[3]。對(duì)本病的治療，目前常用的抗抑郁藥主要分為以下幾類，即單胺氧化酶抑制類藥物（MAOIs）、三環(huán)和四環(huán)類類藥物（TCAs）、選擇性5-HT再攝取抑制（SSRIs）、NE、5-HT雙重再攝取抑制劑（SNRIs）等[4]。雖在不同程度上可緩解癥狀，但這些藥物仍存在許多不良反應(yīng)。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者將目光逐漸轉(zhuǎn)移到天然中草藥及其提取物上，關(guān)于中藥抗抑郁作用的基礎(chǔ)研究、文獻(xiàn)報(bào)道和專利發(fā)明都在逐漸增多[5]。

近年來(lái)，中藥治療抑郁癥因其具有療效可靠、作用溫和等特點(diǎn)，逐漸受到國(guó)際社會(huì)的認(rèn)可[6]，為研發(fā)新藥物、協(xié)助傳統(tǒng)急性抗抑郁藥和預(yù)防抑郁癥提供重要的資源[7]。本研究根據(jù)抑郁癥在中醫(yī)中的不同證型，選用柴胡、貫葉金絲桃、郁金、連翹、生曬參、五味子、炒梔子、巴戟天、菟絲子、薄荷等15味中藥組成的3個(gè)中藥方，治則分別為：疏肝解郁，鎮(zhèn)靜安神;疏肝解郁，益氣振陽(yáng);養(yǎng)心安神，益氣振陽(yáng)，經(jīng)中醫(yī)臨床專家論證后開(kāi)展抗抑郁作用的比較研究，旨在探索新型高效能、副作用小的抗抑郁中藥，為抗抑郁新藥研發(fā)提供參考。

1 材料

1.1? 實(shí)驗(yàn)儀器

小鼠懸尾實(shí)時(shí)檢測(cè)分析系統(tǒng)（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所、中國(guó)航天員中心、北京康森益友科技有限公司共同研發(fā)，型號(hào)：KSXS01）;小鼠強(qiáng)迫游泳儀（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所、中國(guó)航天員中心、北京康森益友科技有限公司共同研發(fā)，型號(hào)：KSQT6）;小鼠自主活動(dòng)實(shí)時(shí)檢測(cè)分析系統(tǒng)（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所、中國(guó)航天員中心、西南醫(yī)科大學(xué)、北京康森益友科技有限公司共同研發(fā)，型號(hào)：KSYY-KC）;DT-1TB電子體溫計(jì)（上海醫(yī)用儀表廠）;AL104電子天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司）。

1.2? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康雄性ICR小鼠130只，SPF級(jí)，體質(zhì)量18～20 g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供[許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006]。動(dòng)物購(gòu)入后飼養(yǎng)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所動(dòng)物房[SYXK（京）2018-0020]，倫理委員會(huì)審批號(hào)：SLXD-201803170028。實(shí)驗(yàn)室溫度22～25 ℃，明暗周期12 h/12 h。動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，每籠5只，所有動(dòng)物均可自由獲得水和食物。本實(shí)驗(yàn)所用動(dòng)物及相關(guān)處置符合動(dòng)物福利的要求，通過(guò)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與動(dòng)物福利委員會(huì)的審查批準(zhǔn)。

1.3? 實(shí)驗(yàn)藥物

鹽酸帕羅西汀（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100357-201102）;鹽酸阿米替林片（湖南洞庭藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)B121131）;處方一、處方二、處方三濃縮提取的干膏（北京振東光明藥物研究院有限公司），處方一：柴胡、貫葉金絲桃、郁金、合歡皮、梔子、薄荷、香附、丹參;處方二：柴胡、貫葉金絲桃、郁金、五味子、炒梔子、薄荷、菟絲子、巴戟天、生曬參;處方三：菟絲子、巴戟天、人參、葛根、太子參。3個(gè)組方的干膏制備方法簡(jiǎn)述如下：（1）將各方中藥材洗凈碾碎后放入容器內(nèi)備用。（2）加入10倍量的蒸餾水浸泡4～5 h后，煮沸3～4 h過(guò)濾，第二次再加入5～10倍量蒸餾水煮沸2～3 h，過(guò)濾;第三次加入6～8倍量蒸餾水煮沸1～2 h，過(guò)濾;合并過(guò)濾液;濾液濃縮至相對(duì)密度約為1.28的浸膏備用。（3）將浸膏60 ℃真空干燥得干浸膏，粉碎后過(guò)100目篩，加入輔料備用。苦味酸（成都格雷西亞化學(xué)技術(shù)有限公司，批號(hào)201209135）;利血平（Sigma試劑公司，批號(hào)1001532801）。

2 方法

2.1? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按體質(zhì)量隨機(jī)分為13組：對(duì)照組、模型組、阿米替林組、帕羅西汀組、處方一低、中、高濃度組（2.5、7.5、22.5 g/kg）（相當(dāng)生藥量）、處方二低、中、高濃度組（2.5、7.5、22.5 g/kg）（相當(dāng)生藥量）、處方三低、中、高濃度組（2.5、7.5、22.5 g/kg）（相當(dāng)生藥量）。動(dòng)物按相應(yīng)分組預(yù)防給藥2周，分別于給藥7 d、14 d進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，測(cè)試期間繼續(xù)灌胃。

2.2? 小鼠懸尾檢測(cè)[8]

將小鼠尾端（約距尾尖1 cm處）用膠布固定并使其頭部向下，呈倒懸掛懸空狀態(tài)，小鼠掙扎時(shí)的張力變化信號(hào)由壓力傳感器接收，通過(guò)信號(hào)調(diào)理單元和采集傳輸電路，將數(shù)字化后結(jié)果送往PC機(jī)。小鼠適應(yīng)2 min后，系統(tǒng)自動(dòng)記錄4 min內(nèi)小鼠的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間[9]。動(dòng)物分組、給藥方式、劑量及時(shí)間同“2.1”項(xiàng)。于第7天和第14天給藥后1 h進(jìn)行懸尾測(cè)試。

2.3? 小鼠強(qiáng)迫游泳檢測(cè)

小鼠懸尾檢測(cè)結(jié)束次日，進(jìn)行小鼠強(qiáng)迫游泳檢測(cè)[10]。動(dòng)物分組、給藥方式、劑量及時(shí)間同“2.1”項(xiàng)。該實(shí)驗(yàn)利用強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)計(jì)算機(jī)實(shí)時(shí)檢測(cè)分析處理系統(tǒng)，由實(shí)驗(yàn)者設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)、幾何和照度標(biāo)定，然后將小鼠放入實(shí)驗(yàn)裝置中（高20 cm，直徑18 cm，水深12 cm，水溫23～25 ℃）。小鼠適應(yīng)2 min后，分析處理系統(tǒng)將自動(dòng)記錄4 min內(nèi)小鼠的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間和游泳距離。

2.4? 小鼠利血平拮抗實(shí)驗(yàn)

強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)后隔天進(jìn)行小鼠利血平拮抗實(shí)驗(yàn)，利血平實(shí)驗(yàn)主要根據(jù)文獻(xiàn)所描述的方法進(jìn)行[11]。動(dòng)物分組、給藥方式、劑量及時(shí)間同“2.1”項(xiàng)。末次給藥1 h后，對(duì)照組予以注射相同體積的溶劑，其余各組均按2 mg/kg腹腔注射利血平。

2.4.1? 自主活動(dòng)檢測(cè)? 在統(tǒng)計(jì)眼瞼下垂度之后進(jìn)行小鼠活動(dòng)度的測(cè)試。實(shí)驗(yàn)者將小鼠放置于自主活動(dòng)測(cè)試箱中，測(cè)定其在10 min內(nèi)運(yùn)動(dòng)時(shí)間、中央?yún)^(qū)時(shí)間等多個(gè)指標(biāo)。

2.4.2? 體溫觀察? 對(duì)小鼠進(jìn)行腹腔注射利血平4 h后，檢測(cè)肛溫。實(shí)驗(yàn)者將體溫計(jì)探頭插入小鼠肛門內(nèi)約1.5 cm，溫度計(jì)上讀數(shù)不再閃爍時(shí)為小鼠體溫。

2.4.3? 眼瞼下垂度的觀察? 完成腹腔注射利血平后1 h可評(píng)估小鼠眼瞼下垂度。觀測(cè)小鼠眼瞼下垂度時(shí)，將小鼠豎起，觀察15 s[12]，統(tǒng)計(jì)眼瞼下垂度，眼閉1/4為1分，眼閉1/2為2分，眼閉3/4為3分，全閉為4分[13]。

2.5? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0中的t檢驗(yàn)和單因素方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以“x±s”表示，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1? 對(duì)小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間的影響

在預(yù)防給藥7 d后，與對(duì)照組相比，陽(yáng)性藥阿米替林、帕羅西汀以及處方一的低濃度（2.5 g/kg），處方二的中、高濃度（7.5、22.5 g/kg）和處方三的中、高濃度（7.5、22.5 g/kg）均可以顯著縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間（P<0.05，P<0.01）。在預(yù)防給藥14 d后，與對(duì)照組相比，各陽(yáng)性藥組與處方一的低、高濃度（2.5、22.5 g/kg），處方二的低、中、高濃度（2.5、7.5、22.5 g/kg）以及處方三的低、中濃度（2.5、7.5 g/kg）顯著縮短了小鼠的懸尾不動(dòng)時(shí)間（P<0.05，P<0.01）。見(jiàn)圖1。

3.2? 對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)的影響

在預(yù)防給藥7 d后，與對(duì)照組相比，阿米替林、處方二的中濃度（7.5 g/kg）縮短了小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（P<0.05），阿米替林、帕羅西汀以及處方二的中濃度（7.5 g/kg）還顯著增加了小鼠的游泳距離（P<0.01）。在預(yù)防給藥14 d后，與對(duì)照組相比，阿米替林、帕羅西汀和處方一的低、中、高濃度（2.5、7.5、22.5 g/kg）以及處方二的低、中濃度（2.5、7.5 g/kg）均可顯著縮短強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（P<0.05，P<0.01）以及增加小鼠的游泳距離（P<0.05）。見(jiàn)圖2。

3.3? 利血平拮抗作用

3.3.1? 對(duì)利血平所致小鼠運(yùn)動(dòng)不能的影響? 與對(duì)照組相比，模型組的運(yùn)動(dòng)時(shí)間明顯減少（P<0.01）。與模型組相比，阿米替林、帕羅西汀，處方一的低濃度（2.5 g/kg），處方二的低濃度（2.5 g/kg）以及處方三的低、高濃度（2.5、22.5 g/kg）均能有效對(duì)抗利血平所致小鼠運(yùn)動(dòng)不能，顯著增加其運(yùn)動(dòng)時(shí)間（P<0.05）。見(jiàn)圖3A。

3.3.2? 對(duì)利血平所致小鼠體溫下降的影響? 與對(duì)照組相比，模型組小鼠的體溫出現(xiàn)明顯下降（P<0.01）。與模型組相比，阿米替林、帕羅西汀，處方一的高濃度（22.5 g/kg）、處方二的高濃度（22.5 g/kg）、處方三的高濃度（22.5 g/kg）均能顯著逆轉(zhuǎn)利血平所致小鼠體溫下降（P<0.05，P<0.01）。見(jiàn)圖3B。

3.3.3? 對(duì)利血平所致小鼠眼瞼下垂的影響? 與對(duì)照組相比，模型組小鼠眼瞼下垂度明顯增加（P<0.01）。與模型組相比，阿米替林、帕羅西汀，處方一的高濃度（22.5 g/kg），處方二的低、中濃度（2.5 g/kg、7.5 g/kg）和處方三的低、中、高濃度（2.5、7.5、22.5 g/kg）均對(duì)利血平所致小鼠眼瞼下垂有對(duì)抗作用（P<0.05，P<0.01）。見(jiàn)圖3C。

3.4? 3個(gè)處方抗抑郁作用比較

3個(gè)處方的作用比較結(jié)果顯示，在預(yù)防給藥7 d后，處方二在懸尾、強(qiáng)迫游泳中均表現(xiàn)出明顯的抗抑郁作用。在預(yù)防給藥14 d后，處方二在懸尾、強(qiáng)迫游泳及利血平拮抗實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)了較好的抗抑郁效果。

處方一和處方三也表現(xiàn)了一定的抗抑郁癥作用，但是效果不如處方二好。在預(yù)防給藥7 d后，處方一在懸尾實(shí)驗(yàn)中顯示出抗抑郁作用，但在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中無(wú)效;預(yù)防給藥14 d后，處方一在懸尾、強(qiáng)迫游泳和利血平拮抗實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出不同程度的抗抑郁作用。處方三預(yù)防給藥7 d或14 d后在懸尾實(shí)驗(yàn)、利血平拮抗實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出一定的抗抑郁作用。但是無(wú)論預(yù)防給藥7 d還是14 d，處方三在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中均未表現(xiàn)出抗抑郁作用。

4 討論

抑郁癥是一種非常嚴(yán)重且常見(jiàn)的慢性疾病[14-15]，它的出現(xiàn)和急劇升高的患病率給臨床治療帶來(lái)了新的挑戰(zhàn)。盡管傳統(tǒng)的抗抑郁藥能夠減輕抑郁癥發(fā)病率和減少抑郁癥復(fù)發(fā)率，但往往伴隨著嚴(yán)重的副作用[16-17]。因此，尋求具有高療效和少副作用的新型藥物是治療抑郁癥迫在眉睫的任務(wù)。目前國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥在臨床中防治抑郁癥效果顯著，逐步成為臨床治療抑郁癥的一種重要診療方案[18]。中醫(yī)理論認(rèn)為，抑郁癥多屬于“郁證”范疇，根據(jù)中醫(yī)辨證施治原則，將抑郁癥分為肝氣郁結(jié)、肝郁化火、心脾兩虛、氣滯血瘀、陰虛火旺等證型[19]。傳統(tǒng)治療抑郁癥的中藥處方大多以疏肝解郁為主要治則，然而臨床中抑郁癥的發(fā)病往往不是單一證型，常見(jiàn)多種證型復(fù)合。因此，本實(shí)驗(yàn)根據(jù)3種治則：疏肝解郁，鎮(zhèn)靜安神;疏肝解郁，益氣振陽(yáng);養(yǎng)心安神，益氣振陽(yáng)，組配了3個(gè)中藥處方，以期探討此3種治則下的最優(yōu)治則組方。

懸尾實(shí)驗(yàn)及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是經(jīng)典的動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)，常用于抗抑郁藥物的初篩及動(dòng)物抑郁樣行為的評(píng)價(jià)[20-21]。兩種實(shí)驗(yàn)的基本原理都是將動(dòng)物置于不可回避的環(huán)境中，通過(guò)記錄動(dòng)物不動(dòng)時(shí)間所反映的行為絕望狀態(tài)來(lái)評(píng)價(jià)其抑郁程度。懸尾實(shí)驗(yàn)不僅是一種應(yīng)激性抑郁動(dòng)物模型的造模方法，也是抑郁動(dòng)物模型常用的檢測(cè)方法之一[22]。懸尾實(shí)驗(yàn)可以篩選出5-HT和NE再攝取抑制劑以及選擇性5-HT再攝取抑制劑等抗抑郁藥物，強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)可以篩選GABA受體拮抗劑，二者結(jié)合具有較強(qiáng)篩選能力。本研究中，3個(gè)處方給藥組及陽(yáng)性藥組均能顯著縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間，提示3個(gè)處方均具有一定的抗抑郁作用。在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中，處方二不論預(yù)防給藥7 d還是14 d，均能明顯改善小鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的抑郁樣行為，但處方一給藥14 d后才能起效，而處方三不論給藥7 d還是14 d，均不能改善小鼠在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的抑郁樣行為。這些結(jié)果提示，3個(gè)處方相比，處方二是最佳抗抑郁方。

利血平拮抗模型為最早用于抗抑郁藥研究的藥物誘導(dǎo)型動(dòng)物模型，利血平致抑郁樣模型可以復(fù)制抑郁癥的某些病理特征，其誘發(fā)動(dòng)物的行為性抑郁是通過(guò)降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。操作簡(jiǎn)易，常用于藥物的初篩[23-24]。本研究中，3個(gè)處方均可不同程度地逆轉(zhuǎn)利血平所導(dǎo)致的小鼠體溫下降;均能有效對(duì)抗利血平所導(dǎo)致小鼠運(yùn)動(dòng)不能，增加運(yùn)動(dòng)時(shí)間;均能顯著對(duì)抗利血平所導(dǎo)致的小鼠眼瞼下垂。說(shuō)明3個(gè)處方對(duì)利血平拮抗實(shí)驗(yàn)均具有不同程度的改善作用。

3個(gè)處方的比較中我們發(fā)現(xiàn)，處方二無(wú)論給藥時(shí)間長(zhǎng)短，在3種檢測(cè)方法中均有穩(wěn)定和明顯的抗抑郁作用，且給藥7 d就效果顯著，說(shuō)明處方二抗抑郁起效快、效果好，從現(xiàn)代藥理學(xué)角度初步確定了該處方為主治抑郁癥的3個(gè)處方中的最優(yōu)方。有報(bào)道[25]指出，抗抑郁中藥的應(yīng)用與研究通?；谂R床中醫(yī)對(duì)于抑郁癥病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)，一般以“疏肝解郁”為基本治則，其中最具代表性的單味中藥有柴胡、郁金、薄荷、梔子等。處方一與處方二比較，兩方均以疏肝解郁為基本治則，均配伍了柴胡、貫葉金絲桃、郁金、薄荷、梔子。從現(xiàn)代藥理學(xué)研究角度出發(fā)，柴胡中的柴胡皂苷a可通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥因子及相關(guān)通路，調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)水平，上調(diào)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)，改善神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸功能，從而發(fā)揮抗抑郁作用[26]。郁金可通過(guò)調(diào)節(jié)單胺類物質(zhì)，干預(yù)多巴胺能神經(jīng)突觸該類通路發(fā)揮抗抑郁作用[27]。梔子中的西紅花苷-1可能是其主要抗抑郁活性成分，可調(diào)節(jié)抑郁癥動(dòng)物海馬區(qū)的神經(jīng)因子或單胺類神經(jīng)遞質(zhì)[28]。處方二在疏肝解郁治則的基礎(chǔ)上新添菟絲子和巴戟天兩味中藥，分別有“補(bǔ)益肝腎”和“益氣振陽(yáng)”的功效，目前研究[29]表明，菟絲子丸加味治療更年期綜合征患者的焦慮及抑郁癥狀療效顯著，在臨床中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。巴戟天提取物巴戟天多糖能夠減輕抑郁癥大鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)，減輕海馬區(qū)神經(jīng)元損傷，改善抑郁癥模型大鼠認(rèn)知行為障礙[30]。巴戟天多聚糖還可以通過(guò)上調(diào)動(dòng)物血清維生素D水平來(lái)發(fā)揮抗抑郁的作用[31]。處方二中加入菟絲子和巴戟天，可達(dá)到更好的抗抑郁癥作用。處方二與處方三比較，兩方均采用了益氣振陽(yáng)的治則，配伍了菟絲子和巴戟天兩味藥物，但處方三還加入補(bǔ)虛扶正的人參、太子參，其組方目的重在補(bǔ)氣振陽(yáng)，未能兼顧疏肝解郁的功效，所以效果不如處方二。本研究認(rèn)為，處方二抗抑郁效果最好，其有效機(jī)制可能與處方二在“疏肝解郁”的基礎(chǔ)上兼用“益氣振陽(yáng)”的治療方法，增加補(bǔ)氣振陽(yáng)的藥物有關(guān)。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腎陽(yáng)為人體生命活力的根本，陽(yáng)氣衰微，則氣化無(wú)力，臟腑功能衰退，從而出現(xiàn)情緒低落、記憶力下降、注意力不集中、思維遲緩、反應(yīng)下降以及意志減退等焦慮和抑郁癥狀[32]。清代醫(yī)家張志聰在《黃帝內(nèi)經(jīng)素問(wèn)集注》中論述：“陽(yáng)氣者，內(nèi)養(yǎng)五臟之神，出而榮養(yǎng)筋骨”，“陽(yáng)氣者，水谷之精也，故先養(yǎng)于五臟之神”。指出陽(yáng)氣具有溫暖臟腑、營(yíng)養(yǎng)神志的作用。故陽(yáng)氣不足，是抑郁癥不可忽視的病理基礎(chǔ)。運(yùn)用中醫(yī)理念治療抑郁癥，不僅應(yīng)從“凡郁皆肝病”，疏肝理氣，寧心安神的傳統(tǒng)辨證思路著手，也應(yīng)該重視整體機(jī)體陰陽(yáng)偏勝偏衰的病理現(xiàn)象。

綜上，抑郁癥是一種發(fā)病機(jī)制不明、發(fā)病率高、危害大的人類心理健康疾病，高效低毒防治藥物的研發(fā)成為亟待解決的問(wèn)題[33]。本研究通過(guò)3種經(jīng)典的抑郁動(dòng)物行為檢測(cè)方法直觀評(píng)價(jià)了3種中藥方的抗抑郁效果，并篩選出了改善抑郁效果明顯的處方二，為后續(xù)研究處方二的抗抑郁作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)，為研發(fā)新型抗抑郁中藥提供一定的科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] LIU X J， LIU F， YUE R C， et al. The antidepressant-like effect of bacopaside I： Possible involvement of the oxidative stress system and the noradrenergic system[J]. Pharmacology Biochemistry and Behavior， 2013， 110： 224-230.

[2] 羅珺鈺，劉? 芳，羅耀輝，等.抑郁癥的中西醫(yī)藥物治療進(jìn)展[J].云南中醫(yī)中藥雜志，2019，40（5）：84-87.

[3] SKAER T L， SCLAR D A， ROBISON L M. Trends in prescriptions for antidepressant pharmacotherapy among US children and adolescents diagnosed with depression， 1990 through 2001： An assessment of accordance with treatment recommendations from the American Academy of Child and Adolescent Psychiatry[J]. Clinical Therapeutics， 2009， 31： 1478-1487.

[4] 高貴元，黃? 捷，劉? 丹，等.抑郁癥的發(fā)病機(jī)制及抗抑郁藥物的研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2021，18（1）：52-55，70.

[5] 張? 瀟，田俊生，劉? 歡，等.抗抑郁中藥新藥研發(fā)進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志，2017，42（1）：29-33.

[6] THACHIL A F， MOHAN R， BHUGRA D. The evidence base of complementary and alternative therapies in depression[J]. Journal of Affective Disorders， 2008， 23（S2）： 23-35.

[7] ZHANG Y W， CHENG Y C. Challenge and prospect of traditional Chinese medicine in depression treatment[J]. Frontiers in Neuroscience， 2019， 13： 190.

[8] STERU L， CHERMAT R， THIERRY B， et al. The tail suspension test： A new method for screening antidepressants in mice[J]. Psychopharmacology， 1985， 85（3）： 367-370.

[9] RODRIGUES A L S， DA SILVA G L， MATEUSSI A S， et al. Involvement of monoaminergic system in the antidepressant-like effect of the hydroalcoholic extract of Siphocampylus verticillatus[J]. Life Sciences， 2002， 70（12）： 1347-1358.

[10] PORSOLT R D， BERTIN A， JALFRE M. Behavioral despair in mice： A primary screening test for antidepressants[J]. Archives Internationales De Pharmacodynamie et De Therapie， 1977， 229（2）： 327-336.

[11] El Yacoubi M， Ledent C， Parmentier M， Bertorelli R， Ongini E， Costentin J，Vaugeois JM， Adenosine A2A receptor antagonists are A2A receptor knockout mice[J]. British Journal of Pharmacology， 2001， 134（1）： 68-77.

[12] 栗俞程，李寒冰，張? 賓.黃芩總黃酮對(duì)小鼠的抗抑郁作用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（23）：168-170.

[13] ZETLER G. Analgesia and ptosis caused by caerulein and cholecystokinin octapeptide （CCK-8）[J]. Neuropharmacology， 1980， 19（5）： 415-422.

[14] NEMEROFF C B. Stress， menopause and vulnerability for psychiatric illness[J]. Expert Review of Neurotherapeutics， 2007， 7（sup1）： S11-S13.

[15] 姜? 寧，范琳犀，楊玉潔，等.金釵石斛提取物對(duì)慢性不可預(yù)見(jiàn)應(yīng)激模型小鼠的抗抑郁作用[J].生理學(xué)報(bào)，2017，69（2）：159-166.

[16] KRISHNAN V， NESTLER E J. The molecular neurobiology of depression[J]. Nature， 2008， 455（7215）： 894-902.

[17] WONG M L， LICINIO J. Research and treatment approaches to dep?ression[J]. Nature Reviews Neuroscience， 2001， 2（5）： 343-351.

[18] 王愛(ài)華，王? 娟，甘博文.抑郁癥的中醫(yī)藥治療研究進(jìn)展[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2019，31（6）：112-116.

[19] 徐春燕，田金洲，時(shí)? 晶，等.抑郁癥的中醫(yī)證候特征研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013，31（4）：810-813.

[20] 薛? 濤，鄔麗莎，劉新民，等.抑郁癥動(dòng)物模型及評(píng)價(jià)方法研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2015，23（3）：321-326.

[21] XU Y， KU B S， YAO H Y， et al. The effects of curcumin on depressive-like behaviors in mice[J]. European Journal of Pharmacology， 2005， 518（1）： 40-46.

[22] 曲書(shū)苑，龐寶興.應(yīng)激性抑郁動(dòng)物模型評(píng)價(jià)方法研究進(jìn)展[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2019，36（6）：59-63.

[23] 高雪松，王永志，李? 麗，等.利血平致抑郁樣嚙齒類動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)，2017，34（2）：57-61.

[24] 劉? 瑞，黃慶軍.腹腔注射利血平對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響[J].汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，23（1）：22-24，65.

[25] 郝銀麗.抗抑郁中藥組分研究進(jìn)展[J].西部中醫(yī)藥，2019，32（11）： 139-144.

[26] 劉? 敏，孫亞南，于春月，等.柴胡皂苷a抗抑郁作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2019，34（3）：867-871.

[27] 李? 靈，陳? 健，郭? 煒，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)中藥郁金治療抑郁癥作用機(jī)制研究[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2020，22（2）：121-125.

[28] 張慧慧，童應(yīng)鵬，江? 瑜，等.梔子抗抑郁作用實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2019，29（6）：522-525.

[29] 高志云，黃秀娟，高修安，等.蓯蓉菟絲子丸治療更年期綜合征伴焦慮抑郁38例[J].中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2012，10（10）：28-29.

[30] 劉建金.巴戟天多糖對(duì)抑郁癥大鼠氧化應(yīng)激及認(rèn)知行為的影響[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2011，49（16）：1-2， 5.

[31] 陳云志，陳家旭，秦? 忠，等.從維生素D軸探討巴戟天抗抑郁癥的作用機(jī)制[J].西部中醫(yī)藥，2017，30（10）：128-130.

[32] 史? 玲，劉仁嶺，劉進(jìn)蕊.中藥溫陽(yáng)益氣法治療抑郁癥研究概況[J]. 中國(guó)老年保健醫(yī)學(xué)，2014，12（3）：82-83.

[33] 牛雅娟.《中國(guó)抑郁障礙防治指南》藥物治療解讀[J].臨床藥物治療雜志，2018，16（5）：6-8.